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        秋葵微粉對小鼠腸道內(nèi)環(huán)境的影響

        2020-03-13 14:20:02辛松林陳援援邱秀艷周慧超吳玉姣
        核農(nóng)學(xué)報(bào) 2020年4期
        關(guān)鍵詞:小鼠劑量

        辛松林 陳援援 邱秀艷 周慧超 吳玉姣

        (四川旅游學(xué)院食品學(xué)院,四川 成都 610100)

        黃秋葵,又名秋葵(Abelmoschusesculentus),一年生錦葵科(Malvaceae)草本植物,在我國多省份均有較大的種植面積[1]。劉雪蕊[2]研究表明,黃秋葵中可溶性總糖含量為30.88%,還原糖含量為1.97%,粗纖維含量為31.22%。腸道中的可溶性多糖可有效提高糞便持水力,利于排糞便量的增加;而不溶性多糖可以通過促進(jìn)腸道蠕動(dòng),縮短糞便及有毒物質(zhì)在腸胃道的停留時(shí)間。果膠、纖維素和半纖維素等非淀粉多糖在哺乳動(dòng)物的大腸中均能被細(xì)菌發(fā)酵降解,促進(jìn)短鏈脂肪酸(short chain fatty acids,SCFA)的產(chǎn)生,增加腸道益生菌,抑制腸道有害菌群的生長[3-5]。人類腸道內(nèi)微生物的數(shù)量約是人類體細(xì)胞和生殖細(xì)胞的10倍[6],腸道菌群對人類健康具有重要作用。腸道微生物不僅參與宿主主要化學(xué)物質(zhì)的代謝[7],還與腸道疾病密切相關(guān)[8]。目前,關(guān)于秋葵改善動(dòng)物腸道的研究報(bào)道較少。張海文等[9]報(bào)道日糧中添加黃秋葵粉能有效促進(jìn)儋州公雞對飼糧營養(yǎng)物質(zhì)的代謝率。吳佳靜等[10]報(bào)道,以秋葵葉粉喂養(yǎng)海蘭褐蛋雞后能改善蛋雞腸道微生物菌群和腸道組織結(jié)構(gòu)。本試驗(yàn)采用熱風(fēng)干燥、微粉碎制備秋葵微粉,對小鼠進(jìn)行連續(xù)6 周的秋葵微粉灌胃試驗(yàn),觀察和檢測小鼠腸道內(nèi)環(huán)境健康相關(guān)指標(biāo)的變化,旨在綜合評價(jià)秋葵微粉對小鼠的腸道改善能力,為其在食品添加劑、醫(yī)療、保健用品等方面的開發(fā)利用提供依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 試驗(yàn)材料與試劑

        SPF 級KM 小鼠,雄性,體質(zhì)量18~22 g,購自成都達(dá)碩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,動(dòng)物證號:SCXK(川)2015-030;秋葵品種川秋葵1號,四川省植物工程研究院選育品種。

        色譜級甲醇,美國Fisher公司;糞便基因組DNA 提取試劑盒,天根生化科技(北京)有限公司;乙酸、丙酸和丁酸(純度大于99.0%),梯希愛上?;晒I(yè)發(fā)展有限公司;其他試劑為分析級,成都市科龍化工試劑廠。DNA 提取試劑盒,E.Z.N.A@Stool DNAkit,Omega Bio-Tek公司;MiSeg Reagent kit V3,美國illumina公司。

        1.2 儀器與設(shè)備

        PHS-25 酸度汁,上海雷磁儀電科學(xué)儀器股份有限公司;MiSeq 測序儀,美國illumina公司;1260 高效液相色譜儀,美國Agilent公司;XDW-2C 小型低溫超微粉碎機(jī),濟(jì)南達(dá)微機(jī)械有限公司;Sartorius BP121s電子天平,北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司;HX-200型高速中藥粉碎機(jī),浙江省永康市溪岸五金藥具廠;TDZ5-W5型離心機(jī),湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司;XW-80A型渦旋混合器,上海青浦滬西儀器廠;YXQG02 手提式壓力蒸汽滅菌器,山東新華醫(yī)療器械股份有限公司;FX101-3型電熱鼓風(fēng)干燥箱,上海樹立儀器儀表有限公司。

