林聽聽，劉 鑫，王昌勃，張 東

（中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部東海與遠(yuǎn)洋漁業(yè)資源開發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 200090）

魚類行為學(xué)是一門古老而又年輕的學(xué)科，是探索和研究魚類對(duì)外界誘導(dǎo)或刺激所產(chǎn)生的反應(yīng)行為和行為變化規(guī)律的基礎(chǔ)學(xué)科。魚類行為學(xué)廣泛應(yīng)用于漁業(yè)生產(chǎn)中［1-2］。例如，魚類正趨向行為特征在養(yǎng)殖中有助于魚類馴養(yǎng)，在捕撈上有助于誘集魚群；而負(fù)趨向行為特征在漁業(yè)上可作為指示魚類受到環(huán)境應(yīng)激或者生物干擾的先兆，從而達(dá)到早發(fā)現(xiàn)、早預(yù)防的目的。近些年，隨著人類對(duì)海洋開發(fā)的深入，人為的水下噪聲源也日益增多。這些水下噪聲源主要來自航運(yùn)船只、聲吶和沿海港口、航道、隧道的施工建設(shè)，以及海上鉆井和海上風(fēng)電場(chǎng)的施工作業(yè)等。水下噪聲嚴(yán)重威脅著許多魚類及海洋哺乳動(dòng)物的健康和生殖能力，尤其是一些高強(qiáng)度的噪聲會(huì)導(dǎo)致海洋動(dòng)物聽覺缺失甚至死亡［3-4］。

大黃魚（Larimichthyscrocea）是我國(guó)目前養(yǎng)殖規(guī)模最大的海水魚類，是我國(guó)出口八大優(yōu)勢(shì)養(yǎng)殖水產(chǎn)品之一，在我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中占有重要的地位［5］。但是，由于過度捕撈，野生大黃魚種群受到嚴(yán)重破壞。雖然近年來大力開展休漁和人工增殖放流等措施，以期恢復(fù)大黃魚的漁業(yè)資源，但收效甚微，大黃魚的種質(zhì)資源恢復(fù)緩慢，至今仍無法形成有規(guī)模的漁汛。導(dǎo)致該現(xiàn)象的原因之一可能與日益增長(zhǎng)的水下噪聲有關(guān)：噪聲污染可能將大黃魚驅(qū)離其棲息地而導(dǎo)致低成活率；也有可能是噪聲直接對(duì)大黃魚尤其是幼魚產(chǎn)生物理性傷害而導(dǎo)致低成活率。施慧雄等［6］就報(bào)道了大黃魚經(jīng)船舶噪聲干擾后其體內(nèi)的皮質(zhì)醇激素響應(yīng)極為迅速，20 min就出現(xiàn)了峰值；另外，翁朝紅等［7］也報(bào)道了大黃魚無論是魚苗還是成魚對(duì)外界驚擾特別敏感和激烈，只要有異常的驚擾就會(huì)四處背離急游，而致體力耗竭或撞壁損傷等，嚴(yán)重時(shí)倒浮水中。

鑒于以上研究背景，本文以養(yǎng)殖大黃魚幼魚為研究對(duì)象，以產(chǎn)卵場(chǎng)附近常見船舶航行時(shí)所致的噪聲為刺激源，確立幼魚對(duì)噪聲的敏感閾值，觀測(cè)不同聲壓級(jí)強(qiáng)度刺激下幼魚的游泳、攝食行為及部分免疫生理指標(biāo)的變化，以期為制定大黃魚產(chǎn)卵場(chǎng)的保護(hù)措施提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 船舶噪聲源的錄制

