摘要：針對(duì)教材中艾弗里的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)為什么沒(méi)有加入多糖酶，噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)的研究背景和實(shí)驗(yàn)中的保溫時(shí)間，兩大實(shí)驗(yàn)的關(guān)系展開討論，并給出自己的觀點(diǎn)和證據(jù)。

關(guān)鍵詞：艾弗里；肺炎雙球菌；赫爾希；噬菌體；科學(xué)史

中圖分類號(hào)：G633.91文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1992-7711（2020）11-0175

近幾年，有關(guān)艾弗里的肺炎雙球菌的體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)中的疑問(wèn)，討論聲一直不斷。下面，筆者針對(duì)其中仍然存在的幾個(gè)問(wèn)題說(shuō)一說(shuō)自己的觀點(diǎn)。

1. 2019年人教版高中生物必修二教材中，艾弗里的肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，為什么沒(méi)有設(shè)置添加多糖酶的實(shí)驗(yàn)組？

新版必修二教材，已經(jīng)對(duì)艾弗里的肺炎雙球菌的體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了重新編寫，恢復(fù)了該實(shí)驗(yàn)的真實(shí)面貌；并且配以簡(jiǎn)明、精確的實(shí)驗(yàn)插圖，讓學(xué)生迅速并能充分理解實(shí)驗(yàn)的過(guò)程及其結(jié)論。教材對(duì)這個(gè)實(shí)驗(yàn)的描述大致是：艾弗里和他的同事將加熱致死的S型細(xì)菌破碎后，設(shè)法去除大部分糖類、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)，制成了細(xì)胞提取物；將細(xì)胞提取物與R型菌混合培養(yǎng)后，出現(xiàn)了S型菌；然后在細(xì)胞提取物中，分別加入蛋白酶（或RNA酶、酯酶）作為該實(shí)驗(yàn)的第二（三、四）組，結(jié)果細(xì)胞提取物仍然具有轉(zhuǎn)化活性。這里唯獨(dú)沒(méi)有提到加入莢膜多糖酶，難道是剩余少量的多糖對(duì)實(shí)驗(yàn)沒(méi)有影響？或者是艾弗里的實(shí)驗(yàn)只是為了解決DNA或蛋白質(zhì)是遺傳物質(zhì)，沒(méi)必要再對(duì)莢膜多糖進(jìn)行實(shí)驗(yàn)？1939年，艾弗里實(shí)驗(yàn)室的阿洛維斯研究發(fā)現(xiàn)，將S型細(xì)菌破碎后得到無(wú)細(xì)胞提取液也能成功轉(zhuǎn)化R型菌。在無(wú)細(xì)胞提取液中加入酒精后，觀察到糖漿狀的固態(tài)沉淀物。有文章指出是因?yàn)槎嗵遣荒苡镁凭恋?，所以沒(méi)有必要再進(jìn)行轉(zhuǎn)化檢測(cè)。而在張麗萍教授等主編的《生物化學(xué)簡(jiǎn)明教程》中明確指出：多糖提取物一般先用乙醇進(jìn)行反復(fù)沉淀除去一部分極性小的雜質(zhì)，再將沉淀得到的粗多糖進(jìn)行脫色和去除蛋白質(zhì)?；仡櫚ダ锏脑陌l(fā)現(xiàn)，他對(duì)轉(zhuǎn)化物質(zhì)的提取鑒定實(shí)驗(yàn)中，先用鹽水洗滌加熱殺死的S型菌，除去大部分的莢膜多糖、蛋白質(zhì)和核糖核酸，接下來(lái)的處理中也用到酒精沉淀，之后加入一種純化的細(xì)菌酶制劑水解莢膜多糖，再用血清學(xué)分析試驗(yàn)確定莢膜多糖的破壞程度，最后又進(jìn)一步的純化之后，才做的酶學(xué)分析、定性化學(xué)試驗(yàn)等。

2.赫爾希和蔡斯在做“噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)”之前，對(duì)噬菌體具體的侵染過(guò)程清楚嗎？在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，將標(biāo)記的噬菌體與細(xì)菌混合后，“經(jīng)過(guò)短時(shí)間的保溫”這個(gè)具體的時(shí)間又是如何確定的？

