王 遠(yuǎn)， 高宏偉， 馮高潔， 代 佩， 張秦風(fēng)， 白 瑞， 秦衛(wèi)偉， 李 虹， 高 奮

(山西醫(yī)科大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院， 山西 太原 030001)

脂蛋白代謝異常是動脈粥樣硬化的重要危險因素。低密度脂蛋白(low-density lipoprotein，LDL)水平與冠心病發(fā)病呈正相關(guān)，而高密度脂蛋白(high-density lipoprotein，HDL)通過膽固醇逆轉(zhuǎn)運、抗凋亡和抗炎等機制發(fā)揮抗動脈粥樣硬化作用[1]。然而多個臨床研究(ILLUMINATE、dal-OUTCOMES、AIM-HIGH和HPS2-THRIVE)卻表明應(yīng)用膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑雖然可顯著升高HDL水平，但心血管事件和死亡風(fēng)險非但沒有下降，反而明顯增加[2]，提示單純升高HDL水平并不能發(fā)揮HDL的抗動脈硬化效應(yīng)。HDL是由載脂蛋白與脂質(zhì)組成的大顆粒分子，功能上具有高度的異質(zhì)性。已有研究證實，在糖尿病[3]、代謝綜合征、感染[4]、系統(tǒng)性紅斑狼瘡以及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎[5]等炎癥性疾病時，功能正常的HDL向“失功能HDL”轉(zhuǎn)變，其抗動脈粥樣硬化能力下降并具有促動脈硬化作用[6-7]。然而，在冠心病條件下，HDL的功能改變?nèi)绾?，尚缺乏文獻(xiàn)報道。本研究將通過提取健康(healthy)人群、穩(wěn)定型冠心病(stable coronary artery disease, SCAD)和急性心肌梗死(acute myocardial infarction, AMI) 3類人群的HDL，體外觀察不同人群HDL對巨噬細(xì)胞脂質(zhì)沉積、膽固醇轉(zhuǎn)運蛋白表達(dá)及細(xì)胞凋亡的影響。

材 料 和 方 法

1 人群資料

選擇2018年1月～2018年6月山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院心內(nèi)科住院患者200例，其中男性112例，女性88例，年齡48～72歲，根據(jù)冠脈造影結(jié)果分為冠脈正常對照組65例、穩(wěn)定型冠心病組68例和急性心肌梗死組67例。記錄各組一般資料并進(jìn)行生化檢驗，包括性別、年齡、體重、收縮壓(systolic blood pressure，SBP)、舒張壓(diastolic blood pressure，DBP)、吸煙史、空腹血糖(fasting glucose，F(xiàn)G)、甘油三酯(triglyceride，TG)、低密度脂蛋白膽固醇(low-density lipoprotein chesterol，LDL-C)和高密度脂蛋白膽固醇(high-density lipoprotein chesterol, HDL-C)。所有患者均簽署知情同意書，如未取得知情同意，退出本研究。本研究獲得山西醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院倫理委員會的批準(zhǔn)，整個實驗階段嚴(yán)格執(zhí)行醫(yī)學(xué)倫理委員會規(guī)章制度。入選患者均排除內(nèi)分泌疾病、嚴(yán)重肝腎功能異常、嚴(yán)重感染、重度貧血、心臟瓣膜病和腫瘤等疾病。

穩(wěn)定型冠心病的診斷依據(jù)2007版《慢性穩(wěn)定型心絞痛診斷及治療指南》，慢性穩(wěn)定型心絞痛指心絞痛發(fā)作的程度、頻率、性質(zhì)及誘發(fā)因素在數(shù)周內(nèi)無顯著變化的患者，通常見于冠狀動脈至少一支主要分支管腔直徑狹窄在50%以上，當(dāng)體力或精神應(yīng)激時，冠狀動脈血流不能滿足心肌代謝的需要，導(dǎo)致心肌缺血，而引起的心絞痛發(fā)作，休息或含服硝酸甘油可緩解的患者。

