陳小偉，胡利萍，韓麗萍△

江蘇省南京市六合區(qū)人民醫(yī)院：1.檢驗科；2.藥劑科，江蘇南京 211500

C反應蛋白(CRP)是一種急性時相反應蛋白，對鑒別病毒與細菌感染，炎癥過程的判斷，感染、膿毒癥的診斷和監(jiān)測等方面具有重要的臨床價值[1]。本院檢驗科因實際工作需要，先后購置了4種類型的CRP檢測儀器，分別為貝克曼AU5821生化儀、邁瑞B(yǎng)C5390血球儀、國賽Aristo特定蛋白儀和Orion Diagnostica Quick Read CRP分析儀，其中前3種檢測系統(tǒng)檢測的是超敏C反應蛋白(hs-CRP)，而Orion Diagnostica Quick Read CRP分析儀檢測的是CRP。實際上，hs-CRP與CRP為同一物質(zhì)，所檢測的均是CRP，二者結果具有可比性，但hs-CRP的靈敏度更高，能明顯地識別出CRP水平的輕度升高[2]。貝克曼AU5821生化儀檢測結果準確度高，連續(xù)多年在江蘇省臨床檢驗中心特定蛋白室間質(zhì)評中評為優(yōu)秀，故本研究根據(jù)NCCLS EP9-A2[3]文件，以貝克曼AU5821生化儀為目標檢測系統(tǒng)，分別對邁瑞B(yǎng)C5390血球儀、國賽Aristo特定蛋白儀和Orion Diagnostica Quick Read CRP分析儀的檢測結果進行比較，以研究不同檢測系統(tǒng)所檢測的CRP水平是否具有可比性。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年6月于本院門診就診或住院治療的患者為研究對象，每天隨機收集8例患者的EDTA-K2抗凝全血及血清標本(無脂血、黃疸、溶血)，連續(xù)收集6 d，共收集48份全血標本和48份血清標本。

1.2儀器與試劑 目標系統(tǒng)：貝克曼AU5821生化儀，其檢測CRP的試劑及校準品由南京澳林生物有限公司提供，質(zhì)控品由伯樂公司提供；待測系統(tǒng)1：邁瑞B(yǎng)C5390血球儀采用配套的CRP試劑、校準品及質(zhì)控品；待測系統(tǒng)2：國賽Aristo特定蛋白儀采用配套的CRP試劑、校準品及質(zhì)控品；待測系統(tǒng)3：Orion Diagnostica Quick Read CRP分析儀采用配套的CRP試劑、校準品及質(zhì)控品。

1.3方法

1.3.1檢測方法 在各檢測系統(tǒng)在控情況下，每天每種系統(tǒng)連續(xù)檢測8份標本，其中目標系統(tǒng)檢測的是血清標本的CRP水平，待測系統(tǒng)1、2、3檢測的是全血標本的CRP水平。標本按1→8和8→1的正反順序各檢測2次，共檢測6 d。由于待測系統(tǒng)3的最低檢測限為1.0 mg/L，當標本CRP水平小于1.0 mg/L時，舍去該結果。

1.3.2離群值判定 根據(jù)NCCLS EP9-A2文件，對4種檢測系統(tǒng)的檢測結果進行方法內(nèi)和方法間離群值判定。方法內(nèi)離群值判定：當各檢測系統(tǒng)兩次檢測的CRP水平的差值絕對值小于4倍差值絕對值均值時，認為方法內(nèi)無離群值；方法內(nèi)如果出現(xiàn)1個離群值，分析其原因，刪除后可繼續(xù)比較；若出現(xiàn)超過2個離群值，則應立即停止比較，查找誤差原因，解決后重新檢測。方法間離群值判定：分別計算待測系統(tǒng)檢測的CRP水平與目標系統(tǒng)檢測的CRP水平的差值絕對值，當差值絕對值小于4倍差值絕對值均值時，則認為方法間無離群值；方法間如果出現(xiàn)1個離群值，分析其原因，刪除后可以繼續(xù)比較；若出現(xiàn)超過2個離群值，應立即停止比較，查找誤差原因，解決后重新檢測。