船舶噪聲源于2015年10月在浙江岱山港，用水聽器（C55；Cetacean Research Technology，Seattle，WA，USA；frequency range：20 Hz-44 kHz±3 dB；sensitivity：-165 dB re 1V·μPa-1）在1 500 t貨輪滿載經(jīng)過時(shí)現(xiàn)場(chǎng)錄制而成。水聽器置于水下4 m，距船舶水平距離約50 m。錄制的聲信號(hào)經(jīng)水聽器由聲壓變電壓信號(hào)，經(jīng)電壓前置放大器放大和濾波之后，以.wav的格式存儲(chǔ)于高頻數(shù)字錄音機(jī)。經(jīng)DTDiskTM軟件和SIGNALTM軟件分析得出，船舶噪聲頻譜范圍為50 Hz～10 kHz，其主峰位于430 Hz處，水聽器錄制點(diǎn)船舶經(jīng)過時(shí)的噪聲聲壓級(jí)為98.6 dB，無船舶經(jīng)過時(shí)的噪聲聲壓級(jí)為62.2 dB（圖1）。根據(jù)大部分石首魚科的聽覺閾值（90～100 dB）［8-10］，本文所錄制的船舶噪聲不在大黃魚的聲信號(hào)遮蔽之內(nèi)，能干擾到大黃魚。

1.2 實(shí)驗(yàn)用魚

本研究于2016—2017年期間在中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所福鼎試驗(yàn)基地進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)所用的大黃魚幼魚［體長(zhǎng)（10.5±0.8）cm］分批次購(gòu)自寧德市官井洋大黃魚養(yǎng)殖有限公司。運(yùn)至基地后，將幼魚暫養(yǎng)于直徑為6 m、深度為1 m的玻璃鋼養(yǎng)殖桶中，每桶200尾，養(yǎng)殖水溫23～24℃。暫養(yǎng)期間，每天換水1/2，早、中、晚各投喂一次浮性膨化顆粒配合飼料。投喂時(shí)，將飼料投于固定在養(yǎng)殖桶水面圓心處的浮筐（直徑為60 cm）中，以防止飼料漂散。投喂1 h后，未攝食完的飼料用撈網(wǎng)撈出。待幼魚攝食和排便均正常后（暫養(yǎng)馴化約3～4周），開始用于實(shí)驗(yàn)。

圖1 浙江省岱山港貨輪滿載經(jīng)過時(shí)的水下聲音頻譜圖Fig.1 Sound pressure spectrum level of cargo ship passing by and ambient noise in Daishan Port，Zhejiang Province

1.3 噪聲聲壓級(jí)對(duì)幼魚游泳行為的影響

實(shí)驗(yàn)在直徑為6 m、深度為1 m的玻璃鋼養(yǎng)殖桶中進(jìn)行。養(yǎng)殖桶水面圓心處設(shè)有一個(gè)浮筐，用于投餌；養(yǎng)殖桶桶邊12點(diǎn)鐘方向安有連接于噪聲源的水下?lián)P聲器；養(yǎng)殖桶頂部距水面3 m處安有攝像頭（圖2）。共有8個(gè)養(yǎng)殖桶，每個(gè)養(yǎng)殖桶有80尾幼魚，這些幼魚均經(jīng)過24 h的饑餓。這8個(gè)養(yǎng)殖桶分別進(jìn)行 40、60、80、100、120、140、160和200 dB的聲壓級(jí)刺激。實(shí)驗(yàn)開始前，噪聲播放器、信號(hào)放大器和水下?lián)P聲器先在未放幼魚的養(yǎng)殖桶中調(diào)試，用水聽器實(shí)測(cè)聲壓級(jí)，調(diào)到所設(shè)定的聲壓級(jí)后，關(guān)閉噪聲源，將水下?lián)P聲器移至所對(duì)應(yīng)聲壓級(jí)的養(yǎng)殖桶。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，先用飼料將幼魚誘集至圓心處，然后瞬間開啟噪聲源，觀察幼魚的游泳行為。