急性心肌梗死的診斷依據(jù)2012年ESC《第3版心肌梗死全球定義》，AMI的診斷標(biāo)準(zhǔn)為檢測到心臟生物標(biāo)志物心肌肌鈣蛋白I(cardiac troponin I，cTnI)上升和(或)下降超過健康人群參考值上限(upper reference limit，URL)第99百分位，且符合下列條件中的至少1項：(1)有缺血癥狀；(2)新出現(xiàn)或很可能新出現(xiàn)ST段顯著抬高或T波改變，或新出現(xiàn)左束支傳導(dǎo)阻滯；(3)心電圖出現(xiàn)病理性Q波；(4)有新出現(xiàn)的存活心肌損失或新出現(xiàn)局部室壁運動異常的影像學(xué)證據(jù)；(5)血管造影或尸檢發(fā)現(xiàn)冠狀動脈內(nèi)血栓。入選患者除滿足上述條件外，均滿足發(fā)病24 h內(nèi)，行急診冠狀動脈造影檢查并證實存在單支或多支血管急性閉塞或伴急性血栓形成。

健康對照組無典型缺血性胸痛，心電圖大致正常，經(jīng)冠狀動脈造影證實冠狀動脈無斑塊及狹窄。

2 實驗動物

6～8周齡雄性C57/BL6J小鼠，18～20 g，由山西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，許可證號為SXXK (晉) 2015-0001。

3 主要試劑

氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein，ox-LDL)購自上海昂羽生物技術(shù)有限公司；巰基乙酸鈉(BD)；抗ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白A1(ATP-binding cassette transporter A1，ABCA1)、ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白G1(ATP-binding cassette transporter G1，ABCG1)、Bax和Bcl-2抗體均購自于Abcam；抗GAPDH抗體(BioWorld);抗β-actin抗體、goat anti-mouse IgG、goat anti-rabbit IgG、RPMI-1640培養(yǎng)基、BCA蛋白濃度測定試劑盒、超敏化學(xué)發(fā)光試劑和RIPA裂解緩沖液(博士德生物科技有限公司)；0.25%胰蛋白酶、青鏈霉素混合液和飽和油紅O染色液(Solarbio)；活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)測試盒(南京建成生物工程研究所)；SDS-PAGE凝膠配制試劑盒和細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Beyotime)；ACK紅細(xì)胞裂解液(北京諾博萊德科技有限公司)。

4 主要方法

4.1HDL的提取及鑒定 利用溴化鉀(KBr)將收集好的新鮮血漿密度調(diào)整為1.24×103g/L， 加入含密度為1.063×103g/L的KBr溶液的離心管底部，配平后，65 000 r/min離心320 min。血漿經(jīng)超速離心后大致分3層：最上層為TG、極低密度脂蛋白(very-low-density lipoprotein, VLDL)和LDL，中間層為HDL，底層為無脂血漿。采用腰穿針將中層HDL吸出后，通過PD-10脫鹽柱透析。透析后的HDL冷凍成固態(tài)后置入冷凍離心干燥機凍干，約12 h后可形成HDL粉末。HDL粉末溶于去離子水后采用BCA法測定蛋白濃度，本研究中1.5 mL血漿提出的HDL粉末溶于250 μL去離子水后所測的蛋白濃度約為2 g/L。采用SDS-PAGE法鑒定HDL純度。

4.2小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的提取、培養(yǎng)及鑒定 將巰基乙酸鈉與去離子水配制成2%巰基乙酸鈉溶液，121℃滅菌，4 ℃保存?zhèn)溆谩?周齡C57/BL6J小鼠予腹腔注射2 mL 2%巰基乙酸鈉溶液，刺激72 h。頸椎脫臼處死，乙醇浸泡3 min，剪開皮膚，充分暴露腹膜，腹腔內(nèi)注射10 mL預(yù)冷PBS，輕柔5 min，用注射器抽取腹腔灌洗液至15 mL離心管中，800 r/min離心5 min，棄上清，加入1 mL ACK裂解液裂解3～5 min。離心后20% FBS RPMI-1640培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，置于37 ℃孵箱內(nèi)，4 h后PBS沖洗未貼壁細(xì)胞，貼壁細(xì)胞為純度較高的原代巨噬細(xì)胞。采用F4/80抗體進(jìn)行標(biāo)記，熒光顯微鏡鑒定巨噬細(xì)胞純度。

