李天元

（景泰縣畜牧獸醫(yī)技術(shù)服務(wù)中心，甘肅 景泰 730400）

黃曲霉毒素（Aflatoxins）主要是黃曲霉和寄生曲霉的代謝產(chǎn)物，黑曲霉、赤曲霉、棒狀曲霉及其他一些曲霉也可以產(chǎn)生，但含量極微。黃曲霉毒素是一組化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的化合物，目前已分離鑒定出12種，包括B1、B2、G1、G2、M1、M2、P1、Q、H1、GM、B2a和毒醇，它們的基本結(jié)構(gòu)為二呋喃環(huán)和香豆素。B1是二氫呋喃氧雜萘鄰?fù)难苌?，含有一個雙呋喃環(huán)和一個氧雜萘鄰?fù)ㄏ愣顾兀?，前者為基本毒性結(jié)構(gòu)，后者與致癌有關(guān)。在目前發(fā)現(xiàn)的黃曲霉毒素中以B1的毒性及致癌性最強(qiáng)。該毒素所引起的中毒病是畜禽常見的一種中毒病，是由于食入被黃曲霉污染的飼料后引起，幼齡動物較為敏感，2～6周齡的雛雞和幼鴨敏感性最高。由于黃曲霉毒素不僅可引起中毒，而且還具有致癌作用，對動物半數(shù)致死量為10 mg/kg，它的毒性比氰化鉀大10倍，比砒霜大68倍。因此，在1993年被世界衛(wèi)生組織（WHO）的癌癥研究機(jī)構(gòu)劃定為Ⅰ類致癌物。國內(nèi)目前有關(guān)黃曲霉菌毒素中毒的詳細(xì)的病理學(xué)資料較為缺乏。本試驗(yàn)以黃曲霉毒素中毒的敏感動物雛雞作為研究對象，從病理學(xué)角度去探討黃曲霉毒素中毒的機(jī)理，為臨床診治本病提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物

選用一周齡的商品肉雞300只，雌雄均有，隨機(jī)分為3組，A組（對照組）100只，B組100只，C組100只，分別在相同情況下網(wǎng)養(yǎng)。

1.2 飼料及飼料處理

1.2.1 飼料 希望肉仔雞全價(jià)配合飼料。

1.2.2 飼料霉變處理 在試驗(yàn)開始前5 d到市場購買希望肉仔雞全價(jià)配合飼料3袋（40 kg/袋），并給3袋飼料編號，分別為1號料，2號料和3號料，待用。

按要求將3袋飼料分別進(jìn)行處理：將1號料置于溫度為20～30℃，濕度為80%左右的環(huán)境下，每隔24 h查看1次，并及時(shí)加水，以保持合適的濕度，至霉變完全后，置于一般環(huán)境中待用。2號料處理方法同上，但霉變程度較之1號輕微，故相對濕度應(yīng)控制在50%左右，待出現(xiàn)輕微霉變即可結(jié)束霉變過程。3號料不做任何處理，于常溫正常保存，待用。

1.2.3 飼喂 將一周齡雛雞先用正常飼料飼喂一周左右，保持正常環(huán)境溫度和濕度，24 h給予光照，且要通風(fēng)良好，觀察并淘汰不健康雞。

A組雞飼喂3號飼料，B組雞飼喂2號飼料，C組雞飼喂以1號飼料，每一組雞都給予相同量的飼料和飲水，適當(dāng)?shù)恼{(diào)節(jié)雞舍內(nèi)的溫度、濕度和光照，并且保證通風(fēng)良好。

1.2.4 取材 在飼喂霉變飼料后，每隔一周剖殺、采樣，每組每次剖殺10只。剖殺后迅速取肝、心、脾等內(nèi)臟器官，于10%中性福爾馬林溶液固定。

1.3 染色與制作切片

樣品經(jīng)10%中性福爾馬林溶液固定后，制作石蠟切片，進(jìn)行蘇木精-伊紅染色，觀察各器官組織病理變化。

2 結(jié)果

2.1 臨床觀察

2.1.1 A組 從適應(yīng)飼養(yǎng)到實(shí)驗(yàn)結(jié)束，對照組雛雞均生長良好，無死亡，臨床無異常表現(xiàn)。

2.1.2 B組 在飼喂飼料14日（28日齡）開始發(fā)病，表現(xiàn)為食欲不減退、精神沉郁、兩肢厥冷、羽毛松亂和縮頭閉目等，35日齡之后慢慢表現(xiàn)排血色稀糞、消瘦、衰弱，但無死亡現(xiàn)象。

2.1.3 C組 在飼喂霉變飼料7 d（21日齡）時(shí)開始發(fā)病，癥狀除上述B組所見外還有眼瞼腫脹、眼鼻流淚、食欲廢絕、后期下痢，最后呼吸困難，衰竭而死。死亡前出現(xiàn)共濟(jì)失調(diào)、角弓反張等癥狀。

2.2 剖檢變化

2.2.1 A組 每次剖檢10只，4次共剖檢雛雞80只，除后期有一例雛雞的腸道有輕微的出血點(diǎn)外，其他各組織器官均正常，無明顯病理變化。

2.2.2 B組 14日齡至21日齡變化不明顯。21日齡后可見肝臟顏色變?yōu)橥咙S色或暗紅色，而且有變性壞死、充血出血等變化，肝臟表面還可見灰白色針尖大小的結(jié)節(jié)狀病灶。腎臟有出血、腫大。心包腔和腹腔有少量黃色積液。小腸尤其十二指腸出血、壞死，后期十二指腸黏膜面彌漫性出血。胸部皮下肌肉蒼白，有時(shí)可見少量出血點(diǎn)。

