劉 誠
(平頂山職業(yè)技術學院,河南 平頂山 467000)
姬松茸(Agaricus blazei)原產巴西高山,故又稱“巴西蘑菇”。醫(yī)學研究表明姬松茸具有抗疲勞功效,還對骨質疏松有一定療效[1]。姬松茸也是一種營養(yǎng)價值很高的健康食用菌,富含多種人體必需氨基酸、蛋白質等營養(yǎng)元素,能夠有效提高人體機能[1]。人們把蛋白質中常見3種氨基酸,即纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸統(tǒng)稱為支鏈氨基酸(branched chain amino acids,BCAA)[2],許多運動營養(yǎng)保健品中都含有支鏈氨基酸,它可以促進人體肌肉合成代謝,輔助合成肌肉形成所需的其它氨基酸,對人體肌肉的增長具有一定的效果[3]。
全血乳酸(LD) 測試盒、血尿素氮(BUN) 測試盒、乳酸脫氫酶(LDH)測定試劑盒均由北京綠源伯德生物科技有限公司生產。
本試驗所用的主要儀器設備如表1所示。
表1 試驗主要儀器設備Tab.1 Main test instruments and equipment
姬松茸樣品溶液采用超聲波輔助法提取[4]。試驗所用鮮姬松茸采購自上海市閔行區(qū)盛之鑫食品經營部,將鮮姬松茸切片,在80℃下烘箱中烘干30 min后,上粉碎機制成粉,過80目篩;取姬松茸粉末加水混合,放入SL-SM系列超聲波微波組合反應系統(tǒng)中,按標準程序進行游離氨基酸提取,最終得姬松茸樣品溶液。
試驗選用健康昆明二級小鼠,雌雄各半,體重(20±5)g。分籠飼養(yǎng),每籠10只,飼養(yǎng)條件為標準動物飼料喂養(yǎng),自由飲食和飲水;在動物房飼育室中進行,相對濕度維持在(50±10)%,溫度維持在(26±2)℃,室內照明控制在12 h/12明暗交替周期。
每批小鼠適用性喂養(yǎng)7 d后分組,選用健康雌雄各半小鼠120只,分成2組進行試驗,每組40只。試驗組每日定時經口灌胃姬松茸樣品溶液1次,劑量為2 g·kg-1體重;對照組(CK) 每日定時經口灌胃1次,同樣體積的純凈水。每日上午進行定時游泳訓練15 min,下午進行小鼠灌胃試驗,連續(xù)30 d。
在小鼠最后1次灌胃0.5 h后,每組各取小鼠10只對其進行負重游泳試驗,在小鼠尾部系其體重5%的鉛皮,將小鼠放置于水桶中,水溫維持在(25.0±2.0)℃左右,記錄小鼠入水至全部身體沉入水中的時間作為小鼠負重游泳時間。
乳酸是糖一種無氧代謝物,反映了機體組織供氧和代謝狀態(tài),是一項重要的疲勞程度數據。在小鼠末次灌胃0.5 h后,每組各取小鼠10只并對其進行負重游泳試驗,在小鼠尾部系其體重5%的鉛皮,將小鼠放置于30 cm左右的水桶中,水溫維持在(25.0±2.0)℃左右,讓小鼠游泳30 min后采取摘眼球的方法進行小鼠取血并同時制備小鼠血清,采用分光光度法測定全血乳酸含量。
乳酸脫氫酶影響機體組織的能量代謝,而尿素氮則是機體組織蛋白質代謝的最終產物,這兩項指標也是反映機體組織疲勞程度的重要參考。在小鼠末次灌胃0.5 h后,每組各取小鼠10只并對其進行負重游泳試驗,在小鼠尾部系其體重5%的鉛皮,將小鼠放置于30 cm左右的水桶中,水溫維持在(25.0±2.0)℃左右,讓小鼠游泳30 min后采取摘眼球取血的方法進行小鼠取血并同時制備小鼠血清,采用分光光度法測定乳酸脫氫酶的含量和血尿素氮的含量。
分別對2組小鼠灌胃30 d,然后進行負重游泳試驗并記錄時間,試驗結果如表2所示。
表2 不同組分對小鼠負重游泳時間的影響Tab.2 Effects of different component on burden swimming time of mice
由表2可知,試驗組小鼠負重游泳時間較對照組增加較多,說明姬松茸中富含的支鏈氨基酸能很好的增加小鼠負重游泳時間,對運動耐力的增加效果良好。
分別對2組小鼠灌胃30 d,然后進行負重游泳30 min,取小鼠血清進行LD測定,結果如表3所示。
表3 不同組分對運動后小鼠LD的影響Tab.3 Effects of different component on blood lactic acid of mice