4.3實驗分組及干預(yù) 提取的巨噬細(xì)胞按每孔1×106個接種于6孔板內(nèi)，實驗分組如下：(1)對照(control)組：無干預(yù)措施；(2)ox-LDL組：50 mg/L ox-LDL干預(yù)24 h；(3)ox-LDL+HDLhealthy組：50 mg/L ox-LDL及50 mg/L HDLhealthy聯(lián)合培養(yǎng)24 h；(4)ox-LDL+HDLSCAD組：50 mg/L ox-LDL及50 mg/L HDLSCAD聯(lián)合培養(yǎng)24 h；(5)ox-LDL+HDLAMI組：50 mg/L ox-LDL及50 mg/L HDLAMI聯(lián)合培養(yǎng)24 h。

4.4巨噬細(xì)胞油紅O染色 飽和油紅O原液與去離子水按3∶2體積比配制油紅O工作液，混勻，室溫放置5～10 min，過濾后備用。染色步驟：(1)吸棄各實驗組培養(yǎng)液，PBS漂洗3次；(2)4%多聚甲醛固定30 min，蒸餾水浸洗后60%異丙醇浸洗1 min；(3)油紅O工作液染色30 min；(4)60%異丙醇漂洗20 s；(5)蒸餾水洗；(6)甘油明膠封片；(7)倒置顯微鏡觀察脂質(zhì)染色結(jié)果，采集圖像。

4.5Western blot實驗 提取各組細(xì)胞總蛋白，以BCA試劑盒測蛋白濃度。取100 μg樣品蛋白于沸水1 min變性，取20 μg蛋白樣本用SDS-PAGE分離，電泳完畢后半干轉(zhuǎn)至PVDF膜上，5%脫脂奶粉TBST封閉2 h，分別加入稀釋好的 I 抗(抗β-actin、ABCA1、ABCG1、Bax和Bcl-2抗體，均按1∶1 000稀釋)，4 ℃搖床低速過夜。TBST充分洗滌后加入相應(yīng)稀釋 II 抗室溫輕搖2 h，TBST再次充分洗滌。ECL法顯影，分析條帶灰度值，以β-actin為參照，用待測蛋白灰度值與內(nèi)參的比值來表示蛋白表達(dá)水平。

4.6巨噬細(xì)胞內(nèi)ROS含量的測定 采用ROS測試盒各組細(xì)胞ROS的含量。DCFH-DA原液與PBS按1 ∶1 000配制成工作液。干預(yù)結(jié)束時，吸棄培養(yǎng)液，用PBS漂洗3次，各取1 mL 工作液加入各實驗組，37 ℃，避光孵育1 h，熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞內(nèi)ROS的含量，采集圖像。

4.7巨噬細(xì)胞凋亡率的檢測 用annexin V/PI法檢測巨噬細(xì)胞凋亡率，操作按試劑盒說明進(jìn)行。

5 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計處理及分析，計量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示。人群資料數(shù)據(jù)分析前均進(jìn)行正態(tài)性及方差齊性檢驗，多組間比較采用單因素方差分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

1 不同人群臨床數(shù)據(jù)的比較

入選穩(wěn)定型冠心病患者68例、急性心肌梗死67例及年齡、性別匹配的冠狀動脈造影正常者65例。各組間體重指數(shù)(body mass index，BMI)、SBP、DBP、FG和TG水平的差異無統(tǒng)計學(xué)顯著性；與對照組比較，SCAD組及AMI組LDL-C和HDL-C的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 不同人群臨床資料比較

BMI: body mass index; SBP: systolic blood pressure; DBP: diastolic blood pressure; FG: fasting glucose; TG: triglyceride; LDL-C: low-density lipoprotein chesterol; HDL-C: high-density lipoprotein chesterol; SCAD: stable coronary artery disease; AMI: acute myocardium infarction.

