劉 敏，黃 菁，陳 偉，張永臣

（南京市第二醫(yī)院，江蘇 南京210003）

康艾注射液主要成分是黃芪、人參和苦參素，具有益氣扶正，增強機體免疫等功能，臨床可用于原發(fā)性肺癌、肝癌、直腸癌、淋巴癌等癌癥引起的白細(xì)胞數(shù)量減少癥狀，還可用于治療慢性乙型肝炎[1-2]。人參、黃芪作為傳統(tǒng)中藥，在臨床上應(yīng)用廣泛[3-5]。因種植過程中的空氣、水、土壤等環(huán)境因素影響，易受到污染，可導(dǎo)致用藥安全問題[6-8]。金屬污染指標(biāo)是評價中藥材及其制劑安全性的重要指標(biāo)，因此加強對康艾注射液等中藥注射劑中重金屬殘留的監(jiān)測，對于控制藥品質(zhì)量，保障人民群眾用藥安全具有重要的現(xiàn)實意義。

已有康艾注射液中活性成分含量的測定研究[9-12]，但關(guān)于康艾注射液中重金屬檢測的研究極少。本實驗開發(fā)一種利用微波消解法對樣品進行前處理，ICP-MS法同時檢測康艾注射液中7種金屬殘留的分析方法，研究表明，此法具有前處理簡單、靈敏度高、線性范圍寬、檢測結(jié)果準(zhǔn)確等優(yōu)點，可用于康艾注射液等中藥注射劑中重金屬殘留的監(jiān)測。

1 材料與方法

1.1 儀器

Thermo I-CAP Q型ICP-MS儀（美國熱電公司）；MARS X-press高壓密閉微波消解儀[美國CEM（中國）有限公司]；XS 204型電子天平[萬分之一，梅特勒（中國）有限公司]；Milli-Q Advantage A10型純水處理器 （美國密理博公司） ；Eppendorf 0～1000 μl移液器（德國艾本德公司）。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與試劑

鉛[GBW（E）081577]、砷[GBW（E）100203]、鉻[GBW（E）081584]、鎘[GBW（E）081581]、鋁[GBW（E）081594]、銅[GBW（E）081579]、錫[GBW（E）081583]標(biāo)準(zhǔn)溶液，質(zhì)量濃度均為1.0 mg/ml；購自國家鋼鐵材料測試中心；內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液：鉍、鍺、銦、銠、鈧、鋱、釔（GSB04-2826-2011）混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，質(zhì)量濃度為10.0 μg/ml，購自國家鋼鐵材料測試中心；硝酸、鹽酸、高氯酸均為優(yōu)級純（國藥集團）。

1.3 溶液配制

多元素標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液：精密吸取鉛、砷、鉻、鎘、鋁、銅、錫單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液各1.0 ml，分別置入100 ml量瓶，加3 %稀硝酸定容；精密吸取上述溶液2.0 ml至200 ml量瓶，加3 %稀硝酸定容（各元素質(zhì)量濃度均為100 μg/L）。

標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液：精密吸取多元素標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液適量，分別置入20 ml量瓶，加3 %稀硝酸定容，配制含各元素質(zhì)量濃度分別為0.1，0.5，1.0，5.0，10.0，50.0 μg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，即得標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液。

內(nèi)標(biāo)溶液：精密吸取內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液200 μl，置入200 ml量瓶，加3 %稀硝酸定容至刻度，搖勻。

1.4 儀器條件

1.4.1 ICP-MS儀參數(shù)設(shè)置 儀器使用前，用調(diào)諧液調(diào)整儀器各項指標(biāo)，使儀器響應(yīng)值達到最優(yōu)條件，分別自動調(diào)諧儀器靈敏度、氧化物、矩管位置、分辨率等各項指標(biāo)達到最優(yōu)條件。調(diào)諧后質(zhì)譜各項參數(shù)見表1。

表1 ICP-MS儀參數(shù)

1.4.2 微波消解程序 開啟微波消解儀，預(yù)熱約30 min后，按表2設(shè)置微波消解升溫程序。

表2 微波消解程序

1.5 樣品溶液配制

取康艾注射液，準(zhǔn)確稱取約0.5 g樣品，置入聚四氟乙烯高壓消解罐內(nèi)，加硝酸10 ml，搖勻，浸泡過夜，蓋好內(nèi)蓋并旋緊外套，置入微波消解儀中，按1.4.2項程序進行消解，消解完全后，取消解內(nèi)罐置入電熱板上緩緩加熱至紅棕色蒸氣揮盡并近干，用30 ml 3 %稀硝酸溶液分5次，轉(zhuǎn)移至50 ml量瓶，加3 %稀硝酸定容至刻度，搖勻即得；同法同時制備試劑空白溶液。

2 結(jié)果與討論

2.1 前處理方法的選擇

前處理方法對金屬元素殘留檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度起重要影響。藥品消解常用的前處理方法主要有：干法消解、濕法消解和微波消解。干法消解和濕法消解，實驗效率低，前處理過程冗長，約占全部分析過程的70 %；且干法和濕法前處理方法為開放式消解，尤其對于易揮發(fā)的金屬元素，如：鋁、砷等，會造成一定損失，檢測準(zhǔn)確度偏差；干法和濕法前處理方法試劑消耗量較大，對環(huán)境易造成污染。微波消解是在密閉的環(huán)境下進行樣品的消化，對實驗人員影響較??；對于易揮發(fā)性的金屬元素，能夠避免揮發(fā)損失，檢測準(zhǔn)確度較高，試劑用量較少，環(huán)境友好度高。故選擇微波消解法作為樣品的前處理方法。