        1.3 試驗(yàn)方法

        1.3.1 秋葵微粉準(zhǔn)備 鮮秋葵→預(yù)處理→護(hù)色處理→熱風(fēng)干燥→粗粉碎→微粉碎→過篩→成品→干燥、避光、密封(24℃)保存,備用。

        果莢長度:7.0 cm左右。預(yù)處理:選擇無腐爛、無病蟲害的新鮮秋葵,清洗、瀝干、去蒂,橫切成0.5 cm左右小段。護(hù)色處理:采用90℃水燙漂新鮮秋葵30 s。熱風(fēng)干燥條件:溫度51.0℃、時(shí)間7.4 h。微粉粒度:150 目。密封室溫(24℃)避光貯藏待用。

        1.3.2 秋葵微粉基本成分測定 粗蛋白質(zhì)含量測定參照GB/T 5009.5-2016[11];粗灰分含量測定參考GB/T 5009.4-2016[12];粗脂肪含量測定參照GB/T 5009.6 -2016[13];水分含量測定參照GB/T 5009.3-2016[14];可溶性總糖含量測定采用苯酚硫酸法,以葡萄糖計(jì)[15];多糖(以膳食纖維計(jì))含量測定參考GB/T 5009.88-2014[16];果膠含量測定參考李加興等[17]的方法。

        1.3.3 動(dòng)物喂養(yǎng) 將小鼠隨機(jī)分為4 組,即對照組(等體積生理鹽水)、秋葵微粉低劑量組(450 mg·kg-1d-1)、中劑量組(900 mg·kg-1·d-1)和高劑量組(1 800 mg·kg-1·d-1),每組10 只。灌胃6 周,1次·d-1,自由攝食和飲水,灌胃后觀察小鼠的精神狀態(tài)、活動(dòng)、覓食量等情況。

        1.3.4 樣品采集 小鼠動(dòng)物喂養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束前連續(xù)3 d每日上午10 點(diǎn)左右收集小鼠糞便。

        小鼠末次灌胃后禁食12 h,采用脫頸椎法處死小鼠,分別取小鼠盲腸、結(jié)腸及其內(nèi)容物,用0.9%生理鹽水清洗盲腸和結(jié)腸,并稱量記錄。

        1.3.5 指標(biāo)測定

        1.3.5.1 pH值測定 精密稱取1.3.4 中的小鼠糞便0.5 g,溶解于10 mL 蒸餾水中,攪拌均勻,靜置10 min,取上層清液,用酸度計(jì)測定pH值。準(zhǔn)確稱取盲腸和結(jié)腸內(nèi)容物0.100 g,加入2 mL 蒸餾水混勻后靜置10 min,取上清液測定其pH值。

        1.3.5.2 SCFA 測定 參考楊光等[18]的方法。提取各組小鼠結(jié)腸及盲腸中糞便樣品作為液相色譜儀測定樣品。色譜條件:色譜柱:TR-FFAP(30 m×0.32 mm×0.25 μm)。測 定 采 用 程 序 升 溫:初 溫80℃,以10℃·min-1速度升至110℃,保持1 min,采用不分流方式,然后以5℃·min-1速度升至135℃,保持1 min,再以5℃·min-1的速度升至145℃,保持1 min,再以20℃·min-1速度升至230℃,保持1 min?;鹧骐x子化檢測儀(flame ionization detector,FID)溫度為250℃,進(jìn)樣口溫度為220℃;載氣為氮?dú)?流速為1 mL·min-1。進(jìn)樣量1 μL,自動(dòng)進(jìn)樣。

