李睿文，安 琪，宋夢(mèng)昭，趙興華，張 鐵，陳福星，王建昌，張若曦，李麗敏,4，郭笑然，孫繼國(guó),4，胡 滿,4，袁萬哲,4

(1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，河北 保定 071001;2.河北出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心，河北 石家莊 050051;3.河北省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河北 石家莊 050035;4.河北省獸醫(yī)生物技術(shù)工程技術(shù)研究中心,河北 保定 071001)

布魯氏菌病(簡(jiǎn)稱“布病”)是由布魯氏菌屬細(xì)菌引起的以感染家畜為主的人獸共患傳染病[1]。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為B類動(dòng)物疫病，我國(guó)將其列為二類動(dòng)物疫病。近年來，國(guó)內(nèi)外多個(gè)地區(qū)有人畜感染發(fā)病的報(bào)告[2-3]。為貫徹落實(shí)《國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃(2012—2020年)》，進(jìn)一步做好全國(guó)布病的防治工作，有效控制和凈化布病，農(nóng)業(yè)部、國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委2016年9月7日發(fā)布了“國(guó)家布魯氏菌病防治計(jì)劃(2016—2020年)”，計(jì)劃要求河北、山西、內(nèi)蒙古、遼寧、吉林、黑龍江、陜西、甘肅、青海、寧夏、新疆共11個(gè)省份和新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)2020年達(dá)到并維持控制標(biāo)準(zhǔn)。為了解河北省羊布病免疫和流行情況，有效開展羊布病防治，2018年4—5月，本項(xiàng)目組對(duì)河北省5個(gè)地區(qū)10個(gè)養(yǎng)羊場(chǎng)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查，并采集血液分離血清進(jìn)行檢測(cè)，報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 血清 從河北省保定、衡水、邢臺(tái)、秦皇島、承德5個(gè)地區(qū)10個(gè)養(yǎng)羊場(chǎng)采集羊頸靜脈血液316份，分離血清后置-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試劑 布魯氏菌競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(cELISA)抗體檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所，證書號(hào)：(2016)新獸藥證字6號(hào)。

2 結(jié)果

2.1 不同羊場(chǎng)布病血清學(xué)檢測(cè) 用cELISA方法檢測(cè)的數(shù)據(jù)見表1。10個(gè)羊場(chǎng)均未接種布病疫苗。未接種疫苗羊場(chǎng)布病個(gè)體陽性率17.4%，場(chǎng)群陽性率80%。表明河北省羊群中仍有布病的感染和流行。

表1 不同羊場(chǎng)布病血清學(xué)檢測(cè)

2.2 不同性別羊只布病血清學(xué)檢測(cè) 根據(jù)表2可知，10個(gè)非免疫羊場(chǎng)不同性別羊只布魯氏菌的感染率不同，其中公羊的陽性率為13.3%，母羊的陽性率為20.4%，公羊的感染率低于母羊。

表2 不同性別羊只布病血清學(xué)檢測(cè)

2.3 不同生長(zhǎng)階段羊布病血清學(xué)檢測(cè) 根據(jù)表3可知，10個(gè)非免疫羊場(chǎng)不同生長(zhǎng)階段羊布病感染率不同，其中羔羊的陽性率為10.5%，育成羊的陽性率為14.4%，種羊的陽性率為25.2%。種羊比羔羊、育成羊的陽性率高，而育成羊的陽性率高于羔羊。

表3 不同生長(zhǎng)階段羊布病血清學(xué)檢測(cè)

