趙 妮，劉 歡，郭 剛

(延安大學(xué)附屬醫(yī)院輸血科，陜西 延安 716000)

對于要采取手術(shù)診斷和治療時(shí)，往往會輸注成份血液，然而如何解決血液中各種傳染性疾病通過輸血、血制品或手術(shù)途徑傳播的問題，一直是公共衛(wèi)生的研究熱點(diǎn)[1-2]。目前，臨床上輸血前4項(xiàng)檢查包括乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen，HBsAg)、人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)、丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)、梅毒螺旋體(treponema pallidum，TP)，在由于輸血導(dǎo)致的不良反應(yīng)和相關(guān)疾病中具有重要的價(jià)值[3]。此4項(xiàng)指標(biāo)的檢測方法為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、歐盟免疫印跡、充足免疫印跡法、化學(xué)發(fā)光微粒免疫分析技術(shù)(chemiluminescent microparticle immunoassay，CMIA)等。CMIA是新型的血液傳染病檢測技術(shù)，便捷、準(zhǔn)確性高及重復(fù)性好。有研究顯示在血清HCV抗體、TP抗體的檢測中，相比酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，CMIA在檢測結(jié)果方面表現(xiàn)突出[4-5]。本研究采用CMIA檢測此4項(xiàng)指標(biāo)，評價(jià)其臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇我院在2017年11月—2018年11月期間進(jìn)行輸血前四項(xiàng)檢查的患者300例進(jìn)行回顧性分析。經(jīng)過臨床檢查診斷：血清乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)陽性患者60例，血清HIV陽性患者60例，血清TP陽性患者60例，血清HCV陽性患者60例，血清輸血前四項(xiàng)檢查均為陰性患者60例。其中血清HBV陽性患者男性36例，女性24例，年齡8～62歲，平均(36.65±7.68)歲；血清HIV陽性患者男性34例，女性26例，年齡10～65歲，平均(37.26±7.82)歲；血清TP陽性患者，男性33例，女性27例，年齡7～60歲，平均(36.74±7.73)歲；血清HCV陽性患者，男性35例，女性25例，年齡9～56歲，平均(36.61±7.62)歲；血清輸血前四項(xiàng)檢查均為陰性患者男性37例，女性23例，年齡12～63歲，平均(36.76±7.78)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者的血清標(biāo)本經(jīng)過臨床檢測確診為HBV、HIV、TP及HCV陽性或陰性；②獲得醫(yī)院倫理委員會的批準(zhǔn)，并取得患者及其家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①嚴(yán)重自身免疫疾?。虎谠煅δ苄约膊。虎郯籽〖捌渌麗盒阅[瘤。

1.2檢測方法 CMIA法檢測血清標(biāo)本四項(xiàng)傳染病指標(biāo)：采用ARCHITECT i2000全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(購自美國雅培貿(mào)易上海有限公司)檢測血清HBsAg、HCV抗體、HIV抗體、TP抗體，操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

檢測血清HBsAg采用二步定量法檢測，首先將血清的HBsAg與包被在磁性微粒子上的單克隆抗-HBs特異性結(jié)合，之后再與吖啶酯標(biāo)記的羊抗人抗-HBs采取“夾心法”結(jié)合，之后加入激發(fā)溶液，使用吖啶酯發(fā)光，根據(jù)光的強(qiáng)度與HBsAg水平呈正比關(guān)系以及相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，自動計(jì)算出血清HBsAg水平。

檢測HIV抗體時(shí)使用順磁性微珠作為血清的包被載體，采用吖啶酯標(biāo)記抗體，在過氧化陰離子的作用下，吖啶酯由激發(fā)態(tài)轉(zhuǎn)到基態(tài)時(shí)光子被釋放，光信號被光量子閱讀系統(tǒng)識別并且根據(jù)相應(yīng)的計(jì)算關(guān)系得出HIV抗體濃度。

檢測HCV抗體采用兩步法免疫檢測，利用CMIA技術(shù)和靈活的檢測模式相結(jié)合、檢測血清中的HCVp24抗原及HCV-1/HCV-2抗體。

1.3觀察指標(biāo)及判斷標(biāo)準(zhǔn) 記錄CMIA檢測方法下血清HBsAg、HCV抗體、HIV抗體、TP抗體檢測結(jié)果。判斷標(biāo)準(zhǔn)：血清HBsAg濃度≥0.05 kU/L視為陽性，HBsAg濃度<0.05 kU/L視為陰性；HCV抗體、HIV抗體S/CO值≥1視為陽性，S/CO值<1視為陰性；TP抗體：S/CO值≥1視為陽性，S/CO值<0.5視為陰性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)量資料比較采用配對樣本t檢驗(yàn)和獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1CMIA檢測輸血前四項(xiàng)傳染病指標(biāo)結(jié)果對比 CMIA檢測血清HBsAg、HIV抗體、TP抗體、HCV抗體的結(jié)果與臨床病理檢測結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.000、0.000、0.267、0.150，P>0.05)。見表1～4。

表1 CMIA檢測HBsAg結(jié)果比較Table 1 Comparison of CMIA for detecting HBsAg results (例數(shù))

表2 CMIA檢測HIV抗體結(jié)果比較Table 2 Comparison of HIV antibody results detected by CMIA (例數(shù))

表3 CMIA檢測TP抗體結(jié)果比較Table 3 Comparison of CM antibody results detected by CMI (例數(shù))

表4 CMIA檢測HCV抗體結(jié)果比較Table 4 Comparison of results of detection of HCV antibodies by CMI (例數(shù))

