劉俊圻 陳藝尹 楊文賓

口腔疾病研究國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 國(guó)家口腔疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心四川大學(xué)華西口腔醫(yī)院口腔頜面外科 成都 610041

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow mesenchymal stem cell）是主要存在于骨髓的一類具有自我更新及多向分化為骨相關(guān)結(jié)構(gòu)潛能的干細(xì)胞[1]。在生理狀態(tài)下，作為成骨細(xì)胞和骨髓脂肪細(xì)胞的共同祖細(xì)胞，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化與成脂向分化的相互平衡受到嚴(yán)格的時(shí)空控制，以保障骨骼健康。在衰老或激素紊亂等病理刺激下，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞優(yōu)先向脂肪細(xì)胞分化，導(dǎo)致骨髓脂肪組織沉積以及進(jìn)行性骨質(zhì)丟失。年齡相關(guān)的骨質(zhì)疏松癥的特點(diǎn)即是骨量減少，骨髓中脂肪組織過(guò)度沉積。骨微結(jié)構(gòu)的改變?cè)龃罅斯钦鄣娘L(fēng)險(xiǎn)，為患者的日?；顒?dòng)帶來(lái)不便。

作為成骨細(xì)胞的最主要來(lái)源，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞一直被視作解決骨相關(guān)疾病的一個(gè)跳板[2-3]。然而，由于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在分化為成骨細(xì)胞的同時(shí)，也能分化為軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等其他結(jié)構(gòu)，給其臨床應(yīng)用帶來(lái)不確定性，故研究骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化的明確機(jī)制顯得尤為重要。在過(guò)往的研究中，研究者多把重心放在了一些外在的影響因素以及轉(zhuǎn)錄因子上，隨著表觀遺傳學(xué)研究的不斷發(fā)展，學(xué)界對(duì)于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞命運(yùn)決定機(jī)制的理解及研究得以進(jìn)展。

表觀遺傳是指不改變基因本身的核苷酸序列，但基因的表達(dá)卻發(fā)生了可遺傳性改變的一種遺傳方式，通常包括DNA甲基化、組蛋白修飾、微小RNA（Micro RNA，miRNA）以及RNA甲基化等。其中，DNA甲基化、組蛋白修飾、miRNA等已被公認(rèn)為參與調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化的重要表觀遺傳學(xué)標(biāo)記，但關(guān)于RNA腺嘌呤6-甲基化修飾在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化中扮演的角色卻鮮少被提及[4-6]。新近的一系列研究則逐漸填補(bǔ)了這一空白，提示RNA腺嘌呤6-甲基化修飾調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化的作用不容小覷。

1 RNA腺嘌呤6-甲基化修飾介紹

RNA腺嘌呤6-甲基化修飾是指RNA腺嘌呤的6號(hào)位N原子被甲基化，形成6-甲基腺嘌呤（N6-methyladenosine，m6A），是真核生物RNA上豐度最高的表觀遺傳學(xué)修飾。比如平均每個(gè)mRNA上就有3~5個(gè)m6A位點(diǎn)[7-8]。

1.1 RNA腺嘌呤6-甲基化修飾的調(diào)節(jié)因素

RNA腺嘌呤6-甲基化修飾是動(dòng)態(tài)可逆的，其功能的發(fā)揮依賴于甲基轉(zhuǎn)移酶、去甲基化酶以及讀取蛋白三者的共同調(diào)節(jié)[9]。

甲基轉(zhuǎn)移酶負(fù)責(zé)催化m6A的形成。在哺乳動(dòng)物中，甲基轉(zhuǎn)移酶主要包括甲基轉(zhuǎn)移酶樣（methyltransferase like，METTL）3、METTL14、腎母細(xì)胞瘤1相關(guān)蛋白（Wilms tumour 1-associated protein，WTAP）以及KIAA1429。METTL3與METTL14通過(guò)形成異源二聚體發(fā)揮甲基轉(zhuǎn)移酶的催化作用，其中METTL13是催化亞基，而METTL14則是促進(jìn)RNA結(jié)合的必要成分[10-13]。WTAP雖無(wú)直接的甲基轉(zhuǎn)移酶活性，但對(duì)于引導(dǎo)METTL3-METTL14復(fù)合體至核散斑起著至關(guān)重要的作用[14-15]。