2 血漿HDL的分離及鑒定

血漿經(jīng)超速離心后大致分3層：最上層為TG、VLDL和LDL，中間層為HDL，底層為無脂血漿，見圖1A。采用SDS-PAGE鑒定HDL純度，由于HDL中主要成分為ApoA-I，在30 kD處可見蛋白富集，與血漿樣本比較，白蛋白(分子量約72 kD)被大量去除，見圖1B。

Figure 1. Isolation and identification of HDL from different subjects. A: different fractions of plasma after sequential ultracentrifugation; B: SDS-PAGE of HDL and plasma. Lane 1: HDL from healthy subjects; Lane 2: HDL from patients with stable coronary artery disease; Lane 3: HDL from patients with acute myocardium infarction.

圖1 不同人群HDL的提取及鑒定結(jié)果

3 小鼠腹腔來源巨噬細(xì)胞鑒定

光鏡下巨噬細(xì)胞呈圓形、橢圓形、三角形或不規(guī)則形，有偽足和突起。熒光顯微鏡下巨噬細(xì)胞特異性標(biāo)志F4/80呈紅色熒光，DAPI染核，可確定巨噬細(xì)胞純度達(dá)95%以上，見圖2。

Figure 2. Identification of mouse peritoneal macrophages by F4/80 (×40).

圖2 小鼠腹腔來源巨噬細(xì)胞的鑒定結(jié)果

4 油紅O染色觀察細(xì)胞內(nèi)脂滴含量

與對照組相比，經(jīng)ox-LDL單獨或聯(lián)合HDL處理后巨噬細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積明顯增加(P<0.05)；與ox-LDL單獨處理相比，聯(lián)合HDLhealthy處理后巨噬細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積減少，而聯(lián)合HDLSCAD或HDLAMI處理后巨噬細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積增加(P<0.05)；與HDLSCAD組相比，HDLAMI組巨噬細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積進(jìn)一步增加(P<0.05)，見圖3。

Figure 3. Intracellular lipid deposition in mouse peritoneal macrophages. The levels of intracellular lipids were determined by oil red O staining (×200). A: control group； B：ox-LDL group; C: ox-LDL+HDLhealthygroup; D: ox-LDL+HDLSCADgroup; E: ox-LDL+HDLAMIgroup. Mean±SD.n=3.*P<0.05vsA;#P<0.05vsB;&P<0.05vsD.

圖3 用油紅O染色法測定小鼠腹腔巨噬細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積

5 不同來源HDL對泡沫細(xì)胞內(nèi)ROS表達(dá)的影響

與對照組相比，經(jīng)ox-LDL單獨或聯(lián)合HDL處理后巨噬細(xì)胞內(nèi)ROS的含量明顯增加；與ox-LDL單獨處理相比，聯(lián)合HDLhealthy處理后巨噬細(xì)胞內(nèi)ROS的生成減少，而聯(lián)合HDLSCAD或HDLAMI處理后巨噬細(xì)胞內(nèi)ROS的水平反而增加(P<0.05)；與HDLSCAD組相比，HDLAMI組巨噬細(xì)胞內(nèi)ROS的水平進(jìn)一步增加(P<0.05)，見圖4。

6 不同來源HDL對泡沫細(xì)胞ABCA1和ABCG1表達(dá)的影響

與對照組相比，經(jīng)ox-LDL單獨處理或聯(lián)合HDL處理后巨噬細(xì)胞內(nèi)ABCA1和ABCG1的表達(dá)上調(diào)(P<0.05)；與單純ox-LDL處理組相比，HDLhealthy處理后巨噬細(xì)胞內(nèi)ABCA1和ABCG1的表達(dá)進(jìn)一步增加(P<0.05)，而聯(lián)合HDLSCAD或HDLAMI處理后巨噬細(xì)胞內(nèi)ABCA1和ABCG1的表達(dá)反而下調(diào)(P<0.05)；與HDLSCAD組比較，HDLAMI組ABCA1和ABCG1的表達(dá)進(jìn)一步下調(diào)(P<0.05)，見圖5。