2.2CMIA檢測輸血前四項(xiàng)傳染病指標(biāo)敏感度、特異度、陽性預(yù)測值等結(jié)果比較 CMIA檢測HBsAg、HIV抗體敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、診斷符合率皆為100%；CMIA檢測TP抗體敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、診斷符合率分別為93.33%、95.00%、94.91%、93.44%、94.17%；CMIA檢測HCV抗體敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值及診斷符合率分別為95.00%、91.67%、91.93%、94.83%、93.33%。

3 討 論

輸血是臨床上治療的常用手段，是搶救和防治疾病的重要措施。在輸血前必須進(jìn)行血清HBsAg、HCV、HIV、TP抗原檢測，對于需要輸血患者及醫(yī)務(wù)工作者的生命安全是非常必要的[6]。同時(shí)，輸血前四項(xiàng)檢查也是阻斷傳染病通過醫(yī)院輸血傳播。隨著血清標(biāo)志物檢測技術(shù)的發(fā)展，臨床上對輸血前四項(xiàng)檢測方法要求更好的快捷性和更高的準(zhǔn)確性。近幾年許多臨床工作者對輸血前四項(xiàng)檢測的方法[7-8]進(jìn)行了大量研究。

根據(jù)相關(guān)流行病學(xué)調(diào)查顯示，HBsAg陽性率為10%左右[9]，但不同地區(qū)存在一定程度的差異[10]。周雙艷等[11]研究認(rèn)為血清HBsAg的溶度與患者性別無關(guān)，但隨著年齡的增長，其呈現(xiàn)降低趨勢,這可能由于隨著時(shí)間的推移，大部分HBV被自然清除，導(dǎo)致病毒載量逐漸減少。HCV主要通過輸血或其他非腸道途徑進(jìn)行傳染。目前防治丙型肝炎傳染源及阻斷傳播途徑最有效的方法是進(jìn)行及時(shí)的診斷并采取相應(yīng)的治療。目前全世界HCV陽性率約為3%，中國感染率在3.2%左右[12]。HCV入侵機(jī)體后，在血液中首先出現(xiàn)的是HCV抗原，機(jī)體經(jīng)過一段時(shí)間才會產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，其中抗-HCV對人體并不具有保護(hù)性。當(dāng)抗-HCV呈現(xiàn)陽性才是HCV感染的標(biāo)志，但在急性和慢性丙型肝炎患者中，抗-HCV類型不同?！按翱谄凇痹谀撤N程度上會導(dǎo)致陰性檢測結(jié)果呈假陽性，同時(shí)在HCV抗體陰性血清中也存在一定比例的HCV RNA陽性[13]。HIV極易通過血液傳播，一般HIV的感染率在0.015%～0.19%。人體在感染梅毒螺旋體之后，在機(jī)體內(nèi)會生成2大類抗體，分別為梅毒螺旋體特異性抗體和反應(yīng)素[14]，梅毒螺旋體的感染率在3%左右。

CMIA是通過使用微粒取代平板，增加了抗原抗體接觸面的反應(yīng)速度，利于洗滌，縮短感染診斷的窗口期，具有較高的敏感度，但在一定程度上會導(dǎo)致假陽性[15]。本研究中CMIA檢測HCV抗體和TP抗體時(shí)分別出現(xiàn)3例假陽性、5例假陽性，這與葛金蓮等[16]、屈曉威等[17]研究結(jié)果一致。導(dǎo)致其在檢測TP抗體發(fā)生假陽性可能有以下幾點(diǎn)原因：①機(jī)體內(nèi)存在多種共生螺旋體，試劑盒抗體與非待檢抗原之間發(fā)生了非特異性反應(yīng)；②患有非待測螺旋體所致疾病、自身免疫性等基礎(chǔ)性疾病的血清可能會出現(xiàn)交叉反應(yīng)[15]；③在對要進(jìn)行檢測的血清標(biāo)本處理不當(dāng)，如血清中蛋白質(zhì)、三酰甘油含量過高，干擾檢測結(jié)果；④對于感染梅毒之后治愈患者而言，CMIA檢測TP、IgG和IgM抗體，而IgG抗體終身患者體內(nèi)，所以健康者檢測結(jié)果也顯示陽性。因此，CMIA檢測TP抗體時(shí)存在一定的假陽性。故該方法適合判斷以往或正處于梅毒感染者，不適用于判斷治療效果。

本研究結(jié)果顯示，CMIA檢測血清HBsAg、HIV抗體、TP抗體、HCV抗體結(jié)果與臨床病理檢測結(jié)果比較，差異不顯著，提示CMIA檢測血清四項(xiàng)指標(biāo)的準(zhǔn)確性較高。CMIA法檢測HBsAg、HIV抗體的敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值均為100%；檢測TP抗體敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值分別為93.33%、95.00%、94.91%、93.44%、94.17%；檢測HCV抗體敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值分別為95.00%、91.67%、91.93%、94.83%、93.33%。表明CMIA檢測具有較高敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值及診斷符合率。但本研究也存在缺陷：①樣本量較少，需要增加樣本量；②需進(jìn)一步研究影響CMIA檢測TP抗體、HCV抗體出現(xiàn)假陽性的原因，以便進(jìn)一步提高輸血前四項(xiàng)檢測的準(zhǔn)確性。

綜上所述，在輸血四項(xiàng)指標(biāo)檢測中，CMIA法與病理診斷結(jié)果比較，雖然存在一定的差異性，但是表現(xiàn)出良好的敏感度和特異度，具有較高的陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值及診斷符合率。