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        長(zhǎng)鏈非編碼RNAMIAT 在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系

        2020-03-14 02:55:08彭妲
        關(guān)鍵詞:包膜淋巴結(jié)病理

        彭妲

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 回顧性分析2016 年1 月~2017 年10 月在本院治療的62 例PTC 患者的臨床資料。①納入標(biāo)準(zhǔn):患者臨床資料及隨訪資料完整;術(shù)后病理結(jié)果證實(shí)為PTC;有完整PTC 癌組織標(biāo)本及癌旁組織標(biāo)本;未合并其他甲狀腺疾病。②排除標(biāo)準(zhǔn):預(yù)計(jì)生存期<3 個(gè)月;術(shù)前接受過(guò)任何放化療亦或分子靶向治療;存在其他內(nèi)分泌系統(tǒng)疾?。惶幱谌焉锲诨虿溉槠诘呐?。患者中男12 例、女50 例,年齡23~49 歲、平均年齡(39.24±5.47)歲,腫瘤直徑6~18 mm、平均腫瘤直徑(12.13±2.05)mm,多發(fā)灶13 例,臨 床分期:Ⅰ期19 例、Ⅱ期28 例、Ⅲ期15 例,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況:轉(zhuǎn)移40 例、無(wú)轉(zhuǎn)移22 例。采集PTC 患者的石蠟包埋癌組織及其癌旁組織(距離癌組織>5 cm)標(biāo)本,標(biāo)本均由醫(yī)院內(nèi)2 名專(zhuān)業(yè)的病理醫(yī)師進(jìn)行嚴(yán)格鑒定。

        1.2 方法 ①PTC 癌組織及其癌旁組織中l(wèi)nc RNA MIAT表達(dá)水平檢測(cè):將新鮮組織50~100 mg 研磨至粉末狀,Trizol法提取組織總RNA,而后進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄得到RNA 總量,將產(chǎn)物cDNA 取出后利用無(wú)酶水稀釋至500 μl 并保存待用,反應(yīng)體系為20 μl,包含引物、模板各5 μl,FastStart Universal SYBR Green Master (ROX)10 μl,而后進(jìn)行qPCR 檢測(cè),其中MIAT正向引物:5'-GCTCACACCTCCTATTCCT-3',反向引物:5'-CTTCACCAACTCTCCCACT-3';引物由華大基因生物科技有限公司合成,PCR 反應(yīng)條件:溫度95℃、5 min;95 ℃、30 s;60℃、30 s;72℃、30 s,共重復(fù)40 個(gè)循環(huán),每個(gè)樣本重復(fù)測(cè)量3 次取平均Ct 值,相對(duì)定量采用2-ΔΔCt法,ΔCt=Ct(目的基因)-Ct(管家基因),ΔΔCt=實(shí)驗(yàn)組ΔCt-對(duì)照組ΔCt。②一般資料收集和預(yù)后隨訪:采集患者的性別、年齡、病理分期、腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況等一般資料,通過(guò)電話或復(fù)診形式隨訪病例患者術(shù)后2 年復(fù)發(fā)情況(隨訪時(shí)甲狀腺彩超檢查可見(jiàn)瘤灶),并對(duì)患者術(shù)后2 年總生存率進(jìn)行隨訪。

        1.3 觀察指標(biāo) 比較PTC 癌組織及其癌旁組織中l(wèi)nc RNA MIAT 表達(dá)情況;PTC 患者病理特征及預(yù)后與lnc RNA MIAT表達(dá)的關(guān)系。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,組間對(duì)比行獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)或重復(fù)測(cè)量方差分析;計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn);相關(guān)性檢驗(yàn)采用Pearson 相關(guān)分析。P<0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 PTC 癌組織及其癌旁組織中l(wèi)nc RNA MIAT 表達(dá)情況比較 PTC 癌組織中l(wèi)nc RNA MIAT 表達(dá)水平為(4.232±0.351),高于癌旁組織的(1.065±0.126),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

        表1 PTC 癌組織及其癌旁組織中l(wèi)nc RNA MIAT 表達(dá)情況比較 ()

        表1 PTC 癌組織及其癌旁組織中l(wèi)nc RNA MIAT 表達(dá)情況比較 ()

        注:與癌旁組織比較,aP<0.05

        2.2 PTC 患者病理特征與lnc RNA MIAT 表達(dá)的關(guān)系 PTC患者有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期為Ⅲ期、有包膜侵犯、復(fù)發(fā)者lnc RNA MIAT 表達(dá)水平顯著高于同類(lèi)其他,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P<0.05)。見(jiàn)表2。

        表2 PTC 患者病理特征與lnc RNA MIAT 表達(dá)的關(guān)系()

        表2 PTC 患者病理特征與lnc RNA MIAT 表達(dá)的關(guān)系()

        注:有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期為Ⅲ期、有包膜侵犯、復(fù)發(fā)者lnc RNA MIAT 表達(dá)水平顯著高于同類(lèi)其他,P<0.05

        2.3 PTC 患者預(yù)后生存情況與lnc RNA MIAT 表達(dá)的關(guān)系依據(jù)PTC 患者癌組織中l(wèi)nc RNA MIAT 表達(dá)水平為3.195 時(shí)約登指數(shù)最大,故以3.195 為最佳截?cái)帱c(diǎn),將PTC 患者分為高表達(dá)組(46 例)、低表達(dá)組(16 例);62 例PTC 患者的隨訪資料均完整,結(jié)果發(fā)現(xiàn)高表達(dá)組術(shù)后2 年隨訪總生存率95.65%(44/46)較低表達(dá)組100.00%(16/16)略低,但比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