7 不同來源HDL對巨噬細(xì)胞凋亡的影響

與對照組相比，ox-LDL處理后巨噬細(xì)胞凋亡增加；與ox-LDL處理組比較，HDLhealthy可抑制巨噬細(xì)胞細(xì)胞凋亡，而HDLSCAD或HDLAMI處理后巨噬細(xì)胞凋亡反而增加;與HDLSCAD處理組比較，HDLAMI處理組巨噬細(xì)胞凋亡率進(jìn)一步升高(P<0.05)，見圖6。

Figure 4. Intracellular ROS levels were measured by DCF analysis under fluorescence microscope (×200). A: control group; B: ox-LDL group; C: ox-LDL+HDLhealthygroup; D: ox-LDL+HDLSCADgroup; E: ox-LDL+HDLAMIgroup. Mean±SD.n=3.*P<0.05vsA;#P<0.05vsB;&P<0.05vsD.

圖4 熒光DCF法測定巨噬細(xì)胞內(nèi)ROS結(jié)果

Figure 5. The protein expression of ABCA1 and ABCG1 in the mouse peritoneal macrophages was determined by Western blot. A: control group; B: ox-LDL group; C: ox-LDL+HDLhealthygroup; D: ox-LDL+HDLSCADgroup; E: ox-LDL+HDLAMIgroup. Mean±SD.n=3.*P<0.05vsA;#P<0.05vsB;&P<0.05vsD.

圖5 Western blot法檢測小鼠腹腔巨噬細(xì)胞ABCA1和ABCG1蛋白的表達(dá)

8 不同來源HDL對巨噬細(xì)胞Bcl-2和Bax表達(dá)的影響

與對照組相比，ox-LDL處理巨噬細(xì)胞后Bcl-2表達(dá)下調(diào)，Bax表達(dá)上調(diào)(P<0.05)；與單純ox-LDL處理組比較，HDLhealthy處理后Bcl-2表達(dá)上調(diào)，Bax表達(dá)下調(diào)(P<0.05)，而經(jīng)HDLSCAD或HDLAMI處理后Bcl-2表達(dá)下調(diào)，Bax表達(dá)上調(diào)(P<0.05)；與HDLSCAD處理組比較，HDLAMI處理后Bcl-2表達(dá)下調(diào)，Bax表達(dá)上調(diào)(P<0.05)，見圖7。

討 論

脂代謝異常與動脈粥樣硬化發(fā)病密切相關(guān)。LDL尤其是ox-LDL是巨噬細(xì)胞泡沫化的重要誘導(dǎo)劑。細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過度沉積形成氧化固醇，后者可激活核肝X受體α和β上調(diào)ABCA1和ABCG1表達(dá)[8]。HDL是膽固醇從細(xì)胞內(nèi)流出必不可少的受體。新生的HDL顆粒在ABCA1的介導(dǎo)下從外周細(xì)胞攝取游離膽固醇，進(jìn)而進(jìn)一步酯化形成球形HDL顆粒(α-HDL)，α-HDL在ABCG1的介導(dǎo)進(jìn)一步獲取游離膽固醇，將膽固醇從巨噬細(xì)胞內(nèi)移出發(fā)揮抗動脈粥樣硬化作用[9]。本研究也發(fā)現(xiàn)巨噬細(xì)胞吞噬ox-LDL后脂質(zhì)沉積增加，ABCA1和ABCG1表達(dá)上調(diào)，而來源于健康人群的HDL(HDLhealthy)可進(jìn)一步上調(diào)ABCA1和ABCG1表達(dá)，從而減輕泡沫細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積。