圖2 實(shí)驗(yàn)裝置示意圖Fig.2 Diagram of experimental device

1.4 短期單次和多次噪聲刺激對(duì)幼魚部分生理指標(biāo)的影響

實(shí)驗(yàn)裝置同1.3。根據(jù)1.3所得的噪聲聲壓級(jí)敏感范圍，選取120 dB和150 dB這2個(gè)刺激聲壓級(jí)。實(shí)驗(yàn)共分4組，分別進(jìn)行120 dB&1次（A組）、150 dB&1次（B組）、120 dB&3次（C組）、150 dB&3次（D組）的處理。每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30尾魚。每次刺激持續(xù)5 min，每次刺激間隔2 h。刺激結(jié)束后0.5 h，往養(yǎng)殖桶里加丁香酚麻醉幼魚。以未刺激的幼魚為對(duì)照組（control）。

用含肝素鈉抗凝劑的5 mL注射器從麻醉的幼魚尾部脊椎取血，5 000 r·min-1離心取血漿，置于-80℃超低溫冰箱中保存，用于檢測(cè)皮質(zhì)醇（cortisol）、血 糖 （blood glucose）、血 紅 蛋 白（hemoglobin）和乳酸（lactic acid）這 4個(gè)生理指標(biāo)。檢測(cè)方法為從南京建成生物工程研究所購(gòu)買適合魚類檢測(cè)的試劑盒并按其說明書進(jìn)行。

1.5 長(zhǎng)期噪聲刺激對(duì)幼魚存活、生長(zhǎng)、腸道菌落及部分免疫指標(biāo)的影響

實(shí)驗(yàn)裝置同1.3。實(shí)驗(yàn)分對(duì)照組和噪聲組，對(duì)照組不進(jìn)行刺激；而噪聲組刺激聲壓級(jí)值為120 dB，每天早、中、晚刺激3次，每次刺激持續(xù)5 min。每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30尾幼魚。對(duì)照組和噪聲組每天投喂3次浮性膨化顆粒配合飼料，每次在噪聲刺激前0.5 h投喂；每天及時(shí)撈出并記錄死亡的幼魚。實(shí)驗(yàn)共持續(xù)30 d。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后清點(diǎn)各組存活幼魚，并往養(yǎng)殖桶里加丁香酚麻醉幼魚。

每個(gè)重復(fù)取8條幼魚用于取血和取腸道。用含肝素鈉抗凝劑的5 mL注射器從麻醉的幼魚尾部脊椎取血，5 000 r·min-1離心取血漿，-80℃凍存用于檢測(cè)免疫指標(biāo)。取血后，無菌解剖幼魚取其腸道，置于DNAse/RNAse-Free凍存管，-80℃凍存用于檢測(cè)腸道菌落。每個(gè)重復(fù)剩余的幼魚用于測(cè)量體質(zhì)量，計(jì)算特定生長(zhǎng)率（specific growth rate，SGR）。SGR=100 ×（lnWfinal-lnWinitial）/T，其中Winitial為魚體實(shí)驗(yàn)前初始體質(zhì)量，Wfinal為魚體實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的最終體質(zhì)量，T為實(shí)驗(yàn)時(shí)間。

所檢的免疫指標(biāo)包括：免疫球蛋白 M（immunoglobulin M，IgM），干擾素-α（interferon-α，IFN-α），白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）和腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）。檢測(cè)方法為從南京建成生物工程研究所購(gòu)買適合魚類檢測(cè)的酶聯(lián)免疫試劑盒并按其說明書進(jìn)行。腸道菌落檢測(cè)采用16SrDNA高通量測(cè)序分析技術(shù)，由上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司協(xié)助完成。

