王 迪，龍世群

重慶市萬州區(qū)婦幼保健院百安分院，重慶 404100

肝纖維化為慢性肝炎患者病情進展為肝癌的重要危險因素，對肝纖維化程度的準確評價有利于判斷患者病情以及制訂治療方案，同時對于緩解患者病情以及改善預后也具有積極意義[1]。臨床上一般使用肝組織病理活檢進行病情嚴重程度判斷以及肝纖維化程度評定，但此種檢查方式為侵入式檢查，會對患者身體造成損傷，影響患者的檢查配合度且檢查時一般需要住院。因此，需要尋找一種簡單、有效、微創(chuàng)的方法進行肝纖維化程度評價[2]。臨床上用于肝纖維化無創(chuàng)檢查的方法一般為血清指標檢測以及影像學檢查。有研究顯示，Mac-2結(jié)合蛋白(Mac-2BP)在預測慢性肝炎患者肝纖維化程度的臨床應用價值較高，但其特異性尚需要進一步改善[3]。巖藻糖基化觸珠蛋白(FUC-HPT)為觸珠蛋白上特定蛋白經(jīng)巖藻糖基化修飾，用于肝臟疾病的診斷效能尚需改進[4]。臨床上聯(lián)合應用Mac-2BP和FUC-HPT兩種蛋白進行慢性肝炎患者肝纖維化程度預測的研究較少見報道。本研究選取本院收治的慢性肝炎患者，使用Mac-2BP結(jié)合FUC-HPT預測病情嚴重程度，以明確其應用價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇本院2016年8月至2018年8月收治的143例慢性肝炎患者為研究對象。納入標準：(1)符合慢性肝炎診斷標準[5-6]；(2)主要為乙型肝炎和丙型肝炎；(3)患者意識清楚，可以自行配合相關(guān)檢查；(4)患者對本研究知情同意；(5)本研究由本院醫(yī)學倫理委員會批準。排除標準：(1)由脂肪肝、酒精性肝病、免疫缺陷性肝病、其他病毒性肝病等原因?qū)е碌母喂δ墚惓＃?2)并發(fā)糖尿病、免疫缺陷病或者甲狀腺功能亢進等疾?。?3)重要器官功能障礙；(4)檢查前已接受相關(guān)治療；(5)意識不清，不能配合各種檢查。所有患者中男68例，女75例；年齡19～69歲，平均(46.33±2.57)歲；體質(zhì)量指數(shù)19.3～26.5 kg/m2，平均(23.34±1.29)kg/m2；慢性乙型肝炎83例，慢性丙型肝炎60例。

1.2方法

1.2.1肝組織病理活檢 患者在超聲引導下進行穿刺獲得肝組織，隨后使用甲醛進行固定，使用石蠟對肝組織予以包埋，包埋完成后切片，由3名病理醫(yī)生對蘇木精染色后的切片進行互不干擾閱片。肝纖維化分期以及炎性反應分級依據(jù)《病毒性肝炎防治方案》(2001)中的標準進行判定[7]。

1.2.2血清Mac-2BP和FUC-HPT水平檢測 抽取患者晨起空腹靜脈血離心后保留上清液，血清中Mac-2BP和FUC-HPT水平檢測使用酶聯(lián)免疫吸附法，由專人依據(jù)Mac-2BP(日本神戶Sysmex公司；批號：79370)和FUC-HPT(英國Abcam公司；批號：ab13429)試劑盒操作步驟進行檢測。

1.3觀察指標 分析所有患者肝組織病理活檢結(jié)果，比較不同肝纖維化程度患者血清Mac-2BP和FUC-HPT水平，分析兩種蛋白檢測結(jié)果與肝纖維化程度的相關(guān)性，計算兩種蛋白診斷肝纖維化程度的截斷值，比較兩種蛋白單用以及聯(lián)合應用判斷病情嚴重程度的價值。

2 結(jié) 果

2.1患者肝組織病理活檢結(jié)果分析 143例患者均成功進行肝組織穿刺后病理活檢，所有經(jīng)穿刺獲得的肝組織均達到病理活檢標準?；顧z結(jié)果顯示，纖維化S0、S1、S2、S3和S4級患者分別為25、54、42、19、3例。

2.2不同肝纖維化程度患者血清Mac-2BP和FUC-HPT水平比較 患者血清Mac-2BP和FUC-HPT水平隨著肝纖維化程度加重而上升，且上述兩種蛋白在不同肝纖維化程度患者血清中的水平比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 不同肝纖維化程度患者血清Mac-2BP和FUC-HPT水平比較

注：與S0級比較，aP<0.05；與S1級比較，bP<0.05；與S2級比較，cP<0.05；與S3級比較，dP<0.05。

2.3兩種蛋白水平與肝纖維化程度的相關(guān)性分析 Spearman相關(guān)結(jié)果顯示，Mac-2BP、FUC-HPT水平與肝纖維化程度均為正相關(guān)關(guān)系(r=0.614、0.442，P<0.05)。

