付金玲， 李其林， 曹玉忠， 余勛

(1.東莞市婦幼保健院, 廣東 東莞 523000； 2.廣州市紅十字會(huì)醫(yī)院， 廣東 廣州 510220)

手足口病(hand-foot-mouth disease,HFMD)是一種多發(fā)于兒童的以手、足和口腔發(fā)生水皰為特征的病毒性皮膚病，多見于2～10歲的兒童，以5歲以下更常見。多數(shù)患者癥狀輕微，預(yù)后良好，但重癥患者可發(fā)生無菌性腦膜炎、腦炎、神經(jīng)源性肺水腫和心肌炎等并發(fā)癥，造成較高的死亡率和致殘率，嚴(yán)重危害患兒身體健康和生命安全。引起手足口病的病原體主要為腸道病毒，包括?？刹《?echoviruses)、柯薩奇病毒(coxsackievirus)A 組(2、4、5、6、8、9、10、16型)和B組(1、2、3、4、5、7、11型)及腸道病毒71型(enterovirus 71，EV71)等，其中以EV71和CA16最常見[1-2]。近幾年廣東省報(bào)告的手足口病病例數(shù)和死亡病例數(shù)均居全省丙類傳染病首位[3]，東莞市是本省手足口病的高發(fā)地區(qū)。為了解該市手足口病的流行特征及病原學(xué)特征，本研究自2015年1月-2018年12月對我院3 193例臨床確診手足口病患者進(jìn)行腸道病毒RNA檢測，現(xiàn)將檢測結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本收集

3 193例手足口病患者均為我院2015年1月-2018年12月皮膚科及手足口病?？苹颊?，均符合衛(wèi)生部頒發(fā)的手足口病診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。其中男2 036例，女1 157例；年齡2個(gè)月～13歲，平均1.8歲。收集病例糞便/肛拭子樣本，所有標(biāo)本均4 ℃冷鏈運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病原學(xué)檢測，剩余樣本-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 儀器與試劑

儀器：ABI SteoOne實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀(上海巴玖實(shí)業(yè)有限公司)。試劑：上海之江生物科技股份有限公司生產(chǎn)的柯薩奇病毒16型(CA16)核酸測定試劑盒;腸道病毒71型(EV71)核酸測定試劑盒;腸道病毒通用型核酸測定試劑盒。

1.3 檢測方法

采用Real-Time PCR 技術(shù)對標(biāo)本進(jìn)行CA16、EV71及EV檢測。具體操作均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用描述性流行病學(xué)方法分析手足口病流行特征，數(shù)據(jù)分析采用 Excel 2007 及SPSS 16.0軟件。采用2檢驗(yàn)比較不同性別的病毒陽性檢出率，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病原學(xué)檢測結(jié)果

3 193例標(biāo)本中，人腸道病毒核酸陽性2 073例，總檢出率64.92%。其中CA16核酸陽性175例，占8.44%；EV71 核酸陽性171例，占8.25%；其它EV核酸陽性1 727例，占83.31%。從2015年至2018年，其它EV占當(dāng)年檢出病毒的構(gòu)成比依次為89.37%、65.58%、88.97%及89.51%，詳見表1。

表1 2015-2018年2 073例HFMD病毒核酸陽性檢出情況

2.2 年齡分布

分析顯示，本組病例年齡最小為0.1歲，最大為13歲，平均1.8歲。5歲以下兒童占97.41%，其中以 1～2 歲兒童居多，占45.78%。不同年齡患兒HFMD病毒核酸檢出情況詳見表2。

2.3 性別分布

3 193例患者中,男2 036例，女1 157例，男女比例為1.76∶1。從總患病病例數(shù)來看，男童陽性病例數(shù)明顯多于女童。統(tǒng)計(jì)比較發(fā)現(xiàn)，男童與女童EV71陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2=4.49，P=0.034)；男童與女童的CA16陽性率及其它EV陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2=0.15，P=0.696；2=1.73，P=0.189)。詳見表3。

3 討論

HFMD是由多種腸道病毒引起的兒童常見急性傳染病，傳播途徑復(fù)雜，不僅可以經(jīng)糞-口傳播，而且還可經(jīng)空氣或接觸等途徑傳播，一旦有病例或隱性感染者出現(xiàn)，通過密集場所人群間的頻繁接觸，容易發(fā)生聚集性疫情。2008年衛(wèi)生部將HFMD納入法定丙類傳染病，我國多個(gè)地區(qū)也已出現(xiàn)過不同程度的流行和暴發(fā)疫情，HFMD 已成為我國日益嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題[5]。所以，了解手足口病的病原學(xué)構(gòu)成及流行病學(xué)特征尤為重要。

表2 2 073例不同年齡HFMD病毒核酸檢測結(jié)果 例Tab.2 Results of HFMD virus nucleic acid tests of different ages in 2 073 cases with HFMD Case

表3 不同性別HFMD病毒核酸檢測結(jié)果 例

李艷芬等[6]檢測東莞市2014年HFMD疑似病例樣本693份，結(jié)果顯示核酸陽性614份，總陽性率為88.60%。其中EV71陽性241份，占39.25%，CA16陽性194份，占31.60%，其他EV 179份，占29.15%。提示在2014年東莞地區(qū)引起 HFMD 流行的優(yōu)勢病毒株包括 EV71、CA16 和其它腸道病毒等正呈交替或共同流行狀態(tài)。同期Lu等[7]研究也表明，EV71 和 CA16 并非是一成不變地引起 HFMD 的優(yōu)勢病毒株，其他型別的腸道病毒有可能在與環(huán)境適應(yīng)過程中共流行或演變成為優(yōu)勢流行株。研究顯示越來越多其他型別的腸道病毒引起HFMD 暴發(fā)或流行[8]。

本研究對本地區(qū)3 193例手足口病患者進(jìn)行病原學(xué)分析，結(jié)果顯示，從2015至2018年，其它EV構(gòu)成比依次為89.37%、65.58%、88.97%及89.51%，為手足口病的主要病原體，反映了本地區(qū)2015至2018年手足口病發(fā)病流行優(yōu)勢株以其他EV為主，提示今后手足口病監(jiān)測工作應(yīng)加強(qiáng)對 EV71 和 CA16 以外的其他腸道病毒的分型檢測。

此外，本研究還顯示，手足口病在本地區(qū)發(fā)病人群主要集中在5歲以下兒童(97.41%)，推測可能是該年齡段的兒童免疫機(jī)制尚未發(fā)育完善，體內(nèi)血清抗體水平較低。研究結(jié)果還顯示男童發(fā)病人數(shù)及感染EV71陽性率多于女童，可能與男童戶外活動(dòng)較多，暴露和感染機(jī)會(huì)高于女童有關(guān)。提示本地區(qū)防控手足口病的重點(diǎn)人群仍是5歲及以下兒童，對于該年齡段的患兒特別是男童應(yīng)該加強(qiáng)管理和防護(hù)。