黃山春 覃偉權(quán) 閻偉
摘要 結(jié)合近年來在紅棕象甲飼養(yǎng)方面的經(jīng)驗(yàn),從紅棕象甲供試蟲源的獲得、飼養(yǎng)方法、注意事項(xiàng)等方面,詳細(xì)地闡述了紅棕象甲試驗(yàn)種群人工飼養(yǎng)技術(shù)。采用該技術(shù)飼養(yǎng)的紅棕象甲各項(xiàng)生長(zhǎng)和發(fā)育指標(biāo)正常。該飼養(yǎng)技術(shù)具有操作簡(jiǎn)便、飼養(yǎng)周期短、存活率高等優(yōu)勢(shì),是實(shí)現(xiàn)試蟲規(guī)?;?、全周年繼代飼養(yǎng)的有效方法。
關(guān)鍵詞 紅棕象甲;半人工飼料;人工飼養(yǎng)技術(shù)
中圖分類號(hào) S433.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A
文章編號(hào) 0517-6611(2020)03-0139-04
Abstract Combining with the experience of our research group in the breeding of red palm weevil in recent years,this paper expounded in detail the artificial feeding technology of the experimental population of red palm weevil from the aspects of the acquisition of the experimental insect source of red palm weevil,the feeding methods,and precautions.The growth and development indexes of the red palm weevil fed by the technology were normal.The technology had the advantages of simple operation,short feeding period and high survival rate,and was an effective method for realizing largescale and fullage breeding.
Key words Rhynchophorus ferrugineus;Semiartificial diet;Artificial breeding technology
紅棕象甲(Rynchophorus ferrugineus Olivier)屬于鞘翅目(Coleoptera)象甲科(Curculionidae)害蟲,是一種嚴(yán)重危害棕櫚科植物的林業(yè)檢疫性有害生物[1-3]。該蟲主要以幼蟲在寄主植物的葉柄基部和生長(zhǎng)點(diǎn)附近的桿部鉆蛀危害,受害癥狀初期不易發(fā)現(xiàn),一旦發(fā)現(xiàn),多無法挽救[4-6]。在對(duì)紅棕象甲的生物學(xué)、生態(tài)學(xué)、化學(xué)和生物農(nóng)藥制劑的篩選、測(cè)定和入侵規(guī)律等方面的研究中需要大批量、發(fā)育一致的標(biāo)準(zhǔn)化供試蟲源[7]。目前研究者往往使用甘蔗或棕櫚植物新鮮組織來飼養(yǎng)紅棕象甲,但使用甘蔗或棕櫚植物新鮮組織飼養(yǎng)紅棕象甲有非常明顯的缺陷,首先,甘蔗生長(zhǎng)、成熟有一定的季節(jié)性,因此在產(chǎn)量上往往不能滿足需求,而棕櫚植物價(jià)格十分昂貴,用于飼養(yǎng)紅棕象甲成本偏高、浪費(fèi)資源;其次,成蟲將卵產(chǎn)在甘蔗或棕櫚植物上,卵在挑揀時(shí)十分容易受到傷害,降低了卵的孵化率;最后,檢查幼蟲存活和發(fā)育情況時(shí),一般需要剖開甘蔗或棕櫚植物組織查找,但剛孵化的幼蟲體型微小,且與植物組織顏色非常相近,這使得尋找幼蟲變得十分不易,且很容易傷害到幼蟲。以上原因使得研究者迫切需要找到一種可以代替甘蔗或棕櫚植物新鮮組織的人工合成飼料或天然飼料。