        1.3.5.3 DNA 提取和測序 采用DNA 提取試劑盒提取各組小鼠結(jié)腸及盲腸內(nèi)容物中的微生物總DNA[19]。對樣品進(jìn)行PCR 擴(kuò)增、產(chǎn)物純化、文庫制備與庫檢及MiSeq 上機(jī)測序。利用overlap 將雙端數(shù)據(jù)進(jìn)行拼接,并進(jìn)行質(zhì)控、嵌合體過濾,獲得高質(zhì)量的有效數(shù)據(jù)。由于序列數(shù)量龐大,本試驗(yàn)對最終獲得有效數(shù)據(jù)進(jìn)行97%的相似度聚類,為了降低假陽性率,過濾singleton 序列,獲得最終的OTU 豐度及代表序列,進(jìn)行多樣性分析、物種分類注釋和差異分析等。

        1.4 數(shù)據(jù)處理

        試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,統(tǒng)計(jì)分析使用SPSS 19.0 軟件,P<0.05表示存在顯著差異。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 秋葵微粉基本成分的測定

        在最優(yōu)工藝條件下制備的秋葵微粉的得率為18.47%。由表1可知,秋葵微粉含有豐富的多糖,包括果膠、可溶性多糖和不可溶性多糖等成分。研究指出食用富含多糖的食品可以有效預(yù)防腸道疾病,促進(jìn)腸道恢復(fù)和提高機(jī)體免疫力[20]。

        2.2 秋葵微粉對小鼠體重的影響

        由表2可知,秋葵微粉灌胃小鼠1 周后,各劑量組小鼠體重與對照組差異不顯著;2~6 周,秋葵微粉各劑量組的小鼠體重與對照組均呈極顯著差異(P<0.01)。第6 周,對照組小鼠體重增加了49.05%,而秋葵微粉高、中、低劑量組小鼠增重不明顯,分別增加了1.21%、0.33%、0.87%。這可能是因?yàn)榍锟缓亩嗵荹21-22]、果膠[23]等成分能夠讓小鼠具有飽腹感,同時(shí)秋葵熱量較低,因此劑量組小鼠體重增長緩慢。此外,秋葵微粉本身具有一種特殊的氣味,可能會(huì)影響小鼠的攝食;試驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn),各劑量組小鼠的攝食量少于對照組。預(yù)測秋葵微粉可作為減肥代餐,但需要做進(jìn)一步研究證實(shí)。

        表1 秋葵微粉的基本組分(n=3)Table1 Base constituent of okra powder(n=3)

        表2 秋葵微粉對小鼠體重的影響(n=10)Table2 Effect of okra powder on body weight of mice(n=10)/g

        2.3 秋葵微粉對小鼠糞便質(zhì)量、水分和pH值的影響

        由表3可知,秋葵微粉灌胃小鼠6 周后,與對照組相比,各劑量組小鼠糞便質(zhì)量均降低,但無顯著差異(P>0.05),可能與小鼠自由攝食量有關(guān),因?yàn)榍锟⒎鄹缓攀忱w維、粘性多糖及果膠,進(jìn)入小腸、大腸后充分吸水使小鼠具有飽腹感,從而減少自由攝食量,這從小鼠體重的變化已得到證實(shí)。與對照組相比,各劑量組小鼠糞便水分含量均增加,高、中、低劑量組分別增加了31.19%、20.29%、16.80%,其中高劑量組與對照組差異顯著(P<0.05),說明秋葵微粉具有較強(qiáng)的親水性。與對照組相比,各劑量組小鼠糞便pH值均極顯著降低(P<0.01),可能與腸道微生物發(fā)酵水溶性多糖和促進(jìn)SCFA 產(chǎn)生有關(guān)[24-25]。

