陳石梅，黃鎖義

1. 右江民族醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院（百色 533000）；2. 右江民族醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院（百色 533000）；3. 右江民族醫(yī)學(xué)院廣西高校右江流域特色民族藥研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（百色 533000）

小茴香為傘形科植物茴香（Foeniculum vulgare Mill.）的干燥成熟果實(shí)。小茴香分布廣泛，是一種多用途芳香植物，其葉和種子均有特殊香味，嫩葉通常作為蔬菜食用，種子味辛，性溫，具有散寒止痛、理氣和胃的功能[1]。小茴香作為一種重要的食藥兩用材料，在食品和生物制藥等方面具有廣闊的應(yīng)用前景。隨著近年來(lái)對(duì)小茴香研究的不斷深入，提取技術(shù)得到一定發(fā)展，通過(guò)對(duì)近年來(lái)小茴香的各種提取技術(shù)進(jìn)行總結(jié)和闡述，旨在為小茴香研究與應(yīng)用提供參考。

1 小茴香的化學(xué)成分

據(jù)研究證實(shí)，小茴香藥材中的有效成分主要有脂肪油、揮發(fā)油（反式茴香腦占65%～78%）、甾醇及糖苷、氨基酸等，以及三萜、鞣質(zhì)、黃酮、強(qiáng)心苷、生物堿、皂苷、香豆素、揮發(fā)性堿、蒽醌、有機(jī)酸等多種類(lèi)型化合物[2]。目前，對(duì)小茴香精油、揮發(fā)性成分、黃酮等研究較為深入。

2 有效成分提取

2.1 小茴香精油

經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)[3]，茴香精油含有檸檬烯、反式-茴香腦、α-蒎烯等，反式-茴香腦為果實(shí)精油揮發(fā)性成分主要特征成分，茴香根精油中含有蒔蘿芹菜腦等。茴香精油的用途主要用于提取茴香腦，配制食品、藥品和飲料的增香劑和調(diào)味劑，具有保護(hù)肝腎損傷的作用、抗真菌作用、細(xì)胞毒性作用等[4-6]。常見(jiàn)的提取方法主要有微波萃取法、水蒸氣蒸餾法、超臨界CO2萃取法、同時(shí)萃取法等。

周利劍等[7]運(yùn)用同時(shí)蒸餾萃取法、超臨界CO2萃取法和微波萃取法這3種提取方法對(duì)茴香精油的提取進(jìn)行比較，以同時(shí)蒸餾萃取法精油得率最高，如果能將同時(shí)蒸餾萃取法和微波萃取法聯(lián)合利用，將會(huì)在很大程度上縮短提取時(shí)間和減少費(fèi)用。為了避免使用有毒的有機(jī)溶劑，減少試驗(yàn)操作的復(fù)雜性，改進(jìn)小茴香油提取試驗(yàn)，正交優(yōu)選并制定標(biāo)準(zhǔn)化方案，陳金蘭等[8]用揮發(fā)油測(cè)定法提取小茴香油，以香油得率為評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)用L9(34)正交試驗(yàn)直觀分析并篩選驗(yàn)證最佳提取方法。蔡麗華等[9]應(yīng)用索氏提取法，以精油提取率為指標(biāo)，對(duì)提取到的小茴香精油進(jìn)行L9(34)正交試驗(yàn)、方差分析，結(jié)果表明，反式茴香腦在小茴香精油中相對(duì)含量最高，占總含量的30.35%。在國(guó)外，對(duì)于小茴香的研究也主要集中于小茴香精油，在比較二氧化碳超臨界流體萃?。⊿FE）、微波輔助萃?。∕AE）和水蒸餾（HD）這3種不同的提取方法提取茴香精油時(shí)，發(fā)現(xiàn)微波輔助萃?。∕AE）和二氧化碳超臨界流體萃?。⊿FE）不僅能節(jié)省時(shí)間、減少試劑的使用，還能提高茴香精油的提取效率[10]。另外有研究發(fā)現(xiàn)茴香精油的成分含量受蒸餾時(shí)間影響，時(shí)間越長(zhǎng)，所提取到的含量越低[11]。B?jan等[12]通過(guò)水蒸氣蒸餾從茴香干果中獲得精油，發(fā)現(xiàn)其主要成分為反式茴香腦。

2.2 小茴香揮發(fā)性成分

小茴香揮發(fā)油成分中主要含有反式茴香腦、檸檬烯、月桂烯、茴香酮等，主要應(yīng)用于抗菌、抗氧化、提高免疫和抗腫瘤[13-15]。傳統(tǒng)的提取方法主要是水蒸氣蒸餾法、超臨界CO2流體萃取法、溶劑浸提法、固相萃取法等。

