翁默寒，王鳳超，丁淑琴，張倫軍，朱安友

蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，安徽蚌埠 233004

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)是一種臨床常見的自身免疫病，以慢性關(guān)節(jié)炎為主要特征，易反復(fù)發(fā)作,并可導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形甚至殘疾。RA患者血清中常出現(xiàn)類風(fēng)濕因子(RF)和抗瓜氨酸化蛋白抗體(ACPA)等自身抗體，這些自身抗體大部分屬于IgG。人IgG根據(jù)其分子重鏈(γ鏈)抗原性差異及二硫鍵數(shù)目和位置的不同，可分為IgG1、IgG2、IgG3和IgG4 4個(gè)亞類。近年來(lái)，IgG亞類在相關(guān)疾病中的作用逐漸得到關(guān)注和重視[1-3]。本研究通過檢測(cè)RA患者血清IgG及亞類水平，并與血清免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、補(bǔ)體(C3、C4)、RF及抗環(huán)瓜氨酸肽(CCP)抗體等指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析，探討IgG亞類在RA中的臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2018年10月至2019年6月本院風(fēng)濕免疫科收治并確診的RA患者54例納入RA組，其中男14例、女40例，年齡36～78歲、平均(59.09±10.71)歲。所有患者均符合2010年美國(guó)風(fēng)濕學(xué)會(huì)/歐洲防治風(fēng)濕病聯(lián)盟關(guān)于RA的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并且患者近3個(gè)月內(nèi)未接受糖皮質(zhì)激素、抗感染等藥物治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)非RA的其他自身免疫病患者；(2)合并嚴(yán)重心肺、肝腎功能不全者；(3)關(guān)節(jié)畸形、其他關(guān)節(jié)炎患者；(4)合并急、慢性感染性疾病患者；(5)合并腫瘤患者；(6)妊娠期和哺乳期女性。另選擇同期本院健康體檢者36例納入對(duì)照組，其中男9例、女27例，年齡43～76歲、平均(58.06±8.73)歲。兩組研究對(duì)象年齡、性別之間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法 RA組患者于門診就診或入院時(shí)采集空腹靜脈血,對(duì)照組健康體檢者于體檢時(shí)采集空腹靜脈血，3 000 r/min離心10 min，分離血清備用。采用雙抗體夾心法ELISA檢測(cè)IgG1、IgG2、IgG3和IgG4，試劑由eBioscience公司提供，iMark酶標(biāo)儀為Bio-Rad公司產(chǎn)品；采用貝克曼庫(kù)爾特公司IMMAGE800特定蛋白分析儀(免疫散射比濁法)檢測(cè)免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、補(bǔ)體(C3、C4)和RF，試劑由貝克曼庫(kù)爾特公司提供；采用BioPlex2200全自動(dòng)流式點(diǎn)陣免疫發(fā)光分析儀檢測(cè)抗CCP抗體，試劑為美國(guó)伯樂公司產(chǎn)品。各項(xiàng)觀察指標(biāo)的檢測(cè)均嚴(yán)格按照儀器操作規(guī)程和試劑盒說明書進(jìn)行操作。

2 結(jié) 果

2.1RA組與對(duì)照組血清免疫球蛋白、補(bǔ)體、RF及抗CCP抗體水平比較 RA組血清IgG、IgA、RF和抗CCP抗體水平顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，但I(xiàn)gM、C3和C4水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組血清免疫球蛋白、補(bǔ)體、RF、抗CCP抗體水平比較[M(P25,P75)]

注：-表示儀器最低檢測(cè)限為20 IU/mL，故未得出結(jié)果。

2.2RA組與對(duì)照組血清IgG亞類水平比較 RA組血清IgG1和IgG3水平顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，兩組間IgG2和IgG4水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

2.3RA組與對(duì)照組血清IgG各亞類/IgG比值比較 RA組血清IgG1/IgG和IgG3/IgG顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，而IgG2/IgG顯著低于對(duì)照組(P<0.05)；兩組間IgG4/IgG差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

2.4相關(guān)性分析 Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，RA組患者血清IgG1水平與IgG呈高度正相關(guān)(r=0.865,P<0.05)；IgG2、IgG3水平與IgG均呈中度正相關(guān)(r=0.613、0.644，P<0.05)；IgG4水平與IgG呈低度正相關(guān)(r=0.271,P<0.05)；IgG2水平與IgA呈低度正相關(guān)(r=0.399,P<0.05)；IgG3水平與IgM呈低度正相關(guān)(r=0.343,P<0.05)。IgG各亞類水平與RF、抗CCP抗體之間均無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。見表4。

表2 兩組血清IgG亞類水平比較[M(P25,P75),g/L]

表3 兩組血清IgG各亞類/IgG比值比較

表4 RA組血清IgG各亞類水平與IgG、IgA、IgM、C3、C4、RF、抗CCP抗體的相關(guān)性分析

3 討 論

RA是一種常見的高發(fā)病率、高致殘率系統(tǒng)性自身免疫性疾病，其具體病因尚不明確，可能與感染、內(nèi)分泌失調(diào)、免疫失調(diào)和遺傳等因素有關(guān)。細(xì)胞免疫與體液免疫參與RA的生理病理過程，體液免疫中的相關(guān)免疫指標(biāo)檢測(cè)對(duì)RA診斷具有重要意義。