        2.4 秋葵微粉對小鼠結(jié)腸、盲腸質(zhì)量的影響

        由表4可知,與對照組相比,低劑量組小鼠結(jié)腸質(zhì)量顯著降低(P<0.05),中劑量組盲腸質(zhì)量顯著降低(P<0.05)。這與前人研究結(jié)果不一致,呂鐘鐘等[26]研究發(fā)現(xiàn)給小鼠喂食豆渣、竹筍、及海藻等復(fù)合多糖能夠增加其結(jié)腸和盲腸質(zhì)量;楊光等[27]采用多糖強(qiáng)化凍干山楂果灌胃小鼠,發(fā)現(xiàn)高劑量組盲腸質(zhì)量增加了19.61%,結(jié)腸質(zhì)量增加了14.58%。這可能與秋葵微粉能增加小鼠飽腹感有關(guān),在試驗(yàn)過程中觀察到各劑量組小鼠攝食量均較小,從而導(dǎo)致體重增加緩慢。另外,試驗(yàn)過程中觀察到各劑量組小鼠的首粒糞便時(shí)間縮短,表明秋葵微粉可有效改善腸道內(nèi)容物的質(zhì)量。這可能與秋葵微粉中的多糖富含親水基團(tuán)有關(guān),2.3部分的試驗(yàn)結(jié)果也證實(shí)了秋葵微粉具有較強(qiáng)的持水能力。此外,高分子多糖在腸道內(nèi)可形成一定的滲透性纖維層,可吸收某些物質(zhì),從而提高腸內(nèi)容物的質(zhì)量。與對照組相比,各劑量組盲腸和結(jié)腸內(nèi)容物pH值均下降,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

        表3 秋 葵微粉對小鼠糞便質(zhì)量、水分和pH值的影響(n=10)Table3 Effect of okra powder on fecal weight,water content and pH value in mice(n=10)

        表4 秋葵微粉對小鼠盲腸、結(jié)腸的質(zhì)量和pH值的影響(n=10)Table4 Effect of okra powder on cecum and colon weight and pH value in mice(n=10)

        2.5 秋葵微粉對小鼠腸道菌群的影響

        2.5.1 菌群多樣性分析 按97%的序列相似性聚類為OTUs (operational taxonomic units)[28],得到每個(gè)cluster的序列及其代表序列(即為OTU)。由表5可知,各劑量組盲腸內(nèi)容物菌群的OTU數(shù)量均極顯著高于對照組(P<0.01),其中OTU數(shù)量最多的為中劑量組(8 173.00),對照組最少(2 511.80),表明各劑量組小鼠盲腸內(nèi)容物中菌群的相對豐度較高。Alpha 多樣性主要用于反映物種豐富度、均勻度和測序深度[29]。Chao1 指數(shù)用于估計(jì)樣品中所含OTU數(shù)目,數(shù)值越大表明菌群相對豐度越大。結(jié)果表明,Chaol值最高的為中劑量組(2 834.36),高劑量組最低(2 400.12),對照組的Chaol值與高、低劑量組均無顯著差異(P>0.05)。Simpson 指數(shù)越高表示樣品物種多樣性越高。對照組Simpson值在4 組樣品中最小(0.98),各劑量組Simpson值均為0.99。Shannon 指數(shù)主要用于描述OTU的無序度和不確定性,不確定性越高表明多樣性指數(shù)越高[30]。4 組樣品中中劑量組的Shannon值最大(8.50),低劑量組次之(8.30),對照組再次之(8.20),高劑量組最低(8.13)。Observed species 指數(shù)表示樣品中含有的OTU數(shù)目,中劑量組的OTU數(shù)目最多(1 803),高劑量組的OTU數(shù)據(jù)最少(1 586)。各劑量組與對照組相比,其Shannon 指數(shù)、Observed species 指數(shù)和Simpson 指數(shù)均未表現(xiàn)出顯著差異(P>0.05)。綜上,小鼠經(jīng)過6 周灌胃秋葵微粉后,其腸道菌群的多樣性高于對照組,且秋葵微粉中劑量組的盲腸內(nèi)容物菌群相對豐度在各劑量組中最高。

