羅 裕 羅順蓉 楊日榮

(1 廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院檢驗科，南寧市 530021，電子郵箱：275851348@qq.com；2 廣西醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院免疫學教研室，南寧市 530021)

【提要】 目前，肺癌的患病率和死亡率居于所有惡性腫瘤的首位。微小RNA-30a在肺癌中呈低表達，其不僅可影響肺癌細胞的增殖、分化、凋亡、侵襲、遷移、自噬、上皮細胞的間充質轉化和組織纖維化，而且還與肺癌的化療和放療耐受有關，在肺癌的發(fā)生發(fā)展中具有重要的調控作用，有可能成為肺癌不良預后的新評價指標及肺癌的治療新靶點。

微小核糖核酸(microRNA，miRNA)是一類內源性非編碼RNA，長度約為22個堿基[1]，主要與靶基因mRNA的3’非編碼區(qū)結合，抑制靶基因蛋白的翻譯[2]。miRNA可通過調控多個靶基因，參與腫瘤的增殖、分化、侵襲和轉移等多種生物學活動[3]。截至2018年3月已發(fā)現(xiàn)35 589個miRNA，其中1 917個為人類miRNA[4-5]。miRNA-30a作為miRNA家庭中的一員，其與腫瘤的發(fā)生發(fā)展相關[6-9]，但在不同類型腫瘤中miRNA-30a的功能及作用機制均不同?，F(xiàn)就miRNA-30a與肺癌發(fā)生發(fā)展的關系做一綜述。

1 miRNA-30家族及miRNA-30a基因結構

目前，在人類基因組中發(fā)現(xiàn)miRNA-30家族前體序列有6個亞型，生成5個不同的miRNA-30成熟序列[10]。miRNA-30家族每一個前體序列都能夠生成兩個片段(即5p和3p)，其中hsa-miRNA-30c-1和hsa-miRNA-30c-2這兩個前體序列生成的5p片段相同。文獻中未做注明的，一般是指5p片段，如miRNA-30a是指miRNA-30a-5p。根據(jù)習慣，3p片段有時候會標記為“*”，如miRNA-30a-3p可以寫成miRNA-30a*。表1分別列出了miRNA-30家族的前體與成熟的具體序列。

miRNA-30a編碼基因位于人類基因組(GRCh38版本)的第6號染色體(Chr6)的負義鏈上，前體序列的具體位置為(GRCh38; GCA_000001405.15) Chr6: 71403551-71403621 [-]。miRNA-30a屬于內含子miRNA，本身不具有開放讀碼框，也不編碼蛋白質。在細胞核中，miRNA-30a基因與宿主基因通過RNA聚合酶Ⅱ共同轉錄為初始miRNA-30a(pri-miRNA-30a)；再經過Ⅲ型RNA內切酶Drosha的切割，形成莖環(huán)結構的前體(pre-miRNA-30a)；然后被輸出蛋白5運送至細胞質中，經過Dicer酶的加工，生成成熟的miRNA-30a[11]。成熟的miRNA-30a與靶基因mRNA的3’端非編碼區(qū)進行部分序列匹配，抑制靶基因蛋白的生成[2]。

表1 miRNA-30家族的前體序列與成熟序列

續(xù)表1

2 miRNA-30a在肺癌中的表達

在miRNA-30家族中，目前被研究較多的是miRNA-30a，它在多種腫瘤中存在差異表達，例如肺癌[6]、白血病[7]、乳腺癌[8]、結腸癌[9]等，在不同腫瘤的發(fā)生發(fā)展中均發(fā)揮著重要的作用。

多項研究表明，miRNA-30a在肺癌中呈低表達。其中，Baffa 等[12]利用基因芯片對肺癌組織進行了小樣本的檢測，發(fā)現(xiàn)miRNA-30a與腫瘤有關。Gao等[13]指出，在原發(fā)性非小細胞肺鱗癌中miRNA-30a表達下調。Yang等[14]研究發(fā)現(xiàn)肺鱗癌患者血清miRNA-30a和miRNA-30d含量下降。Tan等[15]對中國非小細胞肺鱗癌患者進行分析發(fā)現(xiàn)，腫瘤組織的miRNA-30a表達水平低于癌旁正常組織。Kumarswamy等[16]檢測64例非小細胞肺癌患者的腫瘤組織及正常組織的miRNA-30a表達情況，發(fā)現(xiàn)與正常組織相比，81%的患者腫瘤組織中miRNA-30a的表達水平顯著下降，并且在多種非小細胞肺癌細胞系中也發(fā)現(xiàn)相似的現(xiàn)象。

