羅毅峰，王文，范方程，董偉

（湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙410128）

沙門氏菌屬于重要的人畜共患性病原，每年有數(shù)千萬(wàn)人因感染沙門氏菌而腹瀉，消費(fèi)者主要因食用受沙門氏菌污染畜禽肉制品而感染該病[1]。禽沙門氏菌具有多個(gè)血清型，但我國(guó)報(bào)道較為頻繁的血清型主要為腸炎沙門氏菌和鼠傷寒沙門氏菌[2-3]。禽沙門氏菌對(duì)所有年齡段的雞均易感，且該病在一年四季均可發(fā)生，但以春冬季節(jié)較為常見[3]。禽沙門氏菌的傳播途徑主要有兩種：分別為水平傳播與垂直傳播，其中水平傳播主要包括家禽之間相互接觸，家禽接觸被該禽沙門氏菌污染的飼料、水、糞便、甚至是老鼠和蚊等也可感染該?。欢怪眰鞑t主要為帶病母雞產(chǎn)蛋孵化的雛雞會(huì)感染該病[4-5]。

近年來(lái)，隨著湖南省養(yǎng)禽業(yè)不斷發(fā)展，禽沙門氏菌病出現(xiàn)也較為頻繁，給養(yǎng)殖企業(yè)（戶）造成的經(jīng)濟(jì)損失巨大。為提高廣大家禽養(yǎng)殖人員對(duì)禽沙門氏菌病的防控意識(shí)，本文通過(guò)對(duì)一例肉雞沙門氏菌病的診斷與治療過(guò)程進(jìn)行介紹，以促進(jìn)當(dāng)?shù)仞B(yǎng)禽業(yè)的健康發(fā)展。

1 雞場(chǎng)發(fā)病情況

湖南岳陽(yáng)某規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)飼養(yǎng)肉雞2萬(wàn)只，其品種為白羽肉雞。2019年12月初，該場(chǎng)連續(xù)幾日均有大批肉雞死亡，該場(chǎng)獸醫(yī)自行使用慶大霉素、阿莫西林、氟苯尼考等抗生素藥物治療后無(wú)明顯效果，且雞群的發(fā)病率和死亡率均有升高。其后，養(yǎng)殖場(chǎng)負(fù)責(zé)人將病雞和瀕臨死亡病雞帶至我處進(jìn)行診斷。

2 臨床癥狀

據(jù)養(yǎng)殖場(chǎng)負(fù)責(zé)人描述該養(yǎng)殖場(chǎng)病雞臨床癥狀，發(fā)病發(fā)病雞群羽毛雜亂、神情呆滯、嗜睡、排黃綠色糞便；部分病雞頭部朝地且采食量下降，雞群發(fā)病率與死亡率隨發(fā)病時(shí)間增加而不斷提高。

3 病理變化

對(duì)送檢的病雞進(jìn)行解剖，發(fā)現(xiàn)病雞大腦中存在血斑；肝臟表面存在大量白色壞死點(diǎn)（如圖1）；腸系膜內(nèi)有大量滲出物，十二指腸呈現(xiàn)彌散性出血（如圖2），但腺胃和肌胃均未發(fā)現(xiàn)明顯病變。

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

4.1 細(xì)菌分離及鑒定

在超凈工作臺(tái)取病雞病變肝臟組織，用滅菌接種環(huán)蘸取少量深處組織液在普通瓊脂固體培養(yǎng)基表面進(jìn)行分區(qū)劃線，于37℃環(huán)境培養(yǎng)18h，其后觀察到培養(yǎng)基表面有單一無(wú)色透明且表面光滑的菌落出現(xiàn)；應(yīng)用革蘭氏染色法對(duì)分離菌株進(jìn)行染色鑒定，發(fā)現(xiàn)其形態(tài)學(xué)特征疑似沙門氏菌；應(yīng)用DNA提取試劑盒提取菌落核酸，用PCR法對(duì)該菌株16s rRNA基因序列進(jìn)行擴(kuò)增與測(cè)序，將獲得的序列在NCBI上進(jìn)行BLAST比對(duì)，最終發(fā)現(xiàn)其與Genbank中收錄的腸炎沙門氏菌同源性最高。因此，可將該分離菌鑒定為腸炎沙門氏菌。

4.2 藥敏實(shí)驗(yàn)

采用K-B法對(duì)分離菌株進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)：將純化菌株接種至普通肉湯培養(yǎng)基中在37℃搖菌擴(kuò)增8h，用無(wú)菌生理鹽水將菌液稀釋至0.5麥?zhǔn)蠘?biāo)準(zhǔn)濃度。其后用滅菌棉簽將稀釋菌液均勻涂抹在固體培養(yǎng)基表面，待菌液稍干燥后將藥敏紙片按梅花形貼在表面，將其置于恒溫培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)18h，最后用游標(biāo)卡尺測(cè)量抑菌圈的直徑。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該分離菌對(duì)慶大霉素、阿莫西林、氟苯尼考等抗生素具有較強(qiáng)的耐藥性，但對(duì)頭孢類和沙星類抗生素較為敏感（見表1）。

表1 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

5 診斷與治療

結(jié)合臨床診斷和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，該病診斷為胃禽腸炎沙門氏菌病，且無(wú)其他病原體混合感染。基于此診斷結(jié)果，筆者建議該養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行全面清掃消毒，對(duì)病雞、死雞及時(shí)清除，保持環(huán)境干燥、通風(fēng)；在飲水中添加電解多維，同時(shí)在飼料中添加環(huán)丙沙星，每日1次，連用3天。1周后，雞群逐漸穩(wěn)定，無(wú)病發(fā)性雞群死亡。

6 討論

禽沙門氏菌在我國(guó)養(yǎng)禽業(yè)較為常見，該類病原在養(yǎng)雞場(chǎng)廣泛存在，但較少引起嚴(yán)重的臨床癥狀，而本文中雞群發(fā)病主要是由沙門氏菌感染引起，且引發(fā)較高的發(fā)病率和死亡率，給養(yǎng)殖場(chǎng)造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。由于養(yǎng)殖場(chǎng)大量使用抗生素用于疫病防控，導(dǎo)致環(huán)境中出現(xiàn)耐藥細(xì)菌幾率增大，導(dǎo)致常用的抗生素對(duì)該類高耐藥菌株殺滅效果較差，而雞場(chǎng)飼養(yǎng)管理水平較低可導(dǎo)致雞群免疫力下降，繼而導(dǎo)致疫病多發(fā)。因此，對(duì)于此類細(xì)菌病的治療而言，可根據(jù)其診斷結(jié)果對(duì)致病性病原進(jìn)行確診，其后再進(jìn)行對(duì)癥治療，繼而減少經(jīng)濟(jì)損失的出現(xiàn)。但該類疫病的防控主要依靠提高養(yǎng)殖場(chǎng)衛(wèi)生管理水平，并及時(shí)監(jiān)測(cè)場(chǎng)內(nèi)細(xì)菌耐藥情況。 □