自20世紀(jì)70年代以來,國(guó)外陸續(xù)開展了對(duì)紅棕象甲人工飼養(yǎng)技術(shù)的研究。1978年,Rahalkar等[7]發(fā)明了甘蔗渣半合成飼料,并成功飼養(yǎng)了多個(gè)世代。1997年Kaakeh等[8]利用他們發(fā)明的人工飼料飼養(yǎng)紅棕象甲,盡管成功地獲得了成熟的幼蟲、蛹和成蟲,但卵存活率并未明顯提高,成蟲產(chǎn)卵量較使用甘蔗飼養(yǎng)紅棕象甲的方法顯著下降。2002年Salama等[9]用以棕櫚冠組織、麥麩和麥片為主要成分的半人工飼料飼養(yǎng)紅棕象甲,結(jié)果表明成蟲產(chǎn)卵量有明顯的提升,但幼蟲期比甘蔗培養(yǎng)還有少許延長(zhǎng)。2009年Shanina等[10]嘗試使用20%的蜂蜜棉絮飼養(yǎng)成蟲獲得了成功,但繼續(xù)嘗試使用蘸滿60%蜂蜜水的棉絮飼養(yǎng)幼蟲時(shí)發(fā)現(xiàn)這種飼養(yǎng)方法下的幼蟲僅達(dá)到4齡,而一般甘蔗飼養(yǎng)的幼蟲可達(dá)9齡。王鳳等[11]使用新的甘蔗飼養(yǎng)方法飼養(yǎng)的幼蟲可達(dá)12齡,但整個(gè)世代發(fā)育歷期高達(dá)130.80 d,整個(gè)世代存活率僅有21.67%。2011年Al-ayedh[12]使用以玉米粉、小麥粉為主要成分的半人工合成飼料,盡管成功飼養(yǎng)了紅棕象甲,但幼蟲的體重出現(xiàn)了嚴(yán)重下降。
從許多人工飼養(yǎng)紅棕象甲的案例中可以看出,與從自然界采集試蟲相比,人工飼養(yǎng)的紅棕象甲有既不受寄主發(fā)育狀況、生長(zhǎng)季節(jié)等方面的限制,又有可以有效經(jīng)濟(jì)地獲得大批量發(fā)育整齊一致試蟲的優(yōu)勢(shì)。上述研究工作一定程度上解決了通過人工飼養(yǎng)技術(shù)手段比較經(jīng)濟(jì)地獲得大批量發(fā)育整齊一致的試蟲問題,但仍不能實(shí)現(xiàn)試蟲高品質(zhì)、規(guī)?;?、周年繼代飼養(yǎng)。筆者在國(guó)內(nèi)外研究的基礎(chǔ)上,提出了一種經(jīng)濟(jì)效益良好、操作簡(jiǎn)便的飼養(yǎng)方法,既可以批量獲取大量試蟲,又成功解決了使用甘蔗、棕櫚植物新鮮組織培養(yǎng)紅棕象甲的一系列問題。
1 紅棕象甲人工飼養(yǎng)技術(shù)
1.1 供試蟲源的獲得
1.1.1 信息素誘捕成蟲。
在紅棕象甲危害的棕櫚園內(nèi),將誘捕器懸掛在樹桿或枝條上,也可以掛在埋植的“T”型支架上(“T”型支架也可由三腳架來代替),信息素誘芯掛置在誘捕器的第二層或第三層漏斗的中間。誘捕器懸掛高度以便于操作,誘捕器下端與地面的距離以1 m為宜。在紅棕象甲發(fā)生區(qū)域1 hm2棕櫚園掛15套誘捕器和信息素誘芯。每7 d收集蟲源1次,14 d加水或換水1次,90~120 d更換1次信息素誘芯(圖1)。
1.1.2 人工采蟲。選擇紅棕象甲危害較重的椰子樹等寄主植物,將受害椰子樹等寄主植物砍倒,并將受害植株生長(zhǎng)點(diǎn)劈開,此時(shí)幼蟲、蛹與成蟲仍在樹內(nèi)危害,從中剝撿幼蟲,撿拾成蟲與蛹,帶回飼養(yǎng)(圖1)。
1.2 成蟲的飼養(yǎng)
將成蟲按雌雄成蟲1∶1的配比放入直徑6 cm的蟲卵提取瓶(專利號(hào):201720817706.6),每瓶2頭。提取瓶蓋插上一根鐵絲,鐵絲另一端吊有蘸滿質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%蜂蜜水的紗布裹住的小團(tuán)棉球,瓶蓋留有透氣孔,等待成蟲交配產(chǎn)卵。將養(yǎng)蟲室室溫控制在24~28 ℃,光照14 L∶10 D,濕度75%±5%,成蟲將會(huì)在1~6 d后產(chǎn)卵,紅棕象甲產(chǎn)卵時(shí),成蟲將產(chǎn)卵器插入棉球內(nèi),然后將卵產(chǎn)在棉球內(nèi),少數(shù)卵產(chǎn)在棉球外。每2~3 d要檢查提取瓶,將所產(chǎn)在棉球的卵用濕潤(rùn)的細(xì)毛筆輕輕挑到鋪有水浸濕紗布的培養(yǎng)皿中,在(26±2) ℃的條件下,卵將在1~2 d內(nèi)孵化為幼蟲,再將培養(yǎng)皿中孵化的幼蟲用濕潤(rùn)的細(xì)毛筆挑入飼養(yǎng)低齡幼蟲的培養(yǎng)皿中。每7 d更換一次飼養(yǎng)成蟲的棉球,并仔細(xì)解開紗布,拆開更換下來的棉球,將其中的卵與幼蟲用濕潤(rùn)的細(xì)毛筆挑到不同的培養(yǎng)皿中(圖2)。