1.3.3可比性分析 (1)分析各待測系統(tǒng)檢測結果與目標系統(tǒng)檢測結果間的相關性，以目標系統(tǒng)所檢測的CRP水平均值為橫軸，待測系統(tǒng)所檢測的CRP水平均值為縱軸，分別計算出回歸方程：Y=aX+b，當R≥0.975或R2≥0．95時，則認為兩種檢測系統(tǒng)檢測結果呈線性相關[4]。(2)以目標系統(tǒng)檢測的CRP水平均值與待測系統(tǒng)檢測的CRP水平均值的和的1/2為橫軸，以待測系統(tǒng)檢測的CRP水平均值與目標系統(tǒng)檢測的CRP水平均值的差值為縱軸，繪制CRP水平均值偏倚散點圖，評估待測系統(tǒng)檢測結果的偏倚。(3)根據(jù)回歸方程，將CRP的醫(yī)學決定水平(X)代入計算出各檢測系統(tǒng)的預測值(Y)，并計算相對偏倚SE%=∣Y-X∣/X×100%。臨床可接受性判定：各檢測系統(tǒng)在不同醫(yī)學決定水平的相對偏倚SE%<1/2允許總誤差(TEa)，CRP的TEa以原衛(wèi)生部臨床檢驗中心推薦的25%為標準，即SE%<12.5%時結果為臨床可接受。

1.4統(tǒng)計學處理 采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。采用線性回歸分析各待測系統(tǒng)與目標系統(tǒng)檢測結果的相關性，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1各檢測系統(tǒng)離群值判定 各檢測系統(tǒng)方法內(nèi)均有1個離群值，在文件允許范圍內(nèi)直接刪除，剔除離群值后，各檢測系統(tǒng)分別有47個CRP檢測結果。待測系統(tǒng)3檢測的CRP結果中有6個小于1.0 mg/L，舍去后剩余41個檢測結果。各檢測系統(tǒng)方法間無離群值。

2.2各檢測系統(tǒng)檢測結果的相關性分析 待測系統(tǒng)1、2、3所檢測的CRP水平與目標系統(tǒng)所檢測的CRP水平的線性回歸方程分別為：Y=0.996X-0.508、Y=0.970X-0.515、Y=0.971X-0.945，R2分別為0.999、0.998和0.998，均R2≥0.95，P<0.01，相關性良好。見圖1、2、3。

圖2 待測系統(tǒng)2與目標系統(tǒng)檢測結果的線性回歸圖

圖3 待測系統(tǒng)3與目標系統(tǒng)檢測結果的線性回歸圖

2.3待測系統(tǒng)檢測結果的偏倚評估 待測系統(tǒng)1、2、3與目標系統(tǒng)所檢測的CRP水平均值部分存在正偏倚，部分存在負偏倚，以負偏倚為主。見圖4、5、6。

圖4 待測系統(tǒng)1檢測CRP水平均值的偏倚散點圖

圖5 待測系統(tǒng)2檢測CRP水平均值的偏倚散點圖

2.4待測系統(tǒng)的臨床可接受性判定 待測系統(tǒng)3在CRP醫(yī)學決定水平為6 mg/L時，其SE%超出1/2TEa(12.5%)，結果不可接受，經(jīng)回歸方程計算，只有當CRP≥10 mg/L時，待測系統(tǒng)3檢測CRP水平的SE%在允許范圍內(nèi)。待測系統(tǒng)1、2在不同醫(yī)學決定水平時的檢測結果臨床均可接受。見表1。

圖6 待測系統(tǒng)3檢測CRP水平均值的偏倚散點圖

表1待測系統(tǒng)的臨床可接受性判定

檢測系統(tǒng)回歸方程CRP醫(yī)學決定水平(mg/L)SE%臨床可接受性待測系統(tǒng)1Y=0.996X-0.50868.87可接受183.22可接受601.25可接受待測系統(tǒng)2Y=0.970X-0.515611.58可接受185.86可接受603.86可接受待測系統(tǒng)3Y=0.971X-0.945618.65不可接受188.15可接受604.48可接受

