李芳芳，周曉肖，李偉龍

(1.浙江大學(xué) 農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，浙江 杭州 310058； 2.臨海市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，浙江 臨海 317000；3.臨海市蔬菜技術(shù)推廣站，浙江 臨海 317000)

西瓜是葫蘆科西瓜屬一年生蔓性草本植物，西瓜炭疽病由瓜類炭疽菌引起[1]。炭疽菌無(wú)性孢子世代屬半知菌亞門黑盤孢目刺盤孢屬真菌，西瓜一般發(fā)病率20%～40%，產(chǎn)量損失10%～15%，發(fā)病嚴(yán)重時(shí)棚室病株率可達(dá)100%，損失產(chǎn)量40%以上。目前，防治西瓜炭疽病的藥劑主要是苯醚甲環(huán)唑等三唑類殺菌劑，屬于14-α脫甲基反應(yīng)抑制劑(14α-demethylation inhibitors，DMIs)，其作用機(jī)制是抑制真菌細(xì)胞膜上麥角甾醇的合成，內(nèi)吸性強(qiáng)，具有保護(hù)、治療和鏟除作用[2]。該類殺菌劑的作用位點(diǎn)相對(duì)單一，被殺菌劑抗性委員會(huì)(Fungicide Resistance Action Committee，F(xiàn)RAC)認(rèn)定為“中抗風(fēng)險(xiǎn)類殺菌劑”[3]。已有禾谷絲核菌(Rhizoctoniacerealis)對(duì)戊唑醇產(chǎn)生抗性的報(bào)道，且抗性具有累加效應(yīng)[4]。在實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用中，通過(guò)限制使用頻次、使用復(fù)配產(chǎn)品，以及與不同作用機(jī)理的殺菌劑交替使用，以延緩抗性的產(chǎn)生和發(fā)展，其中復(fù)配是用于規(guī)避抗性風(fēng)險(xiǎn)的主要措施。吡唑醚菌酯和肟菌酯為甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，主要通過(guò)抑制細(xì)胞色素b和細(xì)胞色素c1間的電子傳遞，破壞ATP的產(chǎn)生及能量循環(huán)[5]，具有保護(hù)、治療、鏟除、滲透、強(qiáng)內(nèi)吸活性[6]。氟唑菌酰胺和氟吡菌酰胺為酰胺類殺菌劑，屬于琥珀酸脫氫酶抑制劑，作用于蛋白復(fù)合體Ⅱ，影響病原菌呼吸鏈的電子傳遞系統(tǒng)，阻礙其能量代謝，可抑制病原菌孢子萌發(fā)、芽管生長(zhǎng)、菌絲體生長(zhǎng)及芽孢形成，兼具預(yù)防和治療作用，具有優(yōu)異的內(nèi)吸傳導(dǎo)活性[7-8]。

42.4%唑醚·氟酰胺(21.2%吡唑醚菌酯+21.2%氟唑菌酰胺)懸浮劑、42.8%氟菌·肟菌酯(21.4%氟吡菌酰胺+21.4%肟菌酯)懸浮劑、325 g·L-1苯甲·嘧菌酯(125 g·L-1苯醚甲環(huán)唑+200 g·L-1嘧菌酯)懸浮劑和75%肟菌·戊唑醇(25%肟菌酯+50%戊唑醇)水分散粒劑分別由幾種不同作用機(jī)理的殺菌劑復(fù)配而成。作者通過(guò)大棚西瓜炭疽病的防治試驗(yàn)，明確這4種復(fù)配殺菌劑對(duì)西瓜炭疽病的田間防效及對(duì)西瓜植株的安全性，旨在為設(shè)施栽培下西瓜炭疽病的防治提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)在浙江省臨海市涌泉鎮(zhèn)戎旗村西瓜種植園進(jìn)行，土壤為江河沉積土，肥力中等，土壤pH值約6.5。西瓜種植于薄膜大棚(5 m×28 m)中，每棚分兩畦。試驗(yàn)期間不噴施其他殺菌劑，按西瓜種植要求進(jìn)行日常管理。