由表3可知,姬松茸組小鼠的LD含量較對照組基本相同,姬松茸組小鼠的LD含量和對照組小鼠的LD含量沒有有顯著性差異。這說明姬松茸中的支鏈氨基酸對運動后小鼠LD的產生抑制作用不明顯,在減少LD的生成和積累方面效果不顯著。
分別對2組小鼠灌胃30 d,然后進行負重游泳30 min,取小鼠血清進行LDH測定,結果如表4所示。
表4 不同組分對運動后小鼠乳酸脫氫酶的影響Tab.4 Effects of different component on lactate dehydrogenate acid of mice
由表4可知,姬松茸組小鼠血清中LDH活性低于對照組,且與對照組比較有顯著性差異。雖然小鼠在運動過程中其體內的部分細胞受損或死亡,導致胞漿中的LDH滲入血清中,使血清中LDH活性升高,但姬松茸樣品溶液能夠有效抑制這一過程,降低LDH在血清中的含量。結果表明,姬松茸中的支鏈氨基酸對血清中LDH活性有一定抑制作用,一定程度上減少LDH的活性,因此姬松茸中的支鏈氨基酸具有保護機體免受運動損傷的作用。
分別對2組小鼠灌胃30 d,然后進行負重游泳30 min,取小鼠血清進行BUN測定,結果如表5所示。
表5 不同組分對運動后小鼠BUN的影響Tab.5 Effects of different component on blood lactic acid of mice
由表5可知,姬松茸組小鼠的BUN含量較對照組有較一定幅度的降低,姬松茸組小鼠運動后BUN含量與對照組BUN含量無顯著性差異(P>0.05)。這說明姬松茸中的支鏈氨基酸對運動后小鼠BUN的產生有一定的抑制作用,可以一定程度上減少蛋白質和含氮化合物的分解代謝,從而提高機體能量物質的儲備和利用,在運動中獲得更充足的能量以緩解機體對負荷的不適應,具有一定的抗疲勞效果。
對姬松茸支鏈氨基酸的抗疲勞作用進行了試驗研究,通過小鼠動物試驗表明,姬松茸支鏈氨基酸的對小鼠的肌肉能力提升有較好的效果、能顯著增加小鼠耐力。小鼠肌肉的生長與蛋白質有很大關系,優(yōu)質的蛋白質是肌肉生長的重要來源,氨基酸是蛋白質組成重要材料。而支鏈氨基酸是肌肉蛋白的重要組成部分,占到了近30%的比例。在小鼠負重游泳試驗中,小鼠肌肉中的支鏈氨基酸的消耗很快,而灌胃姬松茸樣品溶液是一種額外的支鏈氨基酸補充,可以提高小鼠運動能力,延緩疲勞的產生,減緩肌肉疲勞,幫助小鼠肌肉恢復到正常的支鏈氨基酸水平,從試驗結果上也證明了這一點;另外支鏈氨基酸的功能除了幫助合成蛋白質外,還體現在其作為氮的載體,是輔助合成肌肉合成所需其它氨基酸的基礎。支鏈氨基酸通過刺激胰島素等相關激素的產生來促進肌肉對氨基酸的吸收、支鏈氨基酸作為一種促合成劑對肌肉的耐力和生長起頭十分重要的作用。
血清試驗表明,姬松茸支鏈氨基酸能降低血清中的LDH和BUN含量,保護機體免受運動損傷,具有一定的抗疲勞效果。血清中的乳酸脫氫酶是一種體內能量代謝過程中產生的酶,在內臟等組織中廣泛存在,當有機體組織受損傷時,乳酸脫氫酶被釋放到血液中,表現出很高的活性。通過檢測血清中的乳酸脫氫酶活力就可以輔助診斷一些心梗、肝病等疾病。當出現機體運動損傷時,如常見的橫紋肌損傷、大負荷運動訓練后的肌肉疲勞性損傷也會出現乳酸脫氫酶的增高。單純從運動學角度看,乳酸脫氫酶增高只是表明肌肉組織已經受損,或者是營養(yǎng)不良產生的機體疲勞感;但從臨床上看,還可能伴隨有心肌梗塞、肝臟等疾病,但可以通過連續(xù)的觀察乳酸脫氫酶的變化來確定具體病因。通過給小鼠灌胃姬松茸樣品溶液,測量其乳酸脫氫酶的變化情況發(fā)現,負重游泳運動小鼠體內的LDH含量有所降低,表明姬松茸中的支鏈氨基酸能夠減輕機體細胞受損情況,抑制LDH的增加。
而血尿素氮則表明了機體腎功能的健康情況,是血漿中除蛋白質以外的一種含氮化合物。氨基酸脫氨基后即可合成尿素,成為人體蛋白質代謝的最終產物。尿素氮的升高意味著機制腎功能的失調。小鼠負重游泳運動后體內的BUN含量應有所升高,但給小鼠灌胃姬松茸樣品溶液,測量其BUN變化情況發(fā)現有一定的降低,這說明姬松茸中的支鏈氨基酸減少了小鼠體內蛋白質和含氮化合物的分解代謝,抑制了運動疲勞的產生。但試驗也顯示,姬松茸中的支鏈氨基酸對小鼠血清LD作用不明顯,具體原因還需要進一步的試驗研究。