杜春梅 林杰

小兒呼吸道感染分為細(xì)菌性、病毒性、真菌性及支原體感染，如何及時地進(jìn)行鑒別診斷、早期進(jìn)行對癥干預(yù)治療，是提高治療成功率和縮短住院時間的關(guān)鍵之一。痰培養(yǎng)檢查作為診斷金標(biāo)準(zhǔn)檢測耗時較長且陽性率低，因此尋找一種快捷、有效的方法進(jìn)行呼吸道細(xì)菌感染診斷及鑒別診斷非常有意義。Linder等[1]認(rèn)為肝素結(jié)合蛋白（heparin-binding protein，HBP）可以作為局部細(xì)菌感染乃至嚴(yán)重感染一種早期診斷的標(biāo)志物。陳霆等[2]認(rèn)為降鈣素原（PCT）在小兒感染性疾病患兒血清中會異常表達(dá)。本研究旨在探討HBP及PCT在小兒呼吸道細(xì)菌感染診斷及鑒別診斷中的價值，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

資料與方法

1 一般資料 選取2016年1月～2018年6月我院收治的小兒呼吸道感染患者作為研究對象，分組依據(jù)2013年出版的《呼吸疾病診療指南》第3版[3]進(jìn)行篩選。細(xì)菌感染病例45例，其中男29例，女16例，年齡1～13歲，平均年齡6.4歲。痰細(xì)菌培養(yǎng)顯示：肺炎鏈球菌13株，流感嗜血桿菌9株，肺炎克雷伯菌10株，金黃色葡萄球菌8株，產(chǎn)氣腸桿菌2株，大腸埃希菌2株，銅綠假單胞菌1株。呼吸道非細(xì)菌感染患兒39例，其中男22例，女17例，年齡1～12歲，平均年齡7.2歲，該組患兒痰細(xì)菌培養(yǎng)均為陰性，其中24例為病毒感染，15例為支原體感染。選取同期入院的非感染性疾病患兒40例為對照組，其中男18例，女22例，年齡1～13歲，平均年齡6.9歲，入院常規(guī)胸片、血常規(guī)、肺部聽診無異常。三組患兒在性別、年齡分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

2 方法 所有采血操作均于患兒入院24 h內(nèi)完成，每位患兒采集空腹靜脈血5 mL并分作兩份，自然抗凝后以3 500 r/min離心5 min，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定血清中PCT 水平，檢測試劑盒購自上海撫生實(shí)業(yè)有限公司；另一份取血漿采用雙位點(diǎn)夾心酶聯(lián)免疫吸附法測定樣品中的HBP水平，試劑盒購自杭州中翰盛泰生物技術(shù)股份有限公司，具體檢測步驟均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 16.0軟件進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。采用受試者工作特征曲線（ROC）判斷各指標(biāo)診斷呼吸道細(xì)菌感染的靈敏度和特異度。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 3組患兒HBP及PCT水平比較 呼吸道細(xì)菌感染組患兒HBP及PCT水平明顯高于非細(xì)菌感染組和非感染組（P＜0.05，表1）。非細(xì)菌感染組患兒HBP及PCT水平明顯高于非感染組（P＜0.05，表1）。

表1 3組患兒HBP及PCT水平的比較

2 HBP和PCT在診斷小兒呼吸道細(xì)菌感染的價值 將呼吸道細(xì)菌感染組設(shè)為正類，非細(xì)菌感染組及非感染組分別設(shè)為負(fù)類，建立ROC曲線分析HBP及PCT診斷呼吸道細(xì)菌感染的效能，計(jì)算曲線下面積(area under the curve，AUC）。結(jié)果顯示HBP和PCT診斷小兒呼吸道細(xì)菌感染疾病ROC曲線下面積分別為0.884和0.706（P＜0.05）；HBP截?cái)嘀禐?3.78 ng/mL 時，其診斷靈敏度和特異度分別為87.46% 和94.42%； PCT截?cái)嘀禐?.13 ng/mL 時，其診斷靈敏度和特異度分別為71.23% 和85.69% ；HBP和PCT聯(lián)合診斷小兒呼吸道細(xì)菌感染的靈敏度和特異度分別為92.67%和94.42%。