1.6 噪聲刺激對(duì)幼魚攝食行為的影響

實(shí)驗(yàn)同樣在直徑為6 m、深度為1 m的玻璃鋼養(yǎng)殖桶中進(jìn)行。每桶200尾幼魚作為1個(gè)重復(fù)，共設(shè)3個(gè)重復(fù)。每桶設(shè)2個(gè)定點(diǎn)投喂點(diǎn)，即6點(diǎn)鐘方向和12點(diǎn)鐘方向，其中6點(diǎn)鐘方向無噪聲源；12點(diǎn)鐘方向設(shè)有噪聲刺激源，聲壓級(jí)為120 dB，每隔1 h刺激一次，每次刺激持續(xù)5 min。第一次刺激時(shí)間為07∶00，0.5 h后，往2個(gè)定點(diǎn)投喂點(diǎn)各一次性投放200粒顆粒飼料。之后觀察各刺激時(shí)間（08∶00、09∶00、10∶00）后，幼魚的行為、分布及投喂點(diǎn)的飼料剩余量。

1.7 數(shù)據(jù)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均用平均值 ±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示。噪聲組和對(duì)照組以及各個(gè)處理組之間的差異顯著性用軟件Origin 8.0進(jìn)行單因素方差（One-way ANOVA）分析。若有顯著差異，則繼續(xù)進(jìn)行Tukey多重比較分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 噪聲聲壓級(jí)對(duì)幼魚游泳行為的影響

在不同梯度噪聲聲壓級(jí)刺激下，幼魚的游泳行為見表1和圖3。

表1 不同梯度噪聲聲壓級(jí)刺激下幼魚的游泳行為Tab.1 Swimming behaviors of L.crocea juveniles stressed by different levels of ship noise intensities

圖3 攝像儀所觀測(cè)到的幼魚在不同梯度噪聲聲壓級(jí)刺激下的游泳行為Fig.3 The camera-observed swimming behaviors of L.crocea juveniles under different levels of ship noise intensities

2.2 短期單次和多次噪聲刺激對(duì)幼魚部分生理指標(biāo)的影響

短期內(nèi)單次和多次噪聲刺激下，幼魚血漿中4個(gè)與應(yīng)激相關(guān)的生理指標(biāo)均表現(xiàn)出不同程度地上升，其中皮質(zhì)醇、血糖和乳酸上升幅度尤為顯著（圖4）。變化趨勢(shì)方面，皮質(zhì)醇不同于另外3個(gè)指標(biāo)，其具體表現(xiàn)為：?jiǎn)未未碳ず?，即達(dá)到峰值；而多次刺激后，反而較單次刺激有所下降。血糖、血紅蛋白和乳酸這3個(gè)指標(biāo)則呈現(xiàn)出相似的變化規(guī)律，均表現(xiàn)為多次刺激要高于單次刺激。另外，無論是單次刺激還是多次刺激，120 dB和150 dB這兩個(gè)聲壓級(jí)強(qiáng)度均未表現(xiàn)出明顯差異。

圖4 短期單次和多次噪聲刺激下幼魚血漿中皮質(zhì)醇、血糖、血紅蛋白和乳酸含量的變化Fig.4 Changes of cortisol，glucose，hemoglobin and lactic acid in plasma of L.crocea juveniles stimulated by short-term single and multiple ship noises

2.3 長(zhǎng)期噪聲刺激對(duì)幼魚存活、生長(zhǎng)、腸道菌落及部分免疫指標(biāo)的影響

經(jīng)過30 d的噪聲刺激，幼魚的存活情況與對(duì)照組無顯著差異，但生長(zhǎng)表現(xiàn)則明顯減緩，其SGR值僅為0.72±0.08，遠(yuǎn)低于對(duì)照組的1.23±0.16（圖5）。免疫指標(biāo)方面，免疫球蛋白M、干擾素-α、白介素-1β和腫瘤壞死因子-α的含量均顯著低于對(duì)照組（圖6）。另外，噪聲刺激后，幼魚的腸道菌群組成與對(duì)照組發(fā)生了很大的變化，其中變化之一是噪聲組的腸道益生菌，如芽孢桿菌（Bacillus）、乳桿菌（Lactobacillus）等相對(duì)豐度顯著降低（圖7）。另外，噪聲組的弧菌（Vibrio fortis）相對(duì)豐度（75.2% ±3.6%）也顯著高于對(duì)照組（15.8% ±2.8%）。