于翠等[16]研究利用新型的超聲霧化-固相萃取法對(duì)小茴香揮發(fā)油進(jìn)行萃取，該方法所用的試劑量和萃取時(shí)間比傳統(tǒng)方法要少。固相微萃取法作為近年來(lái)提取小茴香揮發(fā)油的主流方法，李明明等[17]采用固相微萃取方法萃取小茴香莖中的揮發(fā)性成分，聯(lián)合使用氣相色譜-質(zhì)譜對(duì)揮發(fā)性成分進(jìn)行分離和鑒定，結(jié)果測(cè)得小茴香揮發(fā)性成分以反式茴香腦為主，其次是檸檬烯，這種方法具有操作時(shí)間短、樣品少、無(wú)需萃取溶劑、對(duì)被測(cè)樣品選擇性高的優(yōu)點(diǎn)。鄭甜田等[18]也選用固相微萃取法萃取，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用對(duì)小茴香果實(shí)中揮發(fā)油進(jìn)行成分分析，結(jié)果表明小茴香的主要成分是反式茴香腦、胡椒酚甲醚、4-甲氧基-苯甲醛。為研究不同產(chǎn)地小茴香根揮發(fā)油的成分含量是否存在差異，宋鳳鳳等[19]采用水蒸氣蒸餾法提取，運(yùn)用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）進(jìn)行化學(xué)成分分析，結(jié)果表明不同產(chǎn)地的小茴香根揮發(fā)油在成分上和含量上均存在差異。為提高提取效率，Piras等[20]采用超臨界流體萃?。⊿FE）和水蒸氣蒸餾（HD）提取小茴香揮發(fā)性成分，Topal等[21]采用超臨界二氧化碳（SCCO2）萃取和水蒸氣蒸餾法提取小茴香揮發(fā)油。白雪等[22]對(duì)藏茴香萃取物的化學(xué)成分進(jìn)行分離時(shí)，發(fā)現(xiàn)采用超臨界CO2萃取技術(shù)對(duì)于連續(xù)化生產(chǎn)較困難。Coelho等[23]發(fā)現(xiàn)在提取小茴香過(guò)程中，與水蒸氣蒸餾（HD）相比，超臨界流體萃?。⊿FE）在298～353 K和30.0 MPa壓力范圍內(nèi)可達(dá)到最佳提取和分餾條件。為了快速、環(huán)保并具有高的富集效率，Yu等[24]利用自制的萃取柱，結(jié)合液相微萃取技術(shù)，對(duì)小茴香的活性成分進(jìn)行超聲霧化萃取。

2.3 小茴香黃酮

黃酮類(lèi)化合物的發(fā)現(xiàn)歷史悠久，具有顯著抗氧化性能[25-26]。賈貴華等[25]將超聲波技術(shù)和雙水相體系萃取技術(shù)綜合應(yīng)用于提取茴香莖中總黃酮，發(fā)現(xiàn)影響黃酮提取的主要因素是提取液濃度、提取時(shí)間、料液比。該方法提取比較充分、提取時(shí)間較短、所用試劑量少，是一種較好的提取方法。李蜀眉等[26]通過(guò)正交試驗(yàn)得出小茴香黃酮類(lèi)化合物的最佳提取條件：提取劑采用95%乙醇（體積分?jǐn)?shù)）、料液比1∶15（g/mL）、提取溫度40 ℃。劉紅等[27]選用響應(yīng)曲面法優(yōu)化微波提取小茴香總黃酮，得到提取最佳工藝條件，該方法與微波提取法相比，提取效率更高。

2.4 小茴香生物堿

生物堿一般是指存在于植物中的堿性含氮化合物，由于生物堿分布很廣，其存在于雙子葉植物的豆料、茄科、放己科、夾竹桃科、罌粟科和毛莨科等科屬，其具有抗癌、抗腫瘤、抗炎、抗病毒等作用[28-29]。目前對(duì)于生物堿的提取方法研究頗少，只看到古力伯斯坦·艾達(dá)爾等[30]采用高效液相色譜法，測(cè)得小茴香中生物堿含量為2.9%。

2.5 甾醇及糖苷

小茴香果實(shí)中含有植物甾醇基-β-呋喃果糖苷、Δ7-豆甾烯醇、豆甾醇、甾醇及菜油甾醇，其用途主要是抑制腫瘤作用、預(yù)防心血管疾病及促進(jìn)新陳代謝等[31-32]。小茴香莖葉中也含有苷類(lèi)、酚類(lèi)等化合物。對(duì)于甾醇和糖苷的提取，主要采用的方法是溶劑提取法，該方法相對(duì)簡(jiǎn)單，易操作，但是所用試劑具有一定危險(xiǎn)性，使用時(shí)應(yīng)注意。武拉斌等[33]采用70%乙醇回流提取，再經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析洗脫，從茴香干燥根得到化合物，經(jīng)分析鑒定化合物中含有β-谷甾醇。林健博等[34]參照該方法提取出β-谷甾醇。張嫩玲等[35]采用90%乙醇回流提取得到粗提取物，采用硅膠層析法分離得到不同化合物，經(jīng)MS和NMR等方法鑒定為亞油酸蔗糖苷、β-谷甾醇、豆甾醇-β-D-吡喃葡萄糖苷等。