1.3 幼蟲的飼養(yǎng)
1.3.1 幼蟲人工飼料的成分及含量。椰子粉300 g、玉米粉120 g、燕麥粉120 g、干酪素90 g、葡萄糖60 g、蔗糖60 g、酵母30 g、韋氏鹽12 g、膽固醇6 g、瓊脂 60 g、水1 900 mL、維生素C 6 g、 山梨酸鉀 6 g。
1.3.2 幼蟲人工飼料的配制方法。
幼蟲人工飼料的配制過程:①將瓊脂加入到70 ℃左右1 600 mL水中,繼續(xù)加熱直至煮沸,攪拌至完全融化,停止加熱,隨后將椰子粉、玉米粉、燕麥粉、干酪素、葡萄糖、蔗糖、酵母、韋氏鹽、膽固醇倒入瓊脂勻漿中攪拌均勻,獲得混合物A;②將維生素C和山梨酸鉀溶于300 mL水中,獲得混合物B;③將混合物B倒入混合物A中攪拌混勻得到混合物C;④將混合物C倒入保鮮盒中,完全冷卻凝固后放入4 ℃冰箱中備用。
1.3.3 人工飼養(yǎng)方法。
紅棕象甲幼蟲人工飼養(yǎng)方法:①將剛孵化的幼蟲用濕潤(rùn)的細(xì)毛筆挑入盛有飼料的培養(yǎng)皿中,用保鮮膜封住培養(yǎng)皿,并留有透氣孔;為了避免幼蟲相互殘殺,影響試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,低齡幼蟲長(zhǎng)到合適大小時(shí)(5 d左右),需將其用塑料勺輕輕地舀到裝有紅棕象甲幼蟲人工飼料的飼養(yǎng)杯,封上保鮮膜并留有氣孔,單頭飼養(yǎng)至臨近化蛹做繭(45 d左右),在整個(gè)幼蟲飼養(yǎng)過程中共調(diào)配飼料6~7次。②更換飼料時(shí),需將飼料殘?jiān)謇砀蓛?,幼蟲留在盒中,再加入適量新的飼料,無需更換飼養(yǎng)杯和保鮮膜。飼養(yǎng)過程中,記錄幼蟲歷期、幼蟲存活率、蛹重、蛹?xì)v期、平化蛹率、羽化率、成蟲體重、單雌產(chǎn)卵量和卵孵化率(圖3)。
1.4 蛹的處理
首先將新鮮的椰子殼劈開,取其外殼纖維部分切為條狀,整齊的堆滿塑料桶,再用勺子將成熟幼蟲轉(zhuǎn)移至椰子外殼纖維上,用保鮮膜封口并留下氣孔,直至結(jié)繭(30 d左右),期間定期檢查桶內(nèi)椰子殼的狀態(tài),觀察幼蟲是否已經(jīng)結(jié)繭。待結(jié)繭完成,將紅棕象甲的繭揀到帶蓋的塑料罐中,封蓋保存放于培養(yǎng)架上,待到在罐內(nèi)可見破繭而出的紅棕象甲成蟲時(shí)(14 d左右),將全部的繭人為拆開,取出成蟲放于清水中洗凈。再將雌雄成蟲按照1:1配對(duì)放入裝有蘸滿質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%的蜂蜜紗布裹住小團(tuán)棉球的蟲卵提取瓶中(圖4)。
2 注意事項(xiàng)
2.1 清潔 ①卵的消毒。先用10%的福爾馬林溶液在幼蟲體外洗滌消毒,后用蒸餾水洗滌干凈,放置于蔭蔽處陰干。
②飼養(yǎng)器皿的清潔。
用于飼養(yǎng)成蟲的廣口瓶,當(dāng)成蟲死亡后,將尸體從瓶中取出,并用清水清洗干凈。用于存放繭的塑料罐,每次使用完成也需要清洗干凈。
2.2 環(huán)境衛(wèi)生
良好的環(huán)境衛(wèi)生,能夠顯著降低紅棕象甲生長(zhǎng)環(huán)境中的病原微生物數(shù)量,為紅棕象甲的生長(zhǎng)發(fā)育提供環(huán)境保證。每天保持實(shí)驗(yàn)室干凈,衛(wèi)生,及時(shí)清理垃圾;注意通風(fēng)換氣,排除有害氣體,使室內(nèi)空氣新鮮。
3 結(jié)論