2.4兩種蛋白診斷肝纖維化程度的截斷值與診斷價值分析 Mac-2BP、FUC-HPT診斷肝纖維化程度≥S2級的截斷值分別為1 295 ng/mL、359 U/mL，聯(lián)合診斷的靈敏度和特異度為78.57%和75.81%；≥S3級的截斷值分別為2 157 ng/mL、396 U/mL，聯(lián)合診斷的靈敏度和特異度為79.37%和77.69%；S4級的截斷值分別為2 482 ng/mL、493 U/mL，聯(lián)合診斷的靈敏度和特異度為89.55%和82.38%。診斷肝纖維化程度時，兩種蛋白聯(lián)合應用的靈敏度和特異度優(yōu)于單一檢測結(jié)果，見圖1和表2。

注：A為肝纖維化程度≥S2級；B為肝纖維化程度≥S3級；C為肝纖維化程度S4級。

圖1兩種蛋白單用及聯(lián)合應用診斷肝纖維化程度的ROC曲線

表2 兩種蛋白單用及聯(lián)合應用對肝纖維化程度的診斷價值比較

3 討 論

肝纖維化為患者肝臟內(nèi)部因為細胞外基質(zhì)含量過高所致慢性炎癥發(fā)生的過程，其最終結(jié)果為肝臟出現(xiàn)硬化病變[8]。慢性乙型肝炎和丙型肝炎患者肝臟進一步纖維化會致使患者病情進展為肝硬化甚至肝癌。正確評價慢性肝炎患者肝纖維化程度有利于患者肝臟疾病的控制與治療。研究顯示，常規(guī)肝纖維化血清指標如層粘連蛋白、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶以及透明質(zhì)酸不能對肝纖維化程度進行精確分期，特異性不佳，需要開發(fā)新型纖維化血清指標[9]。

Mac-2BP為分布于血漿、細胞質(zhì)以及組織液中的糖蛋白物質(zhì)，主要由多種含有7個N糖基的單體組成，N糖基單體在血清中能夠互相聚集形成大分子N聚糖多聚物[10]。血清中纖連蛋白、整聯(lián)蛋白等可與這些N聚糖結(jié)合成為細胞與基質(zhì)、細胞之間連接的橋梁。已有研究顯示，Mac-2BP在各種傳染性疾病、腫瘤以及炎癥類疾病患者體內(nèi)水平上升[11]。本研究中，隨著肝纖維化程度加重，患者血清中Mac-2BP水平上升，且不同肝纖維化程度其水平差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，與上述研究結(jié)果一致。蛋白被巖藻糖基化修飾后可以對糖蛋白鏈與蛋白質(zhì)之間的作用進行調(diào)節(jié)，正常生理狀態(tài)下巖藻糖基化蛋白水平較低，但其在患者病情加重時會增加[12]。巖藻糖基化甲胎蛋白可用于診斷肝癌，可見巖藻糖基化蛋白水平發(fā)生變化對于疾病診斷意義重大。觸珠蛋白又被稱為結(jié)合珠蛋白，為主要在肝臟合成、分泌以及降解的急性反應蛋白，各種炎癥、創(chuàng)傷以及腫瘤均會使其水平上調(diào)。ASAZAWA等[13]研究認為，大部分肝癌患者在疾病進展期間FUC-HPT水平上升，提示FUC-HPT可作為預測肝臟疾病進展和肝癌發(fā)生的一種新型、有潛在價值的生物標志物。本研究中患者血清FUC-HPT水平隨著肝纖維化程度加重而上升，且不同肝纖維化程度患者比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。研究顯示，F(xiàn)UC-HPT可以調(diào)節(jié)正常極性肝細胞中糖蛋白的分泌，當細胞極性崩潰時，由于細胞內(nèi)極化傳遞受到破壞，細胞無法維持正常的功能，導致血清中FUC-HPT水平升高，這種升高與肝細胞極性崩潰有關(guān)，即與纖維化程度呈正相關(guān)[14]。本研究中相關(guān)性分析結(jié)果同樣顯示，F(xiàn)UC-HPT與肝纖維化程度呈正相關(guān)關(guān)系。

本研究結(jié)果證實，Mac-2BP與FUC-HPT水平與患者肝纖維化程度存在相關(guān)性，但是二者在肝纖維化程度方面的診斷價值仍需進一步探討。有研究顯示，Mac-2BP可能與肝纖維化程度有關(guān)，在肝臟發(fā)生炎癥時激活免疫反應，使肝細胞Mac-2BP分泌增多，促進纖維化以及細胞黏附。肝炎患者在后期容易出現(xiàn)肝細胞極性崩潰，血清FUC-HPT水平升高可能反映了患者肝硬化程度[15]。本研究中ROC曲線分析結(jié)果顯示，診斷肝纖維化程度時單用Mac-2BP早期(S2級)靈敏度較高，單用FUC-HPT晚期(S3和S4級)特異度較高，而Mac-2BP與FUC-HPT聯(lián)合應用于診斷肝纖維化程度時其靈敏度和特異度均優(yōu)于單項檢測結(jié)果，提示Mac-2BP與FUC-HPT聯(lián)合診斷肝纖維化程度的效能較高，可以作為慢性肝炎病情嚴重程度診斷與預測指標。

綜上所述，對慢性肝炎患者進行病情嚴重程度診斷時，聯(lián)合應用Mac-2BP和FUC-HPT的價值優(yōu)于單項指標檢測，可作為判斷慢性肝炎患者病情嚴重程度的新型預測指標。