去甲基化酶FTO和ALKBH5則可“擦除”這種甲基化修飾。FTO和ALKBH5雖然在酶動(dòng)力學(xué)上表現(xiàn)相當(dāng)，但在組織分布以及具體的功能上卻表現(xiàn)出一定的特異性。FTO在大腦以及脂肪組織中表達(dá)水平最高，并參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)以及脂肪形成的調(diào)控[16-20]。ALKBH5則在睪丸中分布最多，并與精子的正常形成息息相關(guān)，Alk-bh5基因缺陷會(huì)導(dǎo)致雄性小鼠不育[20]。

m6A通過(guò)改變RNA結(jié)構(gòu)或者吸引特定的RNA讀取蛋白從而影響RNA的代謝[21]。常見(jiàn)的讀取蛋白主要包括含YTH結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)以及真核生物起始因子（eukaryotic initiation factor，eIF）3。對(duì)哺乳動(dòng)物來(lái)說(shuō)，含YTH結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)主要包括YTHDC1-2和YTHDF1-3[22]。YTH結(jié)構(gòu)域可折疊成疏水的袋狀結(jié)構(gòu)，從而直接容納并且緊密結(jié)合RNA m6A殘基，介導(dǎo)下游RNA的翻譯、降解以及選擇性剪切等過(guò)程[23-25]。哺乳動(dòng)物和酵母中的m6A大多位于mRNA終止密碼子附近和3"端非翻譯區(qū)[26-28]，eIF3則可以直接或者在YTHDF1的誘導(dǎo)下間接與mRNA 5"端非翻譯區(qū)的m6A結(jié)合，而影響mRNA的翻譯效率[29]。值得注意的是，隨著表觀遺傳學(xué)的高速發(fā)展，不斷有新的酶或蛋白質(zhì)被發(fā)現(xiàn)可能成為上述三類物質(zhì)的新成員，豐富了學(xué)界對(duì)RNA腺嘌呤6-甲基化修飾的理解與認(rèn)識(shí)[9,29-30]。

1.2 RNA腺嘌呤6-甲基化修飾對(duì)干細(xì)胞分化的調(diào)控

RNA m6A位點(diǎn)或水平的變化可能導(dǎo)致在個(gè)體正常生長(zhǎng)、發(fā)育過(guò)程中負(fù)責(zé)干細(xì)胞分化的關(guān)鍵基因表達(dá)增強(qiáng)或受阻，從而調(diào)控干細(xì)胞的分化。過(guò)往的一系列研究[31-34]表明，RNA m6A在胚胎干細(xì)胞、造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞等干細(xì)胞的分化過(guò)程中都發(fā)揮了十分重要的作用。

Geula等[35]發(fā)現(xiàn)胚胎干細(xì)胞的原始態(tài)和始發(fā)態(tài)受到RNA m6A的調(diào)控，認(rèn)為m6A可降低mRNA的穩(wěn)定性，抑制m6A會(huì)使優(yōu)勢(shì)基因表達(dá)更加明顯。故敲除原始態(tài)胚胎干細(xì)胞內(nèi)Mettl3之后，原始態(tài)胚胎干細(xì)胞將傾向于維持幼稚狀態(tài)，更難進(jìn)入始發(fā)態(tài)，分化受到了抑制。同理，敲除始發(fā)態(tài)胚胎干細(xì)胞內(nèi)Mettl3會(huì)抑制其自我更新，而促進(jìn)其不斷分化[35-36]。

Zhang等[37]發(fā)現(xiàn)，RNA m6A通過(guò)YTHDF2介導(dǎo)notch1a mRNA和rhocamRNA的穩(wěn)定性，參與調(diào)控造血內(nèi)皮細(xì)胞的內(nèi)皮基因和造血基因表達(dá)平衡，從而影響造血干細(xì)胞的生成。Mettl3的缺失將導(dǎo)致動(dòng)脈內(nèi)皮發(fā)育相關(guān)的mRNA的豐度增加，內(nèi)皮-造血轉(zhuǎn)化過(guò)程受到阻斷。此外，Weng等[38]在研究中還發(fā)現(xiàn)，METTL14通過(guò)m6A抑制造血干細(xì)胞和部分急性髓系白血?。╝cute myeloid leukemia，AML）細(xì)胞分化，抑制METTL14則會(huì)促進(jìn)上述細(xì)胞的終末髓系分化并抑制AML細(xì)胞的增殖，揭示了m6A在急性髓系白血病的發(fā)病機(jī)制中的重要作用。