經(jīng)多次查找資料發(fā)現(xiàn)：當(dāng)時(shí)的科學(xué)背景是，科學(xué)家已經(jīng)了解到T2噬菌體是一種能感染并摧毀大腸桿菌的病毒。侵染細(xì)菌時(shí)，將其遺傳物質(zhì)注入大腸桿菌后指導(dǎo)新病毒的形成，而病毒的外殼仍然留在細(xì)菌外。一段時(shí)間后，被感染的大腸桿菌就會(huì)破裂釋放出成千上萬(wàn)的子代病毒。T2噬菌體只含有DNA和蛋白質(zhì)兩種分子，所以他們只要搞清楚進(jìn)入細(xì)菌的是病毒的蛋白質(zhì)還是病毒的DNA，就能確定哪一種物質(zhì)才是其真正的遺傳物質(zhì)。教材中對(duì)這部分內(nèi)容的描述是：T2噬菌體侵染大腸桿菌后，就會(huì)在自身遺傳物質(zhì)的作用下，利用大腸桿菌體內(nèi)的物質(zhì)來(lái)合成自身的組成成分進(jìn)行大量增殖。部分教師由于對(duì)這段科學(xué)史的不了解和對(duì)教材內(nèi)容的誤解，在授課時(shí)先向?qū)W生講解了噬菌體的具體侵染過(guò)程，導(dǎo)致學(xué)生認(rèn)為“噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)”——這個(gè)在科學(xué)史上具有里程碑式的實(shí)驗(yàn)，沒(méi)必要做。

教材中提到的“經(jīng)短時(shí)間的保溫”的具體時(shí)間，在1939年就被一位德國(guó)噬菌體學(xué)派創(chuàng)始人給出了答案。他經(jīng)過(guò)分析噬菌體的一步生長(zhǎng)曲線發(fā)現(xiàn)：T2噬菌體從感染細(xì)菌到細(xì)菌釋放子代噬菌體的這段時(shí)間是20min。筆者建議教材在編寫時(shí)，對(duì)“短時(shí)間的保溫”應(yīng)給出一個(gè)合理的解釋或注解。這樣既可以避免在教學(xué)過(guò)程中出現(xiàn)沒(méi)有必要的爭(zhēng)端，又可以讓學(xué)生了解科學(xué)研究的發(fā)現(xiàn)史，從而真正理解科學(xué)家的思路和方法。

3.“艾弗里的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)”與“噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)”是遞進(jìn)關(guān)系嗎？