在慢性炎癥性疾病如糖尿病、代謝綜合征、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎及慢性腎臟疾病時，HDL發(fā)生“失功能”改變?！笆Чδ蹾DL”表現(xiàn)為HDL顆粒成分及結(jié)構(gòu)發(fā)生改變[10]。前期我們對337例患者(190例經(jīng)冠狀動脈造影證實為冠心病，127例冠狀動脈造影正常)的HDL亞組及ApoA-I含量進(jìn)行分析，證實冠心病患者HDL成熟障礙，大顆粒HDL比例降低，小顆粒HDL比例增加，大顆粒HDL下降水平與ApoA-I水平呈正相關(guān)[11]。蛋白組學(xué)分析提示失功能HDL顆粒內(nèi)ApoA-I含量減少，SAA和MPO含量增加[12]。動物實驗也已證明SAA和MPO可抑制膽固醇逆轉(zhuǎn)運誘導(dǎo)脂質(zhì)沉積增加[13]，這表明，失功能HDL的成分改變可抑制正常的膽固醇逆轉(zhuǎn)運功能。本研究中我們進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)與HDLhealthy處理相比，來源于冠心病患者的HDL(HDLCAD)反而導(dǎo)致巨噬細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積增加，并下調(diào)ABCA1和ABCG1表達(dá)，提示冠心病患者來源的HDL損害了正常的膽固醇逆轉(zhuǎn)運功能，引起巨噬細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積，但其分子機制尚不明確。

Figure 6. The apoptotic rate of the macrophages was analyzed by flow cytometry with annexin V/PI staining. A: control group; B: ox-LDL group; C: ox-LDL+HDLhealthygroup; D: ox-LDL+HDLSCADgroup; E: ox-LDL+HDLAMIgroup. Mean±SD.n=3.*P<0.05vsA;#P<0.05vsB;&P<0.05vsD.

圖6 Annexin V/PI法檢測巨噬細(xì)胞的凋亡

Figure 7. The protein expression of Bcl-2 and Bax in mouse peritoneal macrophages was determined by Western blot. A: control group; B: ox-LDL group; C: ox-LDL+HDLhealthygroup; D:ox-LDL+HDLSCADgroup; E: ox-LDL+HDLAMIgroup. Mean±SD.n=3.*P<0.05vsA;#P<0.05vsB;&P<0.05vsD.

圖7 Western blot法檢測小鼠腹腔巨噬細(xì)胞Bcl-2和Bax蛋白的表達(dá)

HDL的氧化修飾是HDL失功能改變的重要機制。冠心病患者體內(nèi)氧化修飾高密度脂蛋白(ox-HDL)水平升高，且ox-HDL水平與冠狀動脈狹窄程度呈正相關(guān)[14]。而HDL經(jīng)過氧化修飾后其改善內(nèi)皮功能和抗內(nèi)皮凋亡能力減弱[15]，具有促動脈粥樣硬化效應(yīng)。HDL經(jīng)氧化修飾后產(chǎn)生抗原特異性表位，同ox-LDL一樣也容易被巨噬細(xì)胞吞噬。本研究中我們發(fā)現(xiàn)HDLhealthy可抑制泡沫細(xì)胞內(nèi)活性氧生成，而經(jīng)HDLCAD處理后泡沫細(xì)胞內(nèi)活性氧生成進(jìn)一步增加，推測與泡沫細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積密切相關(guān)。將HDLCAD尾靜脈注射至ApoE-/-小鼠體內(nèi)，可誘導(dǎo)斑塊進(jìn)展加速，并且HDLCAD可促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白tBid的表達(dá)增加[16]。我們的研究也發(fā)現(xiàn)HDLhealthy可減輕ox-LDL誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞凋亡，提示健康人的HDL具有抗凋亡作用，而經(jīng)HDLCAD處理后巨噬細(xì)胞凋亡比例升高，凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2和bax表達(dá)失衡，提示HDLCAD喪失了正常的抗動脈粥樣硬化功能，具有促動脈硬化作用。

本研究中我們首次發(fā)現(xiàn)HDLCAD可促進(jìn)泡沫細(xì)胞脂質(zhì)沉積，并下調(diào)ABCA1和ABCG1表達(dá)，推測與HDLCAD誘導(dǎo)活性氧生成及促進(jìn)巨噬細(xì)胞凋亡相關(guān)。但其詳細(xì)分子機制仍需進(jìn)一步探討，這也為HDL功能恢復(fù)研究提供了潛在的治療靶點。