3 討 論

目前，在不同醫(yī)療機構甚至同一醫(yī)療機構中，普遍存在一個檢驗項目可能用多種檢測方法和檢測儀器進行檢測的現(xiàn)象。隨著醫(yī)療行業(yè)的進一步規(guī)范，臨床檢測結果必須具有溯源性和可比性[5-6]，不同檢測系統(tǒng)對同一檢測項目的檢測結果具有一致性也是目前醫(yī)院檢測相關質(zhì)量管理工作的最終目標[7]。而檢測結果的一致性判斷，最重要并且切實可行的途徑就是與已知準確的檢測系統(tǒng)進行方法學比較[8]。

雖然邁瑞B(yǎng)C5390血球儀、國賽Aristo特定蛋白儀和Orion Diagnostica Quick Read CRP分析儀均使用配套試劑及校準品，有對應的溯源體系，但由于其均未參與室間質(zhì)評，所檢測的CRP水平的準確性和可比性不得而知。本研究根據(jù)NCCLS EP9-A2文件，將上述3臺儀器的檢測結果與室間質(zhì)評結果均為優(yōu)秀的貝克曼AU5821生化儀的檢測結果進行比較，結果顯示，邁瑞B(yǎng)C5390血球儀和國賽Aristo特定蛋白儀檢測的CRP水平與貝克曼AU5821生化儀的檢測結果具有很好的相關性，且這2臺儀器的檢測結果均滿足臨床可接受性要求，具有可比性。Orion Diagnostica Quick Read CRP分析儀檢測的CRP水平雖然與貝克曼AU5821生化儀的檢測結果具有很好的相關性，但當CRP醫(yī)學決定水平為6 mg/L時，其SE%超出1/2TEa(12.5%)，結果不可接受，進一步經(jīng)回歸方程計算，只有當CRP≥10 mg/L時，Orion Diagnostica Quick Read CRP分析儀檢測的CRP水平才在SE%允許范圍內(nèi)?？紤]出現(xiàn)上述結果的原因可能與人為誤差有關，Orion Diagnostica Quick Read CRP分析儀是半自動儀器，需要手工加樣，加樣量的準確性直接影響結果，且加樣誤差對低水平標本的檢測結果影響更為顯著[9]。本院采購Orion Diagnostica Quick Read CRP分析儀主要是考慮兒童采血較為困難，此儀器只需20 μL血液標本便可進行檢測，兒童可以通過采集末梢血來進行檢測，從而減少患兒痛苦，減輕臨床工作量。邁瑞B(yǎng)C5390血球儀具有微量自動檢測模式，用血量僅35 μL就可完成血細胞分析和CRP檢測，無須手工加樣，且與貝克曼AU5821生化儀的檢測結果具有可比性，與Orion Diagnostica Quick Read CRP分析儀相比，更適用于門、急診兒童末梢血標本檢測。

本研究對邁瑞B(yǎng)C5390血球儀、國賽Aristo特定蛋白儀和Orion Diagnostica Quick Read CRP分析儀檢測的CRP水平均值進行偏倚評估發(fā)現(xiàn)，上述3種待測系統(tǒng)檢測的CRP水平大都低于貝克曼AU5821生化儀的檢測水平，主要表現(xiàn)為負偏倚。這可能是由于該3種檢測系統(tǒng)均檢測的是全血標本，而貝克曼AU5821生化儀檢測的是血清標本，在進行全血CRP檢測時，不同的血細胞比容可直接導致血漿比例不同，從而影響全血檢測結果的準確性[10]。

綜上所述，邁瑞B(yǎng)C5390血球儀和國賽Aristo特定蛋白儀檢測的CRP水平能滿足臨床要求，結果具有可比性。Orion Diagnostica Quick Read CRP分析儀檢測結果在低值部分時誤差較大，本研究將在后期行驗證試驗，如結果仍不滿足臨床可接受性，論證后考慮淘汰該檢測系統(tǒng)，以進一步提高檢測結果的準確性。