        表5 小鼠盲腸內(nèi)容物菌群的OTU數(shù)量及Alpha 多樣性(n=10)Table5 OTU number and Alpha diversity of cecal content flora in mice(n=10)

        由表6可知,各劑量組結(jié)腸內(nèi)容物菌群的OTU數(shù)量均高于對照組,但無顯著差異(P>0.05);其中OTU數(shù)量最多的為高劑量組(7 906.00),對照組最少(3 466.60),表明各劑量組小鼠結(jié)腸內(nèi)容物中菌群的相對豐度較高。Chaol值最高的為中劑量組(2 876.21),且極顯著高于對照組(P<0.01);低劑量(2 714.16)顯著高于對照組。4 組樣品的Simpson值均為0.99。對照組的Shannon值最小(8.28),各劑量組Shannon值均高于對照組(P>0.05),且隨著秋葵微粉劑量增加而增大。中劑量組物種數(shù)目最多(1 876.00),對照組的物種數(shù)目最少(1 653.00)。各劑量組與對照組之間Shannon 指數(shù)、Observed species指數(shù)及Simpson 指數(shù)差異均不顯著(P>0.05)。表明秋葵微粉具有改善小鼠腸道菌群多樣性的作用。

        表6 小鼠結(jié)腸內(nèi)容物菌群的OTU數(shù)量及Alpha 多樣性(n=10)Table6 OTU number and Alpha diversity of mouse colonic flora in mice(n=10)

        2.5.2 菌群構(gòu)成分析 根據(jù)樣品物種豐度表,默認(rèn)選取豐度最高的20個(gè)屬群,將其余的屬群設(shè)置為其他(Others),計(jì)算相對豐度,并以此繪制樣品相對豐度堆疊柱狀圖。該柱狀圖雖然可以直觀看到不同樣品的屬群豐度情況,但是無法直接觀察樣品之間的相似性遠(yuǎn)近。為此,在柱狀圖的基礎(chǔ)上,根據(jù)樣品間Bray-Curtis距離進(jìn)行聚類分析。最終,將樣品聚類結(jié)果和樣品相對豐度柱狀圖整合展示。

        由圖1-B可知,對照組結(jié)腸內(nèi)容物(JA)、低劑量組結(jié)腸內(nèi)容物(JB)、中劑量組結(jié)腸內(nèi)容物(JC)以及JD(高劑量組結(jié)腸內(nèi)容物)4 組樣品的微生物組成在屬的水平上,以未分類毛螺菌(Lachnospiraceae_unclassified)、未分類紫外單胞菌(Porphyromonadaceae_unclassified)、未分類乳酸桿菌(Lactobacillus)和未分類瘤胃球菌(Ruminococcaceae_unclassified)為主要物種,所占比例均在55.64% 以上。腸道菌群主要?dú)w屬厚壁菌門和擬桿菌門[30-31]。Lactobacillus是對人體腸道有益的微生物,JA 中占5.74%,而在JB、JC和JD 中的比例分別為20.73%、13.39%和24.84%,表明秋葵微粉有助于小鼠腸道Lactobacillus的增殖,其中JD的增加效果最為突出。擬桿菌(Bacteroides)在對照組中占1.29%,而在高、中、低各劑量組中所占比例均下降,分別為0.46%、1.13%和0.76%。枝菌(Alistipes)可能導(dǎo)致腸道炎癥,在JA 中占1.71%,在JB和JC 中降至1.02%和1.53%,而在JD 中升高至2.05%。支原體(Allobaculum)致人體炎癥及并發(fā)癥(不孕不育),在JA中含量高達(dá)4.98%,JC 中為2.90%,其在JB 中僅為0.70%,而在JD 中未檢出。以上結(jié)果表明,小鼠攝入秋葵微粉有利于腸道益生菌增殖,同時(shí)對病原菌的生長也有一定的抑制作用,從而起到改善小鼠其腸道菌群的作用。