2.2 質(zhì)譜干擾及同位素選擇

與原子吸收法相比，ICP-MS法不必考慮金屬元素的分析譜線影響，有較高的靈敏度，調(diào)諧后的質(zhì)譜儀，不需著重于靈敏度調(diào)試。但ICP-MS法中的質(zhì)譜干擾也是一種嚴(yán)重的干擾形式，會導(dǎo)致檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度發(fā)生較大的偏差。常見的質(zhì)譜干擾有：氧化物、氫化物和雙電荷干擾、多原子和離子干擾，同質(zhì)異位素重疊的干擾等。如：典型的37Cl對53Cr的干擾，會造成Cr空白值的異常偏高。在研究有基質(zhì)元素形成的多原子的離子時，選擇不易受到干擾的同位素進行定量，可以有效的消除質(zhì)譜干擾。本實驗選擇待測元素質(zhì)量數(shù)見表3。

表3 待測元素質(zhì)量數(shù)

2.3 內(nèi)標(biāo)消除干擾

ICP-MS法，藥品樣品中部分基質(zhì)會對待測元素的檢測產(chǎn)生增強或者抑制的作用，且檢測過程中響應(yīng)信號值會隨著時間的推移而發(fā)生變化。為消除上述兩種因素對檢測結(jié)果的影響，實驗采用內(nèi)標(biāo)法用于檢測各種待測元素，即在檢測中在線加入一定濃度的內(nèi)標(biāo)溶液。如：鉛207，用錸185和鉍209進行校正；砷75，采用鍺72和銠103進行校正。實驗表明，采用在線內(nèi)標(biāo)法測定上述7種元素，消除了信號漂移和基質(zhì)干擾因素，提高了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度。

2.4 線性曲線和檢出限

精密吸取1.3項多元素標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液適量，分別置入20 ml量瓶，加3 %稀硝酸定容，配制含各元素質(zhì)量濃度分別為0.1，0.5，1.0，5.0，10.0，50.0μg/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，再按1.4項設(shè)置儀器條件，內(nèi)標(biāo)法校正，以各元素響應(yīng)值（縱坐標(biāo)Y）與其對應(yīng)的質(zhì)量濃度（橫坐標(biāo)X），制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，在以3倍信噪比計算檢出限。結(jié)果見表4。

表4 7種待測元素曲線方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限

2.5 方法加標(biāo)回收率

取康艾注射液，分別準(zhǔn)確稱取約0.5 g樣品，置入聚四氟乙烯高壓消解罐內(nèi)，再分別加入一定量1.3項多元素標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，加硝酸10 ml，后續(xù)按照1.5項樣品溶液配制方法進行處理，得到各元素終點濃度分別為0.1 μg/L和1.0 μg/L的兩水平加標(biāo)溶液，再按1.4項設(shè)置儀器條件，內(nèi)標(biāo)法校正，計算2水平加標(biāo)溶液的回收率，結(jié)果表明，兩水平各元素加標(biāo)回收率在87.5 %～105.3 %之間，檢測結(jié)果準(zhǔn)確度較高。結(jié)果見表5。

2.6 方法重復(fù)性和精密度試驗

取康艾注射液，準(zhǔn)確稱取約0.5 g樣品，置入聚四氟乙烯高壓消解罐內(nèi)，再加入一定量2.3多元素標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液一定量，加硝酸10 ml，后續(xù)按照1.5項樣品溶液配制方法進行處理，得到各元素終點濃度分別為0.1 μg/L加標(biāo)溶液，同法配制6份加標(biāo)溶液，再按1.4項設(shè)置儀器條件，內(nèi)標(biāo)法校正，6份加標(biāo)溶液分別進樣1針，計算方法重復(fù)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差；取任意一份，連續(xù)進樣6次，計算方法精密度相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。結(jié)果表明，鉛、砷、鉻、鎘、鋁、錫、銅精密度RSD分別為3.42 %，4.11 %，2.28 %，3.51 %，4.02 %，1.99 %和2.68 %；重復(fù)性RSD分別為1.19 %，1.92 %，2.01 %，3.03 %，1.05 %和0.98 %，方法具有較好的重復(fù)性和精密度。

表5 2水平加標(biāo)回收率實驗結(jié)果

3 結(jié)論

建立了一種利用微波消解對康艾注射液進行消解處理，ICP-MS法檢測鉛、砷、鉻、鎘、鋁、銅、錫的檢驗方法。采用微波消解法進行消解處理；對質(zhì)譜檢測的干擾進行分析優(yōu)化，采用內(nèi)標(biāo)法消除質(zhì)譜干擾；對方法的線性、加標(biāo)回收、檢出限、重復(fù)性等進行了考察。結(jié)果表明，此法具有前處理簡單、污染小、檢測結(jié)果準(zhǔn)確等優(yōu)點，適用于康艾注射液中殘留金屬的監(jiān)測。