供試西瓜品種為早佳，西瓜嫁接苗砧木為蒲瓜，1月23日移栽，株行距0.5 m×2.5 m。

供試藥劑有42.4%唑醚·氟酰胺懸浮劑[健達(dá)，巴斯夫(中國(guó))有限公司]、325 g·L-1苯甲·嘧菌酯懸浮劑[阿米妙收，先正達(dá)(蘇州)作物保護(hù)有限公司]、75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑[拿敵穩(wěn)，拜耳作物科學(xué)(中國(guó))有限公司]、42.8%氟菌·肟菌酯懸浮劑[露娜森，拜耳作物科學(xué)(中國(guó))有限公司]。

采用RC-4HC溫濕度記錄儀記錄試驗(yàn)期間大棚內(nèi)的溫濕度情況，記錄間隔時(shí)間為1 h。

1.2 方法

1.2.1 處理設(shè)計(jì)

設(shè)5個(gè)處理，分別為42.4%唑醚·氟酰胺1 875倍、325 g·L-1苯甲·嘧菌酯1 500倍、75%肟菌·戊唑醇3 000倍、42.8%氟菌·肟菌酯1 500倍及空白對(duì)照(CK)。采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，重復(fù)3次，每小區(qū)17.5 m2。分3次施藥，分別為4月29日、5月8日、6月5日。用背負(fù)式電動(dòng)噴霧器均勻噴施植株葉片正反面和果實(shí)表面，藥液量約1 500 L·hm-2。分別于6月3日(第二次藥后26 d)、6月13日(第三次藥后8 d)進(jìn)行調(diào)查。

1.2.2 調(diào)查方法

病情嚴(yán)重度調(diào)查。西瓜成熟采收期，每小區(qū)調(diào)查5點(diǎn)，每點(diǎn)為半徑30 cm的圓形區(qū)域，目測(cè)病斑占葉片面積的百分比。其中，6月3日的調(diào)查綜合新老葉片，以老葉為主；6月13日的調(diào)查將老葉與新葉的病情嚴(yán)重度分開(kāi)記載。

安全性調(diào)查。于藥后1、3、5、7 d，調(diào)查植株各部位是否有褪綠、灼傷、斑點(diǎn)等明顯藥害癥狀。

根據(jù)藥害分級(jí)方法，將藥害分為5級(jí)：-為無(wú)藥害；+為輕度藥害，不影響正常生長(zhǎng)；++為明顯藥害，可復(fù)原，不會(huì)造成減產(chǎn)；+++為高度藥害，影響正常生長(zhǎng)，對(duì)產(chǎn)量和品質(zhì)都造成一定損失；++++為藥害嚴(yán)重，生長(zhǎng)受阻，產(chǎn)量和質(zhì)量損失嚴(yán)重。記錄每小區(qū)的藥害情況。

植物健康調(diào)查。每次藥前藥后適時(shí)調(diào)查花(花序多少、開(kāi)花時(shí)間等)、葉(葉色、大小、厚度、韌性等)、果(顏色、大小、坐果能力等)、植株長(zhǎng)勢(shì)(高度、莖稈韌性等)等，以及其他可見(jiàn)的差異；植株長(zhǎng)勢(shì)分成1～5級(jí)，1級(jí)長(zhǎng)勢(shì)最健壯，5級(jí)最衰弱。計(jì)算相對(duì)防效。

1.2.3 數(shù)據(jù)分析

用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 21.0的鄧肯氏新復(fù)極差法(DMRT)對(duì)分組試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 大棚溫濕度情況

由圖1可知，試驗(yàn)期間，棚內(nèi)日平均相對(duì)溫度為23.99 ℃，最高日平均溫度為29.20 ℃，最低日平均溫度為19.98 ℃，日平均溫度較穩(wěn)定。棚內(nèi)日平均相對(duì)濕度為79.57%，最高日平均濕度為93.16%，最低日平均相對(duì)濕度為65.83%，棚內(nèi)日平均濕度與日降雨情況有關(guān)。溫濕度是瓜類炭疽病發(fā)生的重要條件，在適宜的溫度條件下，相對(duì)濕度為87%～95%時(shí)，病菌的潛育期只有3 d。濕度越大，潛育期越短，發(fā)病越重；相反，濕度小則發(fā)病輕，相對(duì)濕度小于54%就不發(fā)病。病菌在10～30 ℃都可發(fā)病，適宜發(fā)病溫度為22～27 ℃，尤以24 ℃最適宜[9]。因此可知，試驗(yàn)期間，棚內(nèi)溫濕度較適宜西瓜生長(zhǎng)和炭疽病發(fā)生。