        對照組盲腸內(nèi)容物(MA)、低劑量組盲腸內(nèi)容物(MB)、中劑量組盲腸內(nèi)容物(MC)以及高劑量組盲腸內(nèi)容物(MD)4 組樣品的微生物組成在屬的水平上,仍以Lachnospiraceae_unclassified、Porphyromonadaceae_unclassified、Lactobacillus和Ruminococcaceae_unclassified為主,所占比例均在53.67%以上。Lactobacillus在MA 中占7.31%,而在MB、MC和MD中的比例隨著秋葵微粉劑量增加而增加,分別為25.01%、26.52%和31.82%。Bacteroides在MA 中占0.55%;在MB和MD 中占比例均下降,分別為0.43%和0.17%;在MC 中占0.61%,略有增加。Alistipes在MA 中占1.10%,而在MB、MC和MD 中的比例均降低,分 別為0.46%、0.60%和0.31%。MA 中Allobaculum所占比例高達(dá)5.80%,MB為0.18%,MC為3.62%,MD為0.02%。以上結(jié)果與小鼠結(jié)腸內(nèi)容物的菌群分布結(jié)果類似。

        由圖1-A可知,低劑量組結(jié)腸內(nèi)容物和高劑量組結(jié)腸內(nèi)容物在細(xì)菌群落物種組成上較為接近;低劑量組盲腸內(nèi)容物和中劑量組盲腸內(nèi)容物在細(xì)菌群落物種組成上較為接近;而結(jié)腸對照組內(nèi)容物和盲腸對照組內(nèi)容物在物細(xì)菌群落種組成上較為接近。進(jìn)一步說明秋葵微粉攝入量會(huì)影響小鼠腸道菌落結(jié)構(gòu)的變化。

        2.6 秋葵微粉對小鼠盲腸及結(jié)腸內(nèi)容物中SCFA含量的影響

        乙酸、丙酸和丁酸是小鼠盲腸內(nèi)容物中含量最高的3種SCFA。由表7可知,與對照組相比,高、中、低劑量組盲腸內(nèi)酵解產(chǎn)物SCFA含量均提高,乙酸含量明顯高于其他2種SCFA,因?yàn)橐宜崾嵌嗵窃谀c道內(nèi)發(fā)酵后的最主要產(chǎn)物。與對照組相比,高、中、低劑量組盲腸內(nèi)乙酸含量分別提高了15.85%(P>0.05)、222.58%(P<0.01)和67.08%(P<0.01);丙酸含量分別極顯著提高了236.43%、199.96%、269.94%;丁酸含量分別極顯著提高了 174.17%、589.59%、161.25%。說明秋葵微粉可有效促進(jìn)盲腸內(nèi)容物的發(fā)酵,促進(jìn)盲腸內(nèi)酸性物質(zhì)增加,降低其pH值,有利于盲腸微生物生存。

        圖1 屬水平上各樣本細(xì)菌群落變化的距離聚類樹(A)和相對豐度圖(B)Fig.1 Bray-curtis distance(A) and relative abundance(B) of bacterial community changes in different samples at genus level

        表7 秋葵微粉對小鼠盲腸內(nèi)容物中SCFA含量的影響(n=10)Table7 Effect of okra powder on the content of short chain fatty acids in cecal contents of mice(n=10)