討 論

小兒作為特殊的群體其免疫系統(tǒng)發(fā)育尚不完善，細(xì)菌是小兒呼吸系統(tǒng)感染的主要病原體，感染后病情變化快、惡化度高，若無法及時針對性治療易導(dǎo)致哮喘、心肌炎、感染性休克甚至危及生命可能[4]。痰培養(yǎng)雖然臨床檢驗(yàn)特異性高但標(biāo)本的取樣合格率及檢測陽性率較低且檢測周期長，無法及時指導(dǎo)臨床藥物使用[5]；因此如何進(jìn)行早期診斷及鑒別診斷對改善呼吸道細(xì)菌感染的愈后尤其重要，臨床亟需早期的感染指標(biāo)來檢測患兒是否有細(xì)菌感染指征以指導(dǎo)抗生素的使用。

肝素結(jié)合蛋白（HBP）又被稱為azurocidin 或者CAP37，其作為胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶家族的成員存儲在嗜中性粒細(xì)胞中[6]。機(jī)體炎癥反應(yīng)時中性粒細(xì)胞被激活并釋放HBP入血，通過誘導(dǎo)血管滲漏、趨化及活化單核細(xì)胞來參與炎癥反應(yīng)[7]。Soehnlein等[8]認(rèn)為肝素結(jié)合蛋白具有廣泛的抗微生物活性可以通過參與直接調(diào)理作用來協(xié)助機(jī)體清除細(xì)菌。吳苑等[9]認(rèn)為肝素結(jié)合蛋白在感染初期就會出現(xiàn)，繼而參與整個炎癥反應(yīng)的發(fā)展及維持過程，可應(yīng)用于細(xì)菌性感染疾病的早期診斷。

降鈣素原（PCT）是一種由116個氨基酸組成、相對分子質(zhì)量為12.7×103的糖蛋白，是降鈣素I基因的表達(dá)產(chǎn)物[10，11]。正常人血液內(nèi)PCT含量＜0.1 ng/mL，機(jī)體感染病原微生物后能夠誘導(dǎo)I基因表達(dá)上調(diào)增加血清PCT 水平，能夠反映機(jī)體病情程，是機(jī)體嚴(yán)重細(xì)菌性炎癥、真菌感染的可靠指標(biāo)[4，12]。喬維洲等[13]認(rèn)為PCT在細(xì)菌感染性疾病中明顯升高，其特異性和敏感性均高于WBC、CRP等，是診斷及鑒別細(xì)菌感染的可靠指標(biāo)。

本研究數(shù)據(jù)顯示呼吸道細(xì)菌感染患兒血液中HBP及PCT的表達(dá)明顯高于非細(xì)菌感染及非感染組。這與吳苑等[9]的研究結(jié)果相類似，提示HBP及PCT在小兒呼吸道細(xì)菌感染診斷中具有較好的敏感性及特異性，能區(qū)別于呼吸道病毒或支原體感染。另外我們通過對ROC曲線下面積進(jìn)行分析，結(jié)果顯示采用HBP閾值＞13.78 ng/mL 時，其診斷靈敏度和特異度分別為87.46% 和94.42%，靈敏度及特異度均高于血清PCT。而聯(lián)合HBP及PCT診斷小兒呼吸道細(xì)菌感染疾病時診斷的靈敏度由87.46%提高到92.67%，提示我們聯(lián)合HBP及PCT診斷呼吸道細(xì)菌感染右更好的靈敏度及準(zhǔn)確率。

綜上所述，結(jié)合HBP及PCT能夠快速有效地輔助診斷呼吸道細(xì)菌感染[14,15]，其綜合診斷價值優(yōu)于單獨(dú)使用HBP及PCT等常用手段，可作為抗生素選擇以及鑒別診斷的檢驗(yàn)指標(biāo)[16]。但本研究未排除患兒發(fā)病時間、病程及病情對結(jié)果造成的影響，仍需通過擴(kuò)大樣本量進(jìn)行多中心臨床試驗(yàn)來驗(yàn)證其對呼吸道細(xì)菌感染的診斷效率。