2.6 小茴香醛

茴香醛主要是由茴香腦經(jīng)氧化而得，可用于合成香料，也具有一定的抗菌作用[36]。Valente等[37]采用鹽析輔助液-液萃?。⊿ALLE）技術(shù)，與高效液相色譜-紫外-質(zhì)譜/質(zhì)譜和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用，從小茴香中鑒別出雌二醇、茴香醛、茴香腦等。該方法簡(jiǎn)單，功能多樣，應(yīng)用廣泛。

2.7 無(wú)機(jī)元素

常見(jiàn)多種金屬元素具有一定抗癌作用[38]。運(yùn)用不同炮制方法處理過(guò)的小茴香，其元素的含量也會(huì)發(fā)生相應(yīng)的改變，常見(jiàn)提取方法為微波消解法，該方法簡(jiǎn)單、快速。孫亮等[38]采用微波消解法對(duì)小茴香進(jìn)行消解，得到無(wú)機(jī)元素，利用電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICP-MS法）檢測(cè)金屬元素，發(fā)現(xiàn)小茴香中Na、Mg、Ca、Fe、Zn、Mn和Ba等金屬元素含量較高。在不同炮制方法下，其小茴香不同無(wú)機(jī)元素的含量也會(huì)有不同的變化[39]。陳燕芹等[40]采用微波消解法對(duì)小茴香樣品進(jìn)行處理，經(jīng)鑒定K、Ca、Mg、P在小茴香中含量較高。李利華[41]對(duì)小茴香采用微波消解法提取無(wú)機(jī)元素，結(jié)果發(fā)現(xiàn)小茴香中富含對(duì)人體有益的無(wú)機(jī)元素，如Ca、Mg、Fe、Zn、Mn和Cu等。

2.8 其他

氨基酸作為構(gòu)成動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)所需蛋白質(zhì)的基本物質(zhì)，在人體中發(fā)揮著重要的作用。張飛[42]在液固比25∶1（mL/g）、萃取時(shí)間45 min、萃取溫度60 ℃的亞臨界丁烷萃取條件下，得到小茴香油樹(shù)脂，經(jīng)鑒定其含有17種氨基酸，其中人體必須氨基酸有7種。為快速有效提取香料中的揮發(fā)性成分，王璐[43]研究一種新型提取方法，即超聲霧化提取法，該方法也應(yīng)用于提取茴香中的反式茴香醚。茴香籽在商業(yè)中可作為一種茶，為了測(cè)定不同商業(yè)茴香籽茶中草蒿腦的含量，Basaglia等[44]采用頂空固相微萃?。℉S-SPME）結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該方法具有較高的靈敏度，準(zhǔn)確性和精密度。

3 結(jié)語(yǔ)與展望

針對(duì)對(duì)小茴香提取方法的研究，總結(jié)歸納為：傳統(tǒng)的溶劑浸提法提取率低、耗時(shí)長(zhǎng)，而鹽析輔助液-液萃取（SALLE）技術(shù)具有顯著的優(yōu)勢(shì)，具有提取率高、溶劑用量少和功能多樣的特點(diǎn)。另外，將2種或2種以上的提取方法聯(lián)合應(yīng)用，其提取效果要優(yōu)于傳統(tǒng)提取方法。同時(shí)應(yīng)用超臨界CO2技術(shù)等高新技術(shù)不僅使小茴香得到高效綜合利用，其經(jīng)濟(jì)附加值也可大幅度提高，具有巨大的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。

小茴香應(yīng)用廣泛，主要體現(xiàn)在食品、醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)和日用品等方面，前景巨大。中國(guó)的小茴香資源豐富，具有巨大的醫(yī)藥市場(chǎng)，隨著中國(guó)中藥材的國(guó)際化，中國(guó)藥材將會(huì)逐漸登上國(guó)際藥物市場(chǎng)。因此，對(duì)于小茴香的深入研究將會(huì)為抗菌、抗氧化、抗炎鎮(zhèn)痛、治療痛經(jīng)、食品添加劑、保健藥品和保健食品等天然藥物分析提供新線索。進(jìn)一步研究小茴香的藥用資源開(kāi)發(fā)利用，具有廣闊前景。隨著天然產(chǎn)物開(kāi)發(fā)的不斷興起，重視環(huán)保、追求食品安全的意識(shí)不斷加強(qiáng)，對(duì)于小茴香天然產(chǎn)物的開(kāi)發(fā)利用將進(jìn)一步加大。目前，對(duì)于小茴香有效成分的提取方法有很多，提取效率不高，如果能將傳統(tǒng)方法和現(xiàn)代新型的提取技術(shù)相結(jié)合，對(duì)小茴香提取分離技術(shù)進(jìn)行更新，提高小茴香有效成分的提取含量和提取效率，會(huì)為小茴香的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供理論基礎(chǔ)。