2.4 噪聲刺激對(duì)幼魚攝食行為的影響

實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：幼魚能準(zhǔn)確識(shí)別噪聲源的位置，刺激1次后就對(duì)噪聲源具有了一定的記憶性。先吃無噪聲源的投餌點(diǎn)餌料（6點(diǎn)鐘方向），基本很少吃有噪聲源的投餌點(diǎn)餌料（12點(diǎn)鐘）。只有等到無噪聲源的投餌點(diǎn)（6點(diǎn)鐘）餌料量很少了，才試探性地去吃有噪聲源的投餌點(diǎn)餌料（09∶30—09∶50）。第4次刺激（10∶00）一啟動(dòng)，幼魚又趨避到6點(diǎn)鐘方向（10∶05），但刺激一結(jié)束，幼魚在6點(diǎn)鐘方向逗留的時(shí)間很短，很快就游往12點(diǎn)鐘方向進(jìn)行攝食（圖8）。

圖5 噪聲刺激30 d后大黃魚幼魚的存活和生長(zhǎng)表現(xiàn)Fig.5 Survival and growth performance of L.crocea juveniles after 30 days of noise stimulation

圖6 噪聲刺激30 d后大黃魚幼魚血漿中免疫指標(biāo)（免疫球蛋白M、干擾素-α、白介素-1β和腫瘤壞死因子-α）的變化Fig.6 Changes of immune indexes（immunoglobulin M，interferon-α，interleukin-1βand tumor necrosis factor-α）in plasma of L.crocea juveniles after 30 days of noise stimulation

圖8 噪聲刺激下各時(shí)段幼魚的游泳和攝食行為示意圖Fig.8 Diagram of swimming and feeding behaviors of L.crocea juveniles stimulated by noise in different periods

3 討論

研究顯示，全世界大概有800多種魚具有發(fā)聲能力。魚類的發(fā)聲行為對(duì)它們的種群溝通，如索餌、避敵、繁殖、洄游、集群等具有非常重要的作用［11］。然而，隨著人類對(duì)海洋開發(fā)的深入，人類制造的水下噪聲與日俱增。這些噪聲嚴(yán)重地干擾了魚類的發(fā)聲行為，或輕或重地影響到了它們的生存和生活［12］。大黃魚是典型的具發(fā)聲能力的魚類，對(duì)外界聲響相當(dāng)敏感。20世紀(jì)50—60年代中國(guó)盛行的敲罟作業(yè)和過度捕撈，正是利用了大黃魚對(duì)水中聲音較敏感這一特性，導(dǎo)致野生大黃魚幾乎陷入滅絕的窘境。雖然近些年休漁和人工放流等措施不斷推行，以期恢復(fù)大黃魚的漁業(yè)種質(zhì)資源，但進(jìn)展十分緩慢，至今仍無法形成有規(guī)模的漁汛。原因之一就可能與日益增長(zhǎng)的水下噪聲有關(guān)。大黃魚對(duì)噪聲十分敏感，水下噪聲嚴(yán)重影響到了它們的索餌、集群和繁殖等，進(jìn)而危及到了種群的繁衍。在眾多水下噪聲中，船舶噪聲是對(duì)大黃魚影響最常見、最直接、最頻繁的噪聲。

3.1 不同梯度噪聲聲壓級(jí)對(duì)幼魚游泳行為的影響

本文研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)噪聲聲壓級(jí)＞60 dB時(shí)，幼魚就開始呈現(xiàn)出不同程度的應(yīng)激和趨避行為。這一噪聲敏感閾值低于多數(shù)石首魚科魚類的敏感閾值（90～100 dB）［8-10］，佐證了大黃魚對(duì)聲音非常敏感的事實(shí)。但在殷雷明等［8］研究中發(fā)現(xiàn)，大黃魚的船舶噪聲敏感閾值約為88 dB。兩者研究結(jié)果的差異可能源于幼魚的個(gè)體大小以及幼魚所處的環(huán)境，殷雷明等［8］的實(shí)驗(yàn)幼魚體長(zhǎng)約為20 cm，大于本文的 10 cm；另外，殷雷明等［8］的實(shí)驗(yàn)幼魚長(zhǎng)期處于大水面的網(wǎng)箱養(yǎng)殖環(huán)境中，頻繁的水下噪聲刺激，可能增強(qiáng)了幼魚對(duì)船舶噪聲的耐受性。

