(1山東醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，山東 臨沂276000；2魯南制藥集團股份有限公司新藥安評中心)

痔瘡臨床常見，其癥狀主要表現(xiàn)為炎性疼痛、出血。研究證實，直腸靜脈回流障礙是其發(fā)病的重要原因，馬應(yīng)龍痔瘡膏對水腫、出血、疼痛等有較好療效，臨床常用[1-2]。己酮可可堿(Pentoxifylline，PTX)主要用于各種微循環(huán)障礙引起的疾病。酮咯酸氨丁三醇(Ketorolac Tromethamine，KT)是一種非甾體類抗炎藥，能抑制前列腺素生物合成，臨床主要適用于急性較嚴(yán)重疼痛的短期治療[3]。本研究將PTX和KT聯(lián)合制備成凝膠制劑，在痔瘡模型中取得了理想的效果，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1材料 (1)藥品及試劑。PTX-KT凝膠由公司實驗室自制，巴豆油、伊文思藍(lán)、吡啶、甲醛購自國藥集團化學(xué)試劑有限公司，乙醚購自天津市申泰化學(xué)試劑有限化司，生理鹽水購自山東長富潔晶藥業(yè)有限公司。(2)實驗動物。SD大鼠，體重200～220 g；KM小鼠，體重18～20 g。由山東新時代藥業(yè)有限公司動物中心提供[合格證號：SCXK(魯)2006 0019]。(3)儀器。紫外分光光度計(尤尼斯上海儀器有限公司)；電子分析天平(d=0.0001 g)，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；組織病理設(shè)備(上海萊卡公司)。

1.2方法

1.2.1直腸潰瘍動物模型的制作 動物模型制作根據(jù)參考文獻(xiàn)[4]。取SD大鼠60只，雌雄各半，體重(180±20)g，將大鼠隨機分為6組：模型組(空白)、馬組(給予馬應(yīng)龍痔瘡膏)和4個PTX-KT凝膠組(A組0.1%PTX+0.5%KT，B組0.1%PTX+1.0%KT，C組0.3%PTX+0.5%KT，D組0.3%PTX+1.0%KT)，分別直腸內(nèi)給藥，2次/d，連續(xù)3 d，最后1天巴豆油造模后2 h，每鼠再給藥1次，6 h后全部大鼠處死后統(tǒng)一留取肛門處直腸，其中一半按照參考文獻(xiàn)[4]計算直腸肛門系數(shù)，另一半用10%福爾馬林固定，蘇木精、伊紅染色，400倍鏡采集圖片。

1.2.2福爾馬林疼痛模型制作 另取SD大鼠60只，雌雄各半，體重(180±20)g，按前述分為6組并直腸內(nèi)給藥1次后，用福爾馬林在直腸內(nèi)注射造成炎性疼痛，分別在不同時間進(jìn)行評分[5]。

1.2.3小鼠尾部出血時間的測定 取KM小鼠60只，雌雄各半，體重(20±2)g，按前述分為6組，將全部小鼠尾部用小圈皮筋綁扎，5 h后松開皮筋，對小鼠尾部每天按前述藥物涂抺，2次/d，連續(xù)給藥3 d，末次給藥1 h后，剪去小鼠尾尖0.4 cm，每10 s用干凈的濾紙片輕輕接觸小鼠尾尖，吸去血滴，直到?jīng)]有血跡出現(xiàn)，并記錄時間。

2 結(jié)果

2.1各組相關(guān)指標(biāo)的比較 直腸肛門系數(shù)：各組總的比較有統(tǒng)計學(xué)意義，兩兩比較顯示，C組與模型組有統(tǒng)計學(xué)意義(q=4.93，P<0.05)，A、B、C、D及馬組之間無統(tǒng)計學(xué)意義。疼痛評分：0-15 m、15-30 m時，C組與模型組有統(tǒng)計學(xué)意義(q=4.29，4.54；P<0.05)，其他各組之間均無統(tǒng)計學(xué)意義；30-45 m、45-60 m時，各組之間均無統(tǒng)計學(xué)意義。出血時間：各組之間均無統(tǒng)計學(xué)意義。見表1。

表1 各組相關(guān)指標(biāo)的比較

2.2各組典型病理變化 見封二圖1-6。從病理圖片可見，圖5模型組直腸組織黏膜層廣泛變性壞死，可見大量壞死組織脫落于管腔內(nèi)，粘膜下層組織有明顯充血和水腫，可見造模成功；圖6馬組與A組可見局部直腸粘膜組織變性壞死，有輕度的水腫和充血；B組與D組未見組織變性壞死，但存在輕度水腫與散在充血；C組粘膜上皮組織排列整齊，粘膜及粘膜下組織未見明顯壞死及充血和水腫。

3 討論

痔是臨床最常見的病病之一，發(fā)病率可達(dá)67%[4]，它的形成主要是由于便秘、腹瀉、妊娠等造成靜脈回流障礙，使肛管和肛門緣靜脈血管曲張，形成1個或多個靜脈團，直至斷裂并伴有靜脈叢淤血、擴張、融合，甚至夾雜細(xì)小的動、靜脈瘺，最后形成痔，痔形成后，必然會出現(xiàn)一系列炎癥并發(fā)癥，嚴(yán)重者可形成瘺或竇道[1]。動物四肢行走，其直腸靜脈與心臟幾乎處于同一水平，血液回流較好，不會產(chǎn)生痔瘡，因此動物痔瘡模型多數(shù)只能看作是近似模型，與痔瘡發(fā)病的真實情況有較大差異。如何制作與人類痔瘡較為一致的動物模型是痔瘡藥效學(xué)研究中亟待解決的問題。本文利用各種實驗方法，把人類痔瘡的病理生理一一分解開來，逐一用動物模型模擬出來。

PTX可抑制TNF生成，減輕IL-1、IL-2誘導(dǎo)的損害，可恢復(fù)下降的細(xì)胞功能，改善組織的供血和供氧，舒張血管和增加循環(huán)，可有效改善微循環(huán)[6]，針對直腸周圍靜脈曲張和微循環(huán)不良造成的出血有良好的阻斷作用。KT屬非甾體抗炎藥，臨床主要用于術(shù)后鎮(zhèn)痛[3]。本研究將二者合用，采用不同的劑量組合，與模型組及馬組對照，結(jié)果顯示，在直腸肛門系數(shù)、鎮(zhèn)痛、出血時間等方面以0.3%PTX+0.5%KT組合效果最好。

總之，PTX與KT合用對巴豆油造成的大鼠直腸潰瘍與炎癥模型、福爾馬林所致大鼠直腸疼痛模型均有良好的治療結(jié)果。