圖1 試驗(yàn)期間棚內(nèi)溫濕度情況

2.2 不同處理在二次藥后26 d對(duì)西瓜炭疽病的相對(duì)防效

由表1可知，2019年6月3日調(diào)查表明，42.4%唑醚·氟酰胺1 875倍和75%肟菌·戊唑醇3 000倍防效最佳，顯著優(yōu)于其他處理；其次為325 g·L-1苯甲·嘧菌酯1 500倍；42.8%氟菌·肟菌酯1 500倍防效最低，與其他處理間差異極顯著。

表1 不同處理在第二次藥后26 d對(duì)西瓜炭疽病的相對(duì)防效

注：表中數(shù)據(jù)為均值±標(biāo)準(zhǔn)誤；同列無(wú)相同大小寫字母分別表示處理間在0.01和0.05水平差異顯著，表2～3同。

2.3 不同處理在三次藥后8 d對(duì)西瓜炭疽病的相對(duì)防效

2.3.1 對(duì)老葉炭疽病的防效

由表2可知，2019年6月13日調(diào)查表明，42.4%唑醚·氟酰胺1 875倍和75%肟菌·戊唑醇3 000倍防效較好，顯著優(yōu)于其他處理；其次為325 g·L-1苯甲·嘧菌酯1 500倍；42.8% 氟菌·肟菌酯1 500倍防效最低，與其他處理間差異極顯著。

表2 不同處理在第三次藥后8 d 對(duì)西瓜炭疽病的相對(duì)防效

2.3.2 對(duì)新葉炭疽病防效差異

由表3可知，2019年6月13日調(diào)查上部新葉表明，42.4%唑醚·氟酰胺1 875倍防效最佳，極顯著優(yōu)于處理2和4；75%肟菌·戊唑醇3 000倍顯著高于325 g·L-1苯甲·嘧菌酯1 500倍防效；42.8%氟菌·肟菌酯1 500倍防效較低，極顯著低于其他處理。

表3 不同處理在第三次藥后8 d 對(duì)西瓜新葉炭疽病的防效

2.4 植株安全性與健康

2.4.1 植株安全性

42.4%唑醚·氟酰胺1 875倍對(duì)西瓜沒(méi)有急性藥害，但對(duì)葉片生長(zhǎng)有慢性藥害，按照藥害等級(jí)評(píng)價(jià)為+，屬輕度藥害，不影響植株正常生長(zhǎng)。5月10日少量植株個(gè)別新葉葉緣輕微黃化；5月14日、5月20日、5月25日少量新葉持續(xù)黃化，黃化部位愈來(lái)愈明顯，且更易褐變?cè)缢?，但僅限在葉緣；5月30日新葉未再持續(xù)產(chǎn)生明顯黃化現(xiàn)象，原黃化葉片依舊僅限在葉緣。

75%肟菌·戊唑醇3 000倍處理可抑制植株生長(zhǎng)，造成矮化、早衰，按照藥害等級(jí)評(píng)價(jià)為+++，屬高度藥害，影響正常生長(zhǎng)，對(duì)產(chǎn)量和品質(zhì)都造成一定損失。5月2日新葉葉面積減小、皺縮、增厚、色深；5月6日、5月8日、5月10日新葉癥狀同上，藥后抽生的新蔓節(jié)間縮短、梢頭變粗；5月14日新葉、成熟葉片、新蔓癥狀同上，植株矮化、早衰，側(cè)枝的弱蔓頂端輕微黃化；5月20日、5月25日新葉、成熟葉片癥狀同上，植株矮化、早衰，主蔓新梢恢復(fù)生長(zhǎng)，但長(zhǎng)勢(shì)較弱的側(cè)蔓頂端焦枯；5月30日、6月3日、6月5日植株矮化、早衰，成熟葉片癥狀未緩解，其他較正常；6月8日、6月13日植株矮化、早衰，新蔓、新葉、成熟葉受抑制；6月21日植株矮化、早衰。