有不少資料和文章表明二者是遞進(jìn)關(guān)系，認(rèn)為證明DNA是遺傳物質(zhì)，噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)更具有說(shuō)服力。對(duì)于這種觀點(diǎn)，筆者不認(rèn)同。2004版教材中這樣描述：“1952年，赫爾希和蔡斯以T2噬菌體為實(shí)驗(yàn)材料，利用放射性同位素標(biāo)記的新技術(shù)，完成了另一個(gè)更具有說(shuō)服力的實(shí)驗(yàn)?！倍?019版新教材已經(jīng)改為：“1952年，美國(guó)遺傳學(xué)家赫爾希和他的助手蔡斯以T2噬菌體為實(shí)驗(yàn)材料，利用放射性同位素標(biāo)記技術(shù)，完成了另一個(gè)有說(shuō)服力的實(shí)驗(yàn)。”稍稍幾個(gè)字的變動(dòng)，已看出端倪，教材編寫的專家們已經(jīng)否定了二者的遞進(jìn)關(guān)系，承認(rèn)了兩者在“證明DNA是遺傳物質(zhì)”的地位上是相同的。人們對(duì)艾弗里實(shí)驗(yàn)的質(zhì)疑，源于他分離純化的轉(zhuǎn)化因子中尚含有極微量的蛋白質(zhì)（原文中的描述是：通過(guò)血清學(xué)方法在1：50000的稀釋液中，檢測(cè)到肺炎雙球菌蛋白）。再翻開赫爾希當(dāng)年那篇轟動(dòng)世界的文章，在最后“總結(jié)”部分的第六點(diǎn)指出：用放射性S標(biāo)記的噬菌體，感染細(xì)菌所產(chǎn)生的子代噬菌體的放射性不到親本的1%；用放射性P標(biāo)記的噬菌體，產(chǎn)生的后代可以獲得30%或更多的親代P。從這里可以看出，噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)也并沒(méi)有完全排除蛋白質(zhì)的影響。另根據(jù)赫爾希和蔡斯的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)看到，大約30%的35S留在了細(xì)菌外表面，剩下35S的去向沒(méi)有給出合理的解釋；大約30%的親代32P出現(xiàn)在子代噬菌體的DNA中，剩下70%32P的去向呢？還有噬菌體蛋白質(zhì)約有10%是不含S，無(wú)法被35S標(biāo)記，如何證明這些蛋白質(zhì)沒(méi)有發(fā)揮遺傳物質(zhì)的作用呢？雖然赫爾希和蔡斯用同位素標(biāo)記技術(shù)直觀地演示了噬菌體遺傳信息的傳遞過(guò)程，但是對(duì)數(shù)據(jù)的分析論證上存在明顯的漏洞。此時(shí)再看艾弗里的“總結(jié)”部分：“對(duì)分離純化的轉(zhuǎn)化物質(zhì)進(jìn)行化學(xué)分析、酶分析、結(jié)合電泳的血清學(xué)分析、超速離心法和紫外線光譜法的研究數(shù)據(jù)均表明不含蛋白質(zhì)、脂質(zhì)或多糖，主要為脫氧核糖核酸?！笔遣皇怯X得當(dāng)時(shí)對(duì)艾弗里的實(shí)驗(yàn)提出質(zhì)疑的科學(xué)家吹毛求疵？

兩篇文章均有瑕疵，為什么會(huì)受到截然不同的兩種待遇？回顧那段科學(xué)研究歷史，不難發(fā)現(xiàn)是因?yàn)槎咚幍膶W(xué)術(shù)背景不同，人們對(duì)DNA認(rèn)識(shí)程度的差異導(dǎo)致的。艾弗里的文章發(fā)表時(shí)，有關(guān)核酸組成的“四核苷酸假說(shuō)”正統(tǒng)治人們的思想；而到了赫爾希的文章出世時(shí)，人們已經(jīng)拿到高質(zhì)量的DNA衍射圖譜，并得知在DNA分子中腺嘌呤的量總是等于胸腺嘧啶的量，鳥嘌呤的量總是等于胞嘧啶的量和不同物種中的DNA堿基組成比例不同，從而否定了列文提出的統(tǒng)治人們思想長(zhǎng)達(dá)30年的“四核苷酸假說(shuō)”。

透過(guò)枯燥的知識(shí)和冰冷的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象，讓學(xué)生看到這些實(shí)驗(yàn)背后科學(xué)家對(duì)科學(xué)知識(shí)的渴求，十年如一日的堅(jiān)持，兢兢業(yè)業(yè)、淡泊名利的精神，這樣才能促進(jìn)生物學(xué)學(xué)科核心素養(yǎng)的達(dá)成。正如2017版的《普通高中生物學(xué)課程標(biāo)準(zhǔn)》所說(shuō)：“科學(xué)是一個(gè)發(fā)展的過(guò)程。學(xué)習(xí)生物科學(xué)史能使學(xué)生沿著科學(xué)家探索生物世界的道路，理解科學(xué)的本質(zhì)和科學(xué)研究的思路和方法，學(xué)習(xí)科學(xué)家獻(xiàn)身科學(xué)的精神，這對(duì)提高學(xué)生的生物學(xué)學(xué)科核心素養(yǎng)是很有意義的?！?/p>

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作者簡(jiǎn)介：

王娟，1983，女，中學(xué)一級(jí)教師，碩士學(xué)位。

（作者單位：廣東省珠海市斗門第一中學(xué)519100）