在神經(jīng)干細(xì)胞中，m6A多在與轉(zhuǎn)錄因子、神經(jīng)發(fā)育、細(xì)胞周期和神經(jīng)元分化有關(guān)的mRNA上富集。Yoon等[39]發(fā)現(xiàn)無(wú)論敲除胚胎小鼠大腦中的Mettl3還是Mettl14，均會(huì)降低大腦內(nèi)m6A水平并延長(zhǎng)放射狀膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞周期。Li等[40]發(fā)現(xiàn)FTO缺乏會(huì)抑制小鼠體內(nèi)成年神經(jīng)干細(xì)胞的增殖和分化，可能是由于m6A標(biāo)記的腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子通路的幾個(gè)關(guān)鍵因子的表達(dá)發(fā)生改變。Wang等[41]敲除小鼠胚胎神經(jīng)干細(xì)胞內(nèi)Mettl14后，神經(jīng)干細(xì)胞增殖受到抑制以及分化提前，即m6A可促進(jìn)胚胎神經(jīng)干細(xì)胞的增殖并預(yù)防其過(guò)早分化，從而保障神經(jīng)干細(xì)胞的儲(chǔ)備。值得一提的是，該團(tuán)隊(duì)還首次提出m6A可通過(guò)影響組蛋白H3賴氨酸27乙?；?、組蛋白H3賴氨酸27三甲基化、組蛋白H3賴氨酸4三甲基化在內(nèi)的部分組蛋白修飾而調(diào)節(jié)基因的表達(dá)。Chen等[42]發(fā)現(xiàn)，敲除成年神經(jīng)干細(xì)胞內(nèi)的Mettl3，會(huì)抑制其增殖并導(dǎo)致其更傾向于分化為膠質(zhì)狀細(xì)胞。同時(shí)，敲除Mettl3減少了組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶Zeste基因增強(qiáng)子同源物（enhancer of Zeste homolog，Ezh）2和賴氨酸27三甲基化組蛋白H3的表達(dá)，而Ezh2的過(guò)表達(dá)可以恢復(fù)神經(jīng)干細(xì)胞的正常增殖與分化，再次揭示m6A與組蛋白修飾在調(diào)控神經(jīng)干細(xì)胞增殖、分化方面存在著緊密聯(lián)系。

此外，m6A mRNA修飾與膠質(zhì)母細(xì)胞瘤干細(xì)胞（glioblastoma stem cell）的自我更新和腫瘤發(fā)生緊密相關(guān)。抑制METTL3或METTL14可顯著促進(jìn)人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤干細(xì)胞的生長(zhǎng)、自我更新與腫瘤發(fā)生；相反，METTL3的過(guò)表達(dá)或FTO的抑制則會(huì)抑制膠質(zhì)母細(xì)胞瘤干細(xì)胞的生長(zhǎng)和自我更新。同時(shí)，將缺乏FTO的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤干細(xì)胞移植到小鼠體內(nèi)，能減慢腫瘤進(jìn)展并延長(zhǎng)小鼠壽命，為治療膠質(zhì)母細(xì)胞瘤提供了一個(gè)潛在的靶點(diǎn)[32]。

2 RNA m6A調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化的機(jī)制

關(guān)于RNA腺嘌呤6-甲基化修飾在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化過(guò)程中發(fā)揮的作用，目前的研究主要局限于甲基轉(zhuǎn)移酶METTL3以及去甲基化酶FTO?？傮w來(lái)說(shuō)，在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞內(nèi)，METTL3可促進(jìn)其成骨向分化，而FTO的表達(dá)上調(diào)則會(huì)抑制其成骨向分化，促進(jìn)其成脂向分化。其他與RNA m6A形成相關(guān)的因素在此過(guò)程中發(fā)揮的作用仍有待進(jìn)一步研究。

2.1 甲基轉(zhuǎn)移酶METTL3

METTL3廣泛存在于小鼠骨細(xì)胞以及骨髓中，然而極少見(jiàn)于生長(zhǎng)板的軟骨區(qū)域[43]。體外誘導(dǎo)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化的過(guò)程伴隨著Mettl3在mRNA和蛋白質(zhì)水平表達(dá)的增加，提示m6A可能與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞譜系分化密切相關(guān)[44]。條件性敲除小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞內(nèi)Mettl3基因（Prx1-Cre;Mettl3fl/fl）后，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞內(nèi)m6A的豐度降低，小鼠出現(xiàn)了骨質(zhì)疏松的病理表型（骨量減少，骨質(zhì)變?nèi)跻约肮撬柚窘M織沉積增加）。同時(shí)，Prx1-Cre;Mettl3fl/fl小鼠體內(nèi)破骨細(xì)胞狀態(tài)更為活躍。與前述發(fā)現(xiàn)相符的是，Prx1-Cre;Mettl3fl/fl小鼠生長(zhǎng)板的生長(zhǎng)發(fā)育幾乎不受影響[43]。