325 g·L-1苯甲·嘧菌酯1 500倍和42.8% 氟菌·肟菌酯1 500倍未有任何藥害，對(duì)西瓜安全。

2.4.2 植株健康

各處理下植株長(zhǎng)勢(shì)有差異。42.4%唑醚·氟酰胺1 875倍處理的葉色濃綠，長(zhǎng)勢(shì)最佳，植株健康，雖葉片出現(xiàn)藥害，但程度輕、數(shù)量少；325 g·L-1苯甲·嘧菌酯1 500倍、42.8%氟菌·肟菌酯1 500倍和CK長(zhǎng)勢(shì)相近；75%肟菌·戊唑醇3 000倍長(zhǎng)勢(shì)較差，生長(zhǎng)受抑制，植株矮化、早衰。

3 小結(jié)與討論

研究結(jié)果表明，42.4%唑醚·氟酰胺1 875倍和75%肟菌·戊唑醇3 000倍防效相近，優(yōu)于其他處理；其次為325 g·L-1苯甲·嘧菌酯1 500倍，而42.8%氟菌·肟菌酯1 500倍的防效較低。但75%肟菌·戊唑醇3 000倍對(duì)作物生長(zhǎng)有明顯的抑制作用，不適宜在西瓜上使用。42.4%唑醚·氟酰胺1 875倍對(duì)新葉雖有輕微藥害，但能增強(qiáng)植株長(zhǎng)勢(shì)，綜合來(lái)看是防治西瓜炭疽病的理想藥劑。

凡是在一個(gè)較大地區(qū)內(nèi)連續(xù)使用單一或?qū)儆趩我唤换タ顾幮灶惾旱膶；詮?qiáng)的選擇性殺菌劑，保持一個(gè)高的選擇壓力，往往都會(huì)促進(jìn)該地區(qū)抗藥性種群的形成[5]。化學(xué)結(jié)構(gòu)不同、作用機(jī)理完全不同的殺菌劑復(fù)配可擴(kuò)大殺菌譜，降低用藥量，減少使用次數(shù)，延緩抗藥性的產(chǎn)生[10]。試驗(yàn)中的4種藥劑均是作用機(jī)理不同的殺菌劑復(fù)配而成，能延緩西瓜炭疽病抗藥性的產(chǎn)生。

唑醚·氟酰胺與氟菌·肟菌酯、苯甲·嘧菌酯與肟菌·戊唑醇兩組藥劑復(fù)配原理雖然相同，但效果存在顯著差異?？赡苁亲饔脵C(jī)理相同的殺菌劑，由于自身結(jié)構(gòu)差異，造成病菌對(duì)藥劑吸收能力、代謝能力等性質(zhì)的差異，造成毒力和防效不一致的現(xiàn)象。周權(quán)康[11]比較了嘧菌酯、醚菌酯、肟菌酯、吡唑嘧菌酯4種主要的甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，發(fā)現(xiàn)其在活性、殺菌譜、內(nèi)吸性和熏蒸性等方面均存在差異；曹海潮等[12]發(fā)現(xiàn)，丙環(huán)唑、戊唑醇、氟硅唑表現(xiàn)出對(duì)番茄頸腐、根腐病菌的孢子萌發(fā)、芽管伸長(zhǎng)、菌絲生長(zhǎng)3個(gè)階段毒力不一致的現(xiàn)象。

甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑能夠增強(qiáng)葉片的光合作用，最終增加產(chǎn)量[13]。程傳英等[14]發(fā)現(xiàn)，吡唑醚菌酯、嘧菌酯和嘧菌酯對(duì)花生有保健作用。試驗(yàn)中唑醚·氟酰胺表現(xiàn)出促進(jìn)西瓜植株健康的作用，可能吡唑醚菌酯比肟菌酯、嘧菌酯更利于植株生長(zhǎng)。三唑類化合物常引起的副作用是短莖、矮化及葉片稍變暗，可能是藥劑抑制了植物體內(nèi)的赤霉素，也可能是抑制了植物體內(nèi)的環(huán)阿屯醇C14脫甲基化[15]，戊唑醇對(duì)西瓜植株表現(xiàn)出強(qiáng)烈的抑制作用，不宜在西瓜上使用。