3 討論

布病是由布魯氏菌所引起的一種人獸共患傳染病。牛、羊、豬最為常發(fā)，且可傳染給人和其他家畜[4]，嚴(yán)重危害畜牧業(yè)生產(chǎn)與人體健康。近年來，我國(guó)多個(gè)地方有人畜感染發(fā)病的報(bào)告。通過本調(diào)查發(fā)現(xiàn)，河北省羊群中仍有布病的感染和流行，其中母羊的感染率略高于公羊，種羊感染率高于羔羊、育成羊。造成布魯氏菌感染和流行的原因有：(1)羊場(chǎng)生物安全防控意識(shí)淡薄。生物安全涵蓋建筑性生物安全措施，即物理性屏障，包括羊場(chǎng)選址、布局、設(shè)施等。也涵蓋觀念性生物安全措施，即制度與計(jì)劃，包括限制人員、全進(jìn)全出、病死羊處理、消毒程序等。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，羊場(chǎng)從業(yè)人員普遍缺乏生物安全意識(shí)，簡(jiǎn)單地認(rèn)為疫病防控主要靠疫苗與藥物，缺乏生物安全防控意識(shí)。主管部門應(yīng)加強(qiáng)宣傳教育與技術(shù)培訓(xùn)，引導(dǎo)羊場(chǎng)逐漸樹立生物安全防控意識(shí)；(2)活羊跨區(qū)調(diào)運(yùn)仍然是疫病發(fā)生的導(dǎo)火索。目前河北省唐縣、盧龍等地已形成專業(yè)羊只育肥，育肥羊大多數(shù)來自省外，免疫與感染背景不清楚，加之長(zhǎng)途運(yùn)輸，到場(chǎng)后發(fā)病情況較多。應(yīng)鼓勵(lì)養(yǎng)羊企業(yè)自繁自養(yǎng)，盡量減少活羊跨區(qū)調(diào)運(yùn)，對(duì)于外調(diào)羊只，應(yīng)該加強(qiáng)檢疫，嚴(yán)查非法調(diào)運(yùn)。同時(shí)獸醫(yī)、屠宰工人、皮毛加工工人、擠奶工等要做好自身的防護(hù)工作，防止高危人群的感染；羊場(chǎng)應(yīng)加強(qiáng)布病檢疫，及時(shí)淘汰陽性羊只；種羊場(chǎng)自繁自養(yǎng)建立布病陰性羊群；高風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)，商品羊可采用布病疫苗進(jìn)行免疫。

目前羊場(chǎng)可使用的疫苗有布魯氏菌病活疫苗(S2株)，該疫苗適于口服免疫，山羊和綿羊無論年齡大小，一律口服活菌100億；亦可作皮下或肌內(nèi)注射，但注射法不能用于孕畜、牛和小尾寒羊，另外注射劑量有差異，其中山羊注射25億、綿羊50億，免疫保護(hù)期均為36個(gè)月。另有研究表明，布病疫苗皮下或肌內(nèi)注射產(chǎn)生的免疫效果優(yōu)于灌服、面團(tuán)口服和飲水?！皣?guó)家布魯氏菌病防治計(jì)劃(2016—2020年)”規(guī)定：在全國(guó)范圍內(nèi)，種畜禁止免疫，實(shí)施監(jiān)測(cè)凈化；奶畜原則上不免疫，實(shí)施檢測(cè)和撲殺為主的措施，另外個(gè)體病原陽性率超過2%的縣，由縣級(jí)獸醫(yī)主管部門提出申請(qǐng)，報(bào)省級(jí)獸醫(yī)主管部門批準(zhǔn)后實(shí)施免疫。一類地區(qū)采取以免疫接種為主的防控策略；二類地區(qū)采取以監(jiān)測(cè)凈化為主的防控策略；三類地區(qū)采取以風(fēng)險(xiǎn)防范為主的防控策略。河北省為一類地區(qū)，按照要求，免疫地區(qū)的家畜應(yīng)免盡免，畜間布病免疫場(chǎng)群全部建立免疫檔案。到2020年，河北省布病達(dá)到并維持控制標(biāo)準(zhǔn)。但應(yīng)注意，河北省內(nèi)擬申報(bào)布病凈化創(chuàng)建場(chǎng)或示范場(chǎng)的養(yǎng)羊場(chǎng)不建議進(jìn)行布病免疫。免疫接種時(shí)間在配種前1～2個(gè) 月進(jìn)行較好(3年免疫1次即可)，3月齡以下羔羊、妊娠母羊和種公羊、有該病的陽性羊(可在免疫前進(jìn)行布病檢疫)，均不能進(jìn)行預(yù)防接種。

本次血清學(xué)調(diào)查采用的是競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(cELISA)，同時(shí)本實(shí)驗(yàn)室也采用虎紅平板凝集試驗(yàn)進(jìn)行了平行試驗(yàn)(數(shù)據(jù)未報(bào)道)，通過數(shù)據(jù)可以看出cELISA比虎紅平板凝集試驗(yàn)靈敏，可能的原因是虎紅平板凝集試驗(yàn)存在假陽性和假陰性，并且是用肉眼直接觀察結(jié)果，誤差較大?；⒓t平板凝集試驗(yàn)出現(xiàn)假陽性，可能是因?yàn)閲?yán)重溶血、抗原抗體反應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng)后出現(xiàn)纖維素的凝集塊；出現(xiàn)假陰性反應(yīng)可能是因?yàn)榭贵w親和力低或者滴度低。但虎紅平板凝集試驗(yàn)快速、便捷，適用于基層快速檢測(cè)，可以做初步篩查，同時(shí)可與其他檢測(cè)方法結(jié)合進(jìn)行結(jié)果判定。