用上述飼養(yǎng)方法飼養(yǎng)紅棕象甲的效果,平均幼蟲歷期為40.20 d,平均幼蟲存活率63.77%,平均蛹重2.63 g,平均蛹?xì)v期32.60 d,平均化蛹率96.89%,平均羽化率95.18%,平均成蟲體重0.94 g,平均單雌產(chǎn)卵量147.36粒,平均卵孵化率89.71%。連續(xù)多代飼養(yǎng)結(jié)果表明,采用人工飼料飼養(yǎng)的紅棕象甲各項(xiàng)生長(zhǎng)和發(fā)育指標(biāo),如幼蟲生長(zhǎng)歷期、幼蟲存活率、蛹?xì)v期、羽化率顯著優(yōu)于天然寄主飼料飼養(yǎng)的紅棕象甲;在性比、單雌產(chǎn)卵量、卵孵化率方面2種飼料飼養(yǎng)的紅棕象甲無顯著差異??傮w而言,使用上述人工飼料飼養(yǎng)紅棕象甲具有操作簡(jiǎn)便、成本低、飼養(yǎng)周期短、存活率高、省時(shí)省力等優(yōu)勢(shì),是實(shí)現(xiàn)試蟲高品質(zhì)、規(guī)模化、周年繼代飼養(yǎng)的有效方法。
4 討論
綜合考慮紅棕象甲發(fā)育歷期、幼蟲存活率、化蛹率、羽化率、飼養(yǎng)過程的可操作性等因素,已報(bào)道的紅棕象甲人工飼料配方存在的主要問題:①人工飼料中缺乏紅棕象甲生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖所必需的某些關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)因子,使得單雌產(chǎn)卵量、卵孵化率較低,幼蟲歷期較長(zhǎng)。②幼蟲存活率低,紅棕象甲存在老齡幼蟲取食低齡幼蟲的現(xiàn)象,因此該試驗(yàn)將適齡幼蟲在飼養(yǎng)盒里單頭培養(yǎng);另一個(gè)造成幼蟲存活率低的原因是,紅棕象甲成熟幼蟲有利用寄主纖維化蛹結(jié)繭的特性,但已報(bào)道的人工飼養(yǎng)方法未考慮到這一點(diǎn),導(dǎo)致老熟幼蟲化蛹率不高,成蟲畸形嚴(yán)重。該試驗(yàn)中,將老熟幼蟲及時(shí)放置于椰子外殼纖維中,輔助幼蟲化蛹,化蛹率接近100%,成蟲幾乎無畸形現(xiàn)象。因此,對(duì)適齡幼蟲單頭培養(yǎng),及時(shí)輔助高齡幼蟲化蛹,是提高幼蟲存活率的關(guān)鍵。
該研究所研制的人工飼料使用了紅棕象甲的天然寄主椰子,還輔助添加了燕麥、玉米和干酪素,為紅棕象甲幼蟲的生長(zhǎng)和發(fā)育提供了豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),提高了幼蟲存活率,縮短了發(fā)育歷期。飼料中還添加了蔗糖、葡萄糖,飼料的口感好,紅棕象甲幼蟲喜愛取食。該研究所研制的人工飼料成分均是一些常見的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),易獲取、成本低廉,飼料制作過程簡(jiǎn)單易操作。整個(gè)幼蟲發(fā)育期間僅更換6~7次飼料,有效降低了因頻繁更換飼料導(dǎo)致的幼蟲死亡率。試驗(yàn)中人工飼料所用的椰子粉為椰樹樹干曬干打碎而得的粉末,輔助化蛹所利用的椰子殼為食用椰子水后廢棄的椰子殼,幾乎沒有成本且來源廣泛。使用人工飼料飼養(yǎng)的紅棕象甲生活史參數(shù)與Kaakeh[13]在田間使用自然寄主飼養(yǎng)的紅棕象甲參數(shù)相似,GiblinDavis等[14]研究表明成蟲體重并不會(huì)影響成蟲的產(chǎn)卵量和卵孵化率。說明用該人工飼料飼養(yǎng)紅棕象甲是完全可行的。
為了避免試驗(yàn)種群退化,該研究定期到野外收集利用信息素誘捕的成蟲以及人工采集病樹中的幼蟲、蛹及成蟲加入到試驗(yàn)種群中。目前實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)的試驗(yàn)種群尚未出現(xiàn)種群退化的現(xiàn)象,未來飼養(yǎng)過程中是否會(huì)出現(xiàn)種群退化的現(xiàn)象尚未可知。雖然平均幼蟲存活率較前人的結(jié)果而言有明顯提升,但總體而言仍較低,只有60%左右,如何提高初孵幼蟲的存活率有待進(jìn)一步研究。下一步的研究應(yīng)集中在人工飼料配方的優(yōu)化和操作規(guī)程的簡(jiǎn)化以及如何提高初孵幼蟲成活率上,以期進(jìn)一步降低飼養(yǎng)的難度和成本,實(shí)現(xiàn)紅棕象甲試蟲高品質(zhì)、規(guī)?;?、周年繼代飼養(yǎng)。
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