IgG、IgA和IgM是體液免疫的重要組成部分，IgG、IgA和IgM水平升高可引起一系列免疫反應(yīng)，導(dǎo)致組織損傷，并直接參與RA的發(fā)病。諸多研究報(bào)道，RA患者血清IgG、IgA和IgM水平均顯著升高，而且其水平變化與RA病情活動(dòng)有關(guān)[4-6]。本研究中，RA患者血清IgG和IgA水平均高于健康人群(P<0.05)，IgM水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。也有研究發(fā)現(xiàn)，RA患者只有血清IgG水平顯著升高，而IgA和IgM水平與健康人群比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)[7]，提示血清IgG水平可以作為反映RA患者病情進(jìn)展的一個(gè)客觀指標(biāo)。

IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，也是二次免疫反應(yīng)的主要抗體，具有很高的親和力。人IgG有4個(gè)亞類，其在血清中水平為IgG1>IgG2>IgG3>IgG4。IgG亞類均以單體形式存在，并具有高度的結(jié)構(gòu)相似性，但彼此之間的細(xì)小差異賦予了IgG亞類各自獨(dú)特的生物學(xué)功能。IgG1和IgG3能強(qiáng)有力地活化補(bǔ)體經(jīng)典途徑，主要產(chǎn)生于病毒和蛋白抗原引起的免疫反應(yīng)；IgG2可以啟動(dòng)補(bǔ)體旁路活化途徑，主要見于多糖抗原引起的免疫反應(yīng)；而IgG4主要參與線蟲引起的免疫反應(yīng)和慢性抗原刺激反應(yīng)。

有研究顯示，IgG亞類水平異常與自身免疫病有關(guān)。原發(fā)性干燥綜合征(pSS)患者血清IgG1、IgG2和IgG3水平顯著升高，IgG4水平顯著降低；IgG3水平與pSS疾病分期呈正相關(guān)[8]。還有研究發(fā)現(xiàn)，Graves病患者的IgG1水平較對(duì)照者顯著升高，IgG2水平也較對(duì)照者升高，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；IgG3和IgG4水平明顯下降；血清IgG1與甲狀腺過氧化物酶抗體(TPOAb)、甲狀腺球蛋白抗體(TGAb)、促甲狀腺激素受體刺激性抗體(TSAb)、促甲狀腺激素受體刺激阻斷性抗體(TSBAb)這4種甲狀腺自身抗體之間無(wú)顯著相關(guān)性[9]。邸平等[10]研究顯示，自身免疫性胰腺炎組、腹膜后纖維化組、健康對(duì)照組間血清IgG1、IgG3水平差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，自身免疫性胰腺炎組血清IgG4水平顯著升高(P<0.05)，而且該研究者認(rèn)為IgG4可用于自身免疫性胰腺炎與急慢性胰腺炎、胰腺癌和膽管癌等相似疾病的鑒別診斷。

本研究結(jié)果顯示，RA組患者血清IgG1和IgG3水平顯著增加，并且IgG1/IgG和IgG3/IgG顯著高于對(duì)照組，說明RA患者血清中存在IgG亞類水平異常，這與ENGELHART等[11]的研究結(jié)果基本一致。但LIN等[12]的研究結(jié)果顯示，RA患者血清4種IgG亞類水平均顯著升高。而ENGELMANN等[13]研究結(jié)果顯示，RA患者血清針對(duì)瓜氨酸抗原的兩個(gè)抗體主要是IgG1和IgG4。研究結(jié)果的差異可能與入選的病例不同有關(guān)。

相關(guān)性分析結(jié)果顯示，RA患者血清IgG各亞類與IgG之間均呈正相關(guān)，IgG2與IgA之間呈正相關(guān)，IgG3與IgM之間也呈正相關(guān)。提示血清IgG亞類水平可能和免疫球蛋白一樣，在判斷RA病情進(jìn)展方面具有重要價(jià)值。也有研究顯示，成人IgG亞類水平與免疫球蛋白及炎癥指標(biāo)之間也存在一定相關(guān)性[14]。RF和抗CCP抗體是診斷RA常用的血清學(xué)指標(biāo)，RF診斷RA的敏感性較高，但特異性較差，而抗CCP抗體是RA早期診斷敏感性及特異性均較高的指標(biāo)[15-16]。本研究結(jié)果顯示，RA患者血清IgG各亞類與RF和抗CCP抗體之間均無(wú)相關(guān)性，提示IgG亞類檢測(cè)對(duì)于RA的診斷價(jià)值有限。有研究表明，與抗CCP抗體單獨(dú)檢測(cè)相比，抗CCP抗體與IgG各亞類聯(lián)合檢測(cè)對(duì)RA的早期診斷價(jià)值并無(wú)明顯提升[17]。

綜上所述，RA患者血清IgG水平顯著升高，并且存在IgG亞類水平變化，以IgG1和IgG3升高為主。IgG亞類對(duì)于RA早期診斷價(jià)值有限，對(duì)判斷RA病情進(jìn)展方面有一定意義。