        由表8可知,與對照組相比,各劑量組小鼠結(jié)腸內(nèi)容物中SCFA含量均增加,乙酸含量也高于其他2種SCFA。結(jié)腸中SCFA的含量較盲腸中低,這是由于內(nèi)容物從盲腸到結(jié)腸的過程中,SCFA 不斷被腸粘膜細(xì)胞吸收。與對照組相比,高、中、低劑量組盲腸內(nèi)乙酸的提高率分別為3.45%、11.96%和6.11%;丙酸含量提高率分別為47.17%、29.95%和72.45%;丁酸含量提高率分別為19.27%、30.37%和13.34%。此結(jié)果與小鼠盲腸內(nèi)容物中SCFA含量上升趨勢一致,進(jìn)一步說明秋葵微粉具有短時(shí)間內(nèi)大幅度提高結(jié)腸內(nèi)容物質(zhì)酵解反應(yīng)速度的作用,乙酸、丙酸和丁酸在結(jié)腸中大量產(chǎn)生可有效降低結(jié)腸內(nèi)pH值,促進(jìn)益生菌繁殖,抑制有害菌生長,保護(hù)腸道健康。

        3 討論

        大量研究證實(shí),多糖可改善腸道微生態(tài),將蒲公英多糖[32]、桑葉多糖[33]用于腸道菌群失調(diào)的小鼠,均能一定程度上恢復(fù)小鼠腸道的微生態(tài)平衡;牛膝多糖用于斷奶仔豬免疫應(yīng)激模型中,能夠使仔豬乳酸菌、大腸埃希菌、腸球菌維持在正常水平[34];蘆薈多糖用于試驗(yàn)性大鼠結(jié)腸炎模型,能夠緩解結(jié)腸黏膜炎癥狀態(tài)[35]。大量研究證實(shí)多糖可改善腸道產(chǎn)酸,將大豆低聚糖用于不同膳食模式下的健康成人,發(fā)現(xiàn)在高動(dòng)物性食物模式下的腸道SCFA 總量明顯增加,以乙酸和丁酸最為突出[36]。Melliana 等[37]將12種膳食纖維用于人體腸道微生物體外發(fā)酵,發(fā)現(xiàn)上述12種膳食纖維均能促進(jìn)產(chǎn)生SCFA。龐秋芳等[38]將直腸菌群對瓜爾豆膠、果膠進(jìn)行體外發(fā)酵試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)2種植物膠均能促進(jìn)產(chǎn)生SCFA。本試驗(yàn)采用熱風(fēng)干燥、微粉碎技術(shù)處理新鮮秋葵得到的秋葵微粉,其多糖含量高達(dá)43.65%,推測秋葵微粉具有改善動(dòng)物腸道作用應(yīng)該與其富含多糖密切相關(guān)。

        表8 秋葵微粉對小鼠結(jié)腸內(nèi)容物中SCFA含量的影響Table8 Effect of okra powder on the content of short chain fatty acids in colon contents of mice(n=10)

        研究表明,微生態(tài)調(diào)節(jié)劑并不是劑量越高效果越好,過高劑量的攝入在誘導(dǎo)雙歧桿菌增殖的同時(shí),會(huì)減少丁酸產(chǎn)生菌的數(shù)量,誘導(dǎo)菌群多樣性下降[29-30]。本研究發(fā)現(xiàn),小鼠過量攝食秋葵微粉會(huì)干擾其體重的增長,可能與秋葵微粉本身的特殊氣味以及低能量、飽腹感有關(guān)。因此,綜合考慮生產(chǎn)成本和改善腸道的效果,低劑量更為適宜。

        4 結(jié)論

        秋葵微粉具有提高小鼠腸道內(nèi)容物保水性,降低腸道內(nèi)容物及糞便pH值的作用,可促進(jìn)腸道內(nèi)酵解作用,提高腸道菌群的多樣性,抑制Alistipes、Allobaculum等有害菌的增殖,促進(jìn)Lactobacillus等有益菌的增殖;促進(jìn)腸道乙酸、丙酸和丁酸等SCFA含量明顯增加,預(yù)防有害微生物繁殖引起相關(guān)腸道疾病。3個(gè)劑量的秋葵微粉對調(diào)節(jié)小鼠腸道健康均有顯著效果,其中,低劑量秋葵微粉(450 mg·kg-1·d-1)更具實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

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