體外細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)解釋了這種現(xiàn)象：相比于對(duì)照組小鼠，Prx1-Cre;Mettl3fl/fl小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化受到抑制，成脂向分化則更加活躍。同樣的現(xiàn)象也出現(xiàn)在Lepr-Cre;Mettl3fl/fl小鼠身上，表明Mettl3對(duì)成體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨向分化同樣不可或缺。RNA測(cè)序結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)，Mettl3參與調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的譜系分化：Prx1-Cre;Mettl3fl/fl小鼠體內(nèi)Dlx5、Sp7、Alpl、Bglap等成骨相關(guān)基因表達(dá)受到抑制，而成脂相關(guān)基因Pparg、Plin1、Fabp4的表達(dá)上調(diào)[43]。

Mettl3的過(guò)表達(dá)能在一定程度上緩解雌激素缺乏引起的骨質(zhì)疏松。在絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松模型小鼠的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞內(nèi)敲入Mettl3基因（Prx1-Cre;Mettl3KI/KI），相比于僅行卵巢切除術(shù)的對(duì)照組來(lái)說(shuō)，成骨細(xì)胞數(shù)目增加，骨小梁密度和骨量的減少與骨髓脂肪組織沉積的程度均有所降低。值得注意的是，不同于敲除Mettl3基因，敲入Mettl3基因并未影響破骨細(xì)胞的活性[43]。

上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，METTL3介導(dǎo)的m6A水平上升促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化，抑制了其成脂向分化。對(duì)于具體的分子機(jī)制，不同研究者得出了不同的結(jié)論。

Wu等[43]認(rèn)為，甲狀旁腺素（parathyroid hormone，PTH）/甲狀旁腺素1受體（parathyroid hormone-1 receptor，PTH1R）信號(hào)軸是m6A調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化的重要下游通路。分析發(fā)現(xiàn)，在PTH1R翻譯終止密碼子附近有高富集和特異性的m6A峰，敲除Mettl3不影響Pth1r的轉(zhuǎn)錄，但大大降低了PTH1R的翻譯效率。PTH1R作為PTH的受體，對(duì)于PTH調(diào)節(jié)骨代謝必不可少[45-46]。在正常生理狀態(tài)下，小劑量間歇性的PTH可促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化，并抑制其成脂向分化[47-48]。不同于對(duì)照組，Prx1-Cre;Mettl3fl/fl小鼠對(duì)小劑量間歇性的PTH并不敏感，但這種情況可通過(guò)腺病毒介導(dǎo)的PTH1R過(guò)表達(dá)有所緩解，進(jìn)一步證實(shí)了m6A可通過(guò)影響PTH/PTH1R信號(hào)通路調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分化方向。值得注意的是，過(guò)表達(dá)PTH1R只能部分緩解癥狀，提示甲基轉(zhuǎn)移酶METTL3除了Pth1r外，還可能存在其他的作用靶點(diǎn)[43]。

Tian等[44]認(rèn)為，m6A可通過(guò)調(diào)控磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol-3-kinases，PI3K）/蛋白激酶B（protein-kinase B，PKB/AKT）參與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨向分化。PI3K-AKT通路作為細(xì)胞內(nèi)十分常見(jiàn)的信號(hào)通路，已被廣泛證實(shí)對(duì)于調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞譜系分化、維持骨代謝平衡具有重要意義[49-52]。在利用短發(fā)夾RNA（shorthairpin RNA，shRNA）下調(diào)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞內(nèi)Mettl3表達(dá)后，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化以及礦化潛能受到抑制。利用Kyoto基因與基因組數(shù)據(jù)庫(kù)分析在此過(guò)程中下調(diào)的細(xì)胞通路，結(jié)果顯示與成骨分化最為相關(guān)的為PI3K-AKT通路。蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)顯示，敲除Mettl3之后，AKT的磷酸化程度降低，與RNA測(cè)序結(jié)果一致，進(jìn)一步證實(shí)PI3KAKT信號(hào)軸是Mettl3調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化的重要下游通路。

此外，METTL3可通過(guò)選擇性剪接血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的mRNA，影響VEGF的表達(dá)，從而參與調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化。VEGF作為血管生成最有效的誘導(dǎo)因子之一，通過(guò)促進(jìn)局部微循環(huán)和增加血管密度促進(jìn)骨組織發(fā)育[53-54]。早前研究[55]發(fā)現(xiàn)，Vegfa-164 mRNA和Vegfa-188 mRNA參與調(diào)控間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖、分化。敲除Mettl3可顯著降低Vegfa-164 mRNA和Vegfa-188 mRNA的水平，為m6A選擇性剪接Vegfa mRNA從而參與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化提供新的證據(jù)。