2.2.3 C組 17日齡之后可見肝臟腫大，色澤變淡或呈暗紅色，有出血斑點(diǎn)。腸道出血明顯，其中十二指腸黏膜面有大量出血斑點(diǎn)，盲腸腫大，偶見少量出血。腎臟腫大、充血，質(zhì)地變脆。心包腔和腹腔有積液，胰腺也可見灰白色針尖大小的病灶。大腿皮下和肌肉常見出血。后期脾臟充血腫大。

2.3 病理組織學(xué)變化

2.3.1 A組 心臟、肝臟、脾臟、腸道、腎臟和肺臟未見任何病理變化。

2.3.2 B組 肝細(xì)胞脂肪變性，有明顯的肝竇擴(kuò)張、淤血，肝細(xì)胞彌漫性壞死。有些在肝小葉中央靜脈周圍有大片的壞死病灶，并伴有明顯的膽管增生。小腸絨毛變性、壞死、脫落。心肌纖維變性、腫脹、壞死，并有炎性細(xì)胞浸潤。脾臟淋巴濾泡增生。肺和氣囊，呈彌漫性或局限性病理組織學(xué)變化。

2.3.3 C組 肝細(xì)胞廣泛脂肪變性，在變性細(xì)胞胞漿內(nèi)可見大小不等的圓形脂肪空泡，胞核被擠壓在細(xì)胞的一側(cè)。變性肝細(xì)胞腫大、胞漿渾濁。膽管變性、增生。肝小葉中央的肝細(xì)胞出現(xiàn)局灶性壞死，門管區(qū)小葉間靜脈周圍有大量異嗜細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤。心肌細(xì)胞變性腫脹，心外膜下有局灶性炎性細(xì)胞浸潤。脾臟淋巴濾泡增生。部分腸道充血出血，黏膜上皮脫落，固有層下可見大量的紅細(xì)胞。胰臟有炎性細(xì)胞浸潤，有的纖維化。

3 討論

模型復(fù)制過程是試驗(yàn)的關(guān)鍵點(diǎn)，在臨床上主要是因食入霉變的飼料而發(fā)病，而霉變飼料中可能含有多種霉菌或霉菌毒素，但有致病作用和含量較多的還是黃曲霉毒素。本試驗(yàn)盡可能模仿飼料的自然霉變過程，由于溫度和濕度的差異，處理后的飼料中可能會有多種致病因素引起雛雞發(fā)病，但在飼料的處理過程中都參照黃曲霉的最佳生長環(huán)境，因此在該試驗(yàn)中基本都?xì)w結(jié)為黃曲霉毒素引起的致病作用。

黃曲霉毒素的靶器官為肝臟，一旦發(fā)生中毒，其病變常表現(xiàn)在肝臟的損傷上，影響肝功能，導(dǎo)致肝細(xì)胞變性、壞死、出血、膽管和肝細(xì)胞增生，引起腹水、脾腫大、體質(zhì)衰竭等病癥。其他器官雖不同程度的發(fā)生病理變化，但均非該病的特征變化。

黃曲霉毒素中毒常引起雛雞造血機(jī)能及免疫系統(tǒng)的破壞，導(dǎo)致貧血，免疫力下降，極易誘發(fā)細(xì)菌及病毒的繼發(fā)感染。試驗(yàn)中病理組雛雞到后期個別表現(xiàn)其他一些病癥，如雞白痢，尿酸鹽結(jié)晶在泄殖腔沉著等并發(fā)癥。

黃曲霉菌廣泛分布于自然界，常寄生于玉米、小麥、花生、稻米、豆類、棉籽、魚粉、麩皮、米糠等飼料中，禽類很容易因采食被黃曲霉菌污染的變質(zhì)飼料而發(fā)生中毒。因此，在養(yǎng)殖中應(yīng)高度重視黃曲霉毒素的危害，做到預(yù)防為主，尤其對飼料應(yīng)加強(qiáng)保存與檢測。本試驗(yàn)主要研究雛雞中毒后的病理學(xué)變化，取得了關(guān)于雛雞中毒后病理解剖和病理組織學(xué)變化的第一手資料，為進(jìn)一步研究黃曲霉毒素中毒機(jī)理和提出禽類毒素中毒的防治措施提供參考。