此外，本研究也發(fā)現(xiàn)，隨著聲壓級(jí)的增大，大黃魚幼魚的應(yīng)激趨避行為越來越強(qiáng)烈，依次表現(xiàn)出：游泳速度加快，魚與魚之間、魚與桶壁之間發(fā)生碰撞，瞬間反應(yīng)無序，跳躍等行為；當(dāng)聲壓級(jí)＞200 dB時(shí)，刺激2 min后就有死亡個(gè)體出現(xiàn)。劉貞文等［13］也報(bào)道了相似的結(jié)果：大黃魚幼魚（體長(zhǎng)約10 cm，8月齡），在聲波頻率600 Hz、聲壓級(jí)130 dB刺激下，趨避行為變得遲鈍和無序，還伴有跳躍行為；當(dāng)聲壓級(jí)達(dá)到168 dB時(shí)，噪聲源正上方的幼魚直接致死。

3.2 短期單次和多次噪聲刺激對(duì)幼魚部分生理指標(biāo)的影響

魚類的應(yīng)激受控于下丘腦—垂體—腎臟髓質(zhì)（HPI軸）［14］。魚類的應(yīng)激首先表現(xiàn)為生理指標(biāo)的波動(dòng)，造成魚體外與體內(nèi)穩(wěn)態(tài)的變化。魚類對(duì)應(yīng)激的短期生理反應(yīng)可分為兩個(gè)階段：第一階段是神經(jīng)系統(tǒng)接受外界應(yīng)激信號(hào)并迅速分泌腎上腺素，刺激魚類頭腎組織釋放皮質(zhì)醇，皮質(zhì)醇調(diào)動(dòng)體內(nèi)儲(chǔ)備的能量以提供調(diào)節(jié)滲透壓所需的氧氣和能量；第二階段主要涉及生理生化方面的代謝反應(yīng)，包括血漿和組織中代謝產(chǎn)物、血液學(xué)指標(biāo)的變化以及應(yīng)激蛋白/基因的激活等［15］。因此，血漿皮質(zhì)醇、滲透壓、乳酸、血紅蛋白、血糖、血氨等指標(biāo)已被作為魚類的應(yīng)激指示指標(biāo)被廣泛、頻繁地用于評(píng)估魚類所受的各種環(huán)境脅迫、操作脅迫和運(yùn)輸脅迫等［16-19］。

本文研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)船舶噪聲短暫的刺激后，大黃魚幼魚血漿中皮質(zhì)醇、乳酸、血紅蛋白和血糖顯著升高，但120 dB和150 dB的響應(yīng)幅度之間未見明顯差異。此外，皮質(zhì)醇單次刺激后即達(dá)到峰值，而多次刺激后反而有所下降，這一結(jié)果佐證了皮質(zhì)醇為魚類應(yīng)激第一階段中響應(yīng)最靈敏的指標(biāo)之一，也說明了皮質(zhì)醇的響應(yīng)可能不具有累加效益，多次的刺激反而可能增加耐受性［6］。但是，不同于皮質(zhì)醇，另外 3個(gè)指標(biāo)（血糖、血紅蛋白和乳酸）的變化規(guī)律則是響應(yīng)速度要滯后于皮質(zhì)醇，并且多次刺激要高于單次刺激，這一結(jié)果也佐證了血糖、血紅蛋白和乳酸這些指標(biāo)主要在應(yīng)激過程中第二階段響應(yīng)，也說明了這些指標(biāo)具有累加效益，重復(fù)的刺激加劇幼魚的生理代謝負(fù)擔(dān)［15］。除了本文所述的大黃魚外，船舶噪聲對(duì)其他水生動(dòng)物的生理影響也常有報(bào)道。在 鯉 （Cyprinuscarpio）［20］和 鮈 魚 （Gobio gobio）［20］中，船舶噪聲同樣引起血漿皮質(zhì)醇急劇升高；而在灰海馬（Hippocampuserectus）［19］和金頭鯛（Sparusaurata）［21］中，船舶噪聲可引起皮質(zhì)醇、促腎上腺皮質(zhì)激素、血糖、乳酸、紅細(xì)胞壓積、熱休克蛋白70、總蛋白、膽固醇、甘油三酯和滲透壓等一系列生理指標(biāo)發(fā)生劇烈波動(dòng)。