3 miRNA-30a在肺癌發(fā)生發(fā)展中的作用

miRNA-30a在肺癌細胞的增殖、凋亡、遷移、侵襲中發(fā)揮著重要的作用。Patnaik等[17]在過表達miRNA-30a的肺正常細胞系BEAS-2B中，發(fā)現(xiàn)細胞的表型沒有改變。Yuan等[18]發(fā)現(xiàn)，在過表達miRNA-30a的肺癌A549細胞中，無眼基因2蛋白的表達及肺癌A549細胞的遷移與侵襲均受到抑制。此外，miRNA-30a能夠直接作用于Myb相關蛋白B，miRNA-30a低表達可以促進非小細胞肺癌細胞的增殖，而其高表達能夠誘導肺癌細胞的凋亡，阻滯細胞周期[19]。miRNA-30a能夠靶向調節(jié)叉頭蛋白L2，上調B細胞淋巴瘤2相關蛋白(B-cell lymphoma-2，Bcl-2)A1、早期應答基因3和細胞周期蛋白D2蛋白的表達[20]。CD73/NT5E是miRNA-30a的靶基因，在非小細胞肺癌的病理進展過程中扮演著重要的角色[21]。miRNA-30a還能靶向作用于胰島素樣生長因子1受體，調節(jié)絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶B信號途徑，抑制非小細胞肺癌的進程[22]；同時還能調控沉默信息調節(jié)因子，抑制肺癌細胞的侵襲，影響肺癌的進展[23]。由此可見，miRNA-30a可通過作用于不同的靶基因，影響肺癌細胞的增殖、凋亡、遷移、侵襲，從而參與肺癌的發(fā)生發(fā)展。

另外，在特定的調控作用下，上皮細胞通過特定程序轉化為具有間質表型的細胞，該生物學過程被稱為上皮細胞的間充質轉化。在非小細胞肺癌細胞中，miRNA-30a與鋅指結合蛋白Snail1的表達呈負相關，且能夠直接抑制Snail1的表達。miRNA-30a表達下調時Snail1蛋白表達升高，上皮鈣黏附蛋白的表達被抑制，從而促進上皮細胞間質化[16]。競爭性內源RNA(ceRNA)AGE-1能夠調節(jié)miRNA-30a活性，誘導非小細胞肺癌上皮細胞的間充質轉化[24]。因此，miRNA-30a還通過參與上皮細胞的間充質轉化過程影響肺癌的發(fā)展。

4 miRNA-30a在肺癌診斷、治療中的作用

研究顯示肺鱗癌患者血清miRNA-30a表達水平下降，血清miRNA-30a有可能成為診斷肺癌的指標之一[14]。而miRNA-30a的表達水平越低，肺癌患者的預后越差[25]。Tan等[15]研究發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合檢測miRNA-210、miRNA-182、 miRNA-486、 miRNA-30a和miRNA-140可以鑒別非小細胞肺鱗癌組織和正常肺組織。有學者提出，miRNA-30a聯(lián)合miRNA-210或可作為診斷非小細胞肺癌的生物標記物[26]。

miRNA-30a過表達可能通過調節(jié)磷脂酰肌醇-3激酶/絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶B信號途徑，降低非小細胞肺癌對表皮生長因子受體抑制劑的耐藥性[18]。在非小細胞肺癌治療過程中，靶向作用于Bcl-2后，miRNA-30a可以增強腫瘤細胞對紫杉醇的敏感性[27]。miRNA-30a低表達能夠促進自噬相關基因Beclin-1的表達，促進化療耐受[28]。此外，miRNA-30a在毛細血管擴張基因突變相關效應因子的磷酸化過程中，能夠靶向作用于激活轉錄因子1，從而增強非小細胞肺癌患者的放療敏感性[29]。

5 小 結

miRNA-30a是肺癌的一個重要抑癌基因，其在肺癌中的相關作用機制尚未完全闡明，而調控miRNA-30a的具體機制也還需要不斷研究。隨著研究的深入，miRNA-30a的調控網(wǎng)絡將逐步清晰，其在肺癌發(fā)生發(fā)展中的作用機制將逐步會被闡明，從而可為肺癌的診斷和治療提供新的靶點。