Yao等[52]發(fā)現(xiàn)，METTL3通過(guò)催化Janus激酶（Janus kinase，JAK）1的mRNA形成m6A，隨后讀取蛋白YTHDF2通過(guò)識(shí)別m6A促進(jìn)JAK1降解，下調(diào)JAK1/信號(hào)傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活蛋白（signal transducer and activator of transcription，STAT）5/CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白（CCAAT/enhancerbinding protein，C/EBP）β信號(hào)通路的表達(dá)，從而抑制脂肪形成早期骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成脂向分化。遺憾的是，該通路對(duì)于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化的具體作用還有待進(jìn)一步研究。

2.2 甲基化酶FTO

早期研究[18]發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)TO通過(guò)調(diào)控m6A豐度選擇性剪接成脂調(diào)控因子Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子（Runtrelated transcription factor）1的mRNA，從而在調(diào)節(jié)脂肪生成中發(fā)揮重要作用。研究者[56]通過(guò)分析人與小鼠的血清樣本發(fā)現(xiàn)，相比于年輕和正常組，年長(zhǎng)和骨質(zhì)疏松組的血清中FTO含量更高，m6A的含量更低；同時(shí)，在體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂向分化的過(guò)程中，F(xiàn)TO的含量增加，而成骨向分化的過(guò)程則伴隨著FTO含量的減少，為探究FTO對(duì)于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化的具體影響提供了線索。

Shen等[56]研究發(fā)現(xiàn)，生長(zhǎng)發(fā)育因子（growth differentiation factor，GDF）11-FTO-過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體（peroxisome proliferatoractivated receptor，PPAR）γ信號(hào)軸可以促進(jìn)骨髓間充質(zhì)細(xì)胞的成脂向分化，抑制其成骨向分化。GDF11是屬于TGF-β超家族的一種蛋白質(zhì)，早前的研究[57]表明其能促進(jìn)骨吸收并抑制成骨細(xì)胞分化。體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，GDF11可通過(guò)C/EBPα促進(jìn)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞內(nèi)FTO的表達(dá)，降低RNA m6A的豐度，并且FTO與RNA m6A變化的程度與GDF11的使用劑量呈正比。同時(shí)，GDF11促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂向分化、抑制其成骨向分化作用的正常發(fā)揮有賴于FTO的正常酶活性。之前的研究[19,58]已證明，PPARγ可以促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成脂向分化而抑制其成骨向分化，同時(shí)作為FTO的下游分子介導(dǎo)脂肪前體細(xì)胞的分化。Shen等發(fā)現(xiàn)， PPARγ可作為GDF11-FTO通路的下游分子，對(duì)于GDF11與FTO調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化方向不可或缺。GDF11-FTO通過(guò)結(jié)合并去甲基化修飾PpargmRNA，影響PpargmRNA的翻譯效率，導(dǎo)致后者的表達(dá)增加，從而抑制了骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨向分化。此外，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明，特異性敲除小鼠成骨細(xì)胞內(nèi)Fto可以抑制PPARγ、脂聯(lián)素（adiponectin）的表達(dá)，促進(jìn)Osterix的表達(dá)，并在一定程度上緩解了小鼠的骨量減少的癥狀。

3 展望

隨著近年來(lái)表觀遺傳領(lǐng)域的不斷發(fā)展，表觀遺傳學(xué)修飾調(diào)控干細(xì)胞分化的具體機(jī)制也逐漸成為學(xué)界關(guān)注的熱點(diǎn)。近來(lái)的一些研究發(fā)現(xiàn)，m6A在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化過(guò)程中發(fā)揮了重要的作用，為研究m6A在骨骼健康和疾病中的關(guān)鍵調(diào)控作用提供了一個(gè)新的視角。然而，目前的研究還不足以對(duì)m6A調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞命運(yùn)決定的具體機(jī)制進(jìn)行較為清楚的闡釋。一方面，m6A在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞內(nèi)的具體位點(diǎn)還不夠清楚；另一方面，甲基轉(zhuǎn)移酶、去甲基化修飾酶以及m6A讀取蛋白三者在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化過(guò)程中發(fā)揮的具體作用也有待進(jìn)一步研究。同時(shí)，隨著研究的深入以及相關(guān)檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)步，比如miCLIP技術(shù)的出現(xiàn)，意味著可以定位細(xì)胞內(nèi)mRNA的單個(gè)m6A位點(diǎn) ，有理由相信RNA腺嘌呤6-甲基化修飾調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨向分化的具體機(jī)制將得到更為深入的闡釋，為相關(guān)的基礎(chǔ)研究以及臨床應(yīng)用帶來(lái)重要的啟發(fā)。