3.3 長(zhǎng)期噪聲刺激對(duì)幼魚存活、生長(zhǎng)、腸道菌落及部分免疫指標(biāo)的影響

本文研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期處于噪聲刺激，大黃魚幼魚的生長(zhǎng)減緩，免疫水平下降。這可能歸因于應(yīng)激過程是個(gè)高耗能的過程。應(yīng)激狀態(tài)下，魚體內(nèi)分泌大量腎上腺素和皮質(zhì)醇等物質(zhì)，機(jī)體合成代謝處于高強(qiáng)度水平，大量耗能，導(dǎo)致沒有足夠的能量用于分配生長(zhǎng)和免疫。此外，合成分泌的腎上腺素和皮質(zhì)醇本身也能對(duì)機(jī)體產(chǎn)生毒害作用，如影響食物攝入、消化和吸收；損傷機(jī)體部分組織器官；抑制機(jī)體免疫功能等［21-24］。所以，一是魚體把大量的能量用于腎上腺素和皮質(zhì)醇的合成代謝，導(dǎo)致用于生長(zhǎng)和免疫的能量分配減少；二是過多合成的腎上腺素和皮質(zhì)醇會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生攝食和吸收減少、抑制免疫等不良影響，是大黃魚幼魚在噪聲長(zhǎng)期刺激下生長(zhǎng)變緩、免疫低下的主要原因。類似的結(jié)果也同樣出現(xiàn)在其他水生動(dòng)物中，如海馬（Hippocampuserectus）［18］，金魚（Carassiusauratus）［25］和 虹鱒 （Oncorhynchus mykiss）［26］，噪聲刺激同樣使它們生長(zhǎng)變緩，免疫下降，抗病力減退。

腸道菌群是非常重要的菌群，對(duì)維持機(jī)體的健康具有重要的作用。腸道菌群的失調(diào)容易引發(fā)機(jī)體內(nèi)穩(wěn)態(tài)的紊亂，進(jìn)而誘發(fā)各種疾病。多種疾病目前已被研究證實(shí)是因?yàn)槟c道菌群的失調(diào)所致［27-28］。關(guān)于環(huán)境脅迫對(duì)魚體腸道菌群的影響至今未見報(bào)道。本文研究發(fā)現(xiàn)，在長(zhǎng)期的噪聲刺激下，大黃魚幼魚腸道菌群與未刺激幼魚相比，無論是菌群組成還是相對(duì)豐度，都發(fā)生了很大的變化。其中最明顯的變化之一是刺激幼魚的腸道益生菌如芽孢桿菌、乳桿菌等明顯缺失。這些益生菌已被廣泛證明在維持魚體的穩(wěn)態(tài)、促進(jìn)魚體的消化、改善魚體的免疫等方面發(fā)揮著重要的作用［29］。為此，在噪聲長(zhǎng)期刺激下，大黃魚幼魚生長(zhǎng)減緩、免疫力下降的原因除了上述的兩個(gè)原因外，還跟噪聲刺激導(dǎo)致魚類腸道益生菌失衡有著直接的關(guān)系。