        2.4 PTC 患者病理特征及預(yù)后復(fù)發(fā)情況與lnc RNA MIAT 表達(dá)水平的相關(guān)性分析 Pearson 相關(guān)性分析提示PTC 患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、包膜侵犯及復(fù)發(fā)與lnc RNA MIAT 表達(dá)水平呈明顯正相關(guān)(P<0.05)。見(jiàn)表3。

        表3 PTC 患者病理特征與lnc RNA MIAT 表達(dá)水平的相關(guān)性分析

        3 討論

        PTC 為甲狀腺癌最為常見(jiàn)的病理類(lèi)型,PTC 的生物學(xué)行為總體良好且絕大多數(shù)可長(zhǎng)期生存,盡管不少甲狀腺癌患者可通過(guò)外科手術(shù)以及碘劑放療得到有效療效,但治療后患者復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)依然較高,盡早預(yù)測(cè)患者復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)對(duì)改善預(yù)后至關(guān)重要[1-6]。lnc RNA 屬于一類(lèi)轉(zhuǎn)錄本>200 個(gè)核苷酸的ncRNA,lnc RNA 并不參與基因的轉(zhuǎn)錄以及翻譯過(guò)程,但其在基因調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)中起到重要作用,國(guó)內(nèi)外不少學(xué)者研究證實(shí)lnc RNA 的異常表達(dá)與乳腺癌、肺癌以及卵巢癌等的發(fā)生及進(jìn)展密切相關(guān)[7-9],lnc RNA 是目前備受關(guān)注的基因調(diào)控因子,而MIAT 屬于一種新型腫瘤相關(guān)lnc RNA,MIAT 異常表達(dá)存在于不同腫瘤患者中,有望成為新型腫瘤生物標(biāo)志物[10],關(guān)于lnc RNA MIAT 與PTC 的關(guān)系尚處于初步探索階段,因此探究lncRNA MIAT 與PTC 患者病理特征以及預(yù)后的關(guān)系或可為PTC 的早期診治提供新的方向。

        早期劉永武等[11]研究證實(shí)結(jié)直腸癌組織中l(wèi)nc RNA MIAT 表達(dá)量明顯高于癌旁組織,MIAT 是結(jié)直腸癌的促癌基因,其可激活有關(guān)信號(hào)通路從而發(fā)揮明顯的促癌作用,本次分析結(jié)果顯示,PTC 癌組織中l(wèi)nc RNA MIAT 表達(dá)水平為(4.232±0.351),高于癌旁組織的(1.065±0.126),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。提示lnc RNA MIAT 在PTC 癌組織中呈高表達(dá),早期細(xì)胞實(shí)驗(yàn)證實(shí)沉默MIAT 可明顯降低腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移以及侵襲能力,并有效抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)[12],由此說(shuō)明MIAT 或可作為PTC 的促癌基因。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)MIAT 基因可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞中組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶以及基質(zhì)金屬蛋白酶 9(MMP9)的結(jié)合能力,上調(diào)MMP9 的表達(dá)水平,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的調(diào)控作用,在促進(jìn)腫瘤增殖、侵襲以及轉(zhuǎn)移中有明確作用[13],有學(xué)者研究通過(guò)外源性沉默MIAT,發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞增殖、抗凋亡以及侵襲轉(zhuǎn)移等惡性生物學(xué)行為減弱[14],近期一項(xiàng)研究則表明[15],高表達(dá)的MIAT 可明顯促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖以及轉(zhuǎn)移和侵襲,并有效抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡過(guò)程,由此說(shuō)明lnc RNA MIAT 與腫瘤的惡性生物學(xué)行為密切相關(guān);而本分析結(jié)果還顯示,PTC 患者有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期為Ⅲ期、有包膜侵犯、復(fù)發(fā)者lnc RNA MIAT 表達(dá)水平顯著高于同類(lèi)其他,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P<0.05)。相關(guān)性分析提示PTC 患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、包膜侵犯及復(fù)發(fā)與lnc RNA MIAT 表達(dá)水平呈明顯正相關(guān) (P<0.05),表明PTC 患者lnc RNA MIAT 表達(dá)量越高,臨床分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、有包膜侵犯和復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)越高,提示lnc RNA MIAT或可作為PTC 患者惡性生物學(xué)行為的有效標(biāo)志物,在評(píng)估患者預(yù)后復(fù)發(fā)率方面有一定參考價(jià)值。受經(jīng)費(fèi)和時(shí)間限制,本文僅隨訪了患者術(shù)后2 年的生存率情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn)lnc RNA MIAT 高表達(dá)組術(shù)后2 年隨訪總生存率95.65%與低表達(dá)組100.00%比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),原因與隨訪時(shí)間較短或PTC 患者預(yù)后存活率普遍高等有關(guān)。

        綜上所述,本文初步證實(shí)了PTC 患者惡性生物學(xué)行為及預(yù)后復(fù)發(fā)與lnc RNA MIAT 表達(dá)密切相關(guān),或可為PTC 患者早期診治及預(yù)后評(píng)估提供參考。但本文依然存在樣本量小、隨訪時(shí)間短等不足,未來(lái)有待完善研究。

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