何君婷 龔文波

寧波市中醫(yī)院 浙江 寧波315000

2型糖尿病是一種慢性炎癥性疾病[1]。激酶核因子-KB（NF-KB）的激活是糖尿病炎癥反應(yīng)的重要途徑和核心指標(biāo)。在2型糖尿病中醫(yī)證型與炎癥因子相關(guān)性研究方面，目前多個(gè)研究都認(rèn)為炎癥因子可作為2型糖尿病進(jìn)行中醫(yī)分型的重要客觀指標(biāo)。本研究擬從NF-KB炎癥通路激活水平來研究2 型糖尿病氣虛、陰虛、氣陰兩虛證三個(gè)基本中醫(yī)證型之間炎癥反應(yīng)的異同，以期為進(jìn)一步探討中醫(yī)益氣養(yǎng)陰法改善2 型糖尿病炎癥反應(yīng)的機(jī)制提供依據(jù)，同時(shí)對(duì)指導(dǎo)臨床中醫(yī)辨證治療糖尿病有較大意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取2016年至2017年寧波市中醫(yī)院內(nèi)分泌科門診就診2型糖尿病患者作為研究對(duì)象，根據(jù)樣本量公式估算，收集大約275 例病例納入本次研究。通過規(guī)范化的四診采集、判定，選取氣虛證、陰虛證、氣陰兩虛證共202 例作為3 個(gè)試驗(yàn)組，并選取本院體檢中心健康人群73例為對(duì)照研究。其中對(duì)照組男性37例，女性36 例；年齡52.1±8.1 歲；體重指數(shù)（BMI）為22.12±2.86。氣虛組共68 例，男性35 例，女性33 例；年齡54.3±8.8 歲；病程5.21±2.18 年；體重指數(shù)（BMI）為23.32±3.06。陰虛組共62例，男性30例，女性32例；年齡55.3±8.6 歲；病程6.81±2.73 年；體重指數(shù)（BMI）為22.72±2.87。氣陰兩虛組共72 例，男性38 例，女性34 例；年齡52.3±7.9 歲；病程5.76±3.35 年；體重指數(shù)（BMI）為22.09±2.48。經(jīng)比較，4 組患者的一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 診斷與排除標(biāo)準(zhǔn)：分述如下。

1.2.1 2 型糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)：參照1999 年WHO 推薦的診斷標(biāo)準(zhǔn)：空腹血糖(FPG)7.0mmol/L；或糖耐量試驗(yàn)(OGTT)11.1mmol/L；或隨機(jī)血糖11.1mmol/L。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：①糖尿病急性并發(fā)癥，如糖尿病酮癥、糖尿病高滲性昏迷；②糖尿病各種應(yīng)激狀態(tài)：如感染、創(chuàng)傷、大出血等；③糖尿病其他兼癥（如腫瘤、免疫系統(tǒng)或血液系統(tǒng)疾病者）；④患者因嚴(yán)重心腦腎并發(fā)癥者；⑤妊娠或哺乳期婦女。

1.2.3 中醫(yī)證候判定標(biāo)準(zhǔn)：參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》《中西醫(yī)結(jié)合糖尿病診療標(biāo)準(zhǔn)》《消渴?。ㄌ悄虿。┲嗅t(yī)分期辨證與療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)》的標(biāo)準(zhǔn)擬定：①氣虛證主癥：神疲乏力，少氣懶言，汗出氣短，脈細(xì)無(wú)力；次癥：自汗，怔忡健忘，舌淡或淡胖。符合2項(xiàng)主癥及1項(xiàng)次癥即可診斷。②陰虛證主癥：咽干口渴，怕熱汗多或有盜汗，手足心或五心煩熱，舌紅、苔薄黃或薄白；次癥：消谷善饑，形體消瘦，大便秘結(jié)，細(xì)數(shù)。符合2項(xiàng)主癥及1項(xiàng)次癥即可診斷。③氣陰兩虛證主癥：神疲乏力，汗出氣短，五心煩熱，咽干口渴，舌紅少津，苔薄或白膩；次癥：怔忡健忘，多食易饑，心悸失眠，脈細(xì)或濡細(xì)。符合2 項(xiàng)主癥及1項(xiàng)次癥即可診斷。

1.3 實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)測(cè)定：采集所有研究對(duì)象清晨空腹靜脈血5ml，運(yùn)用免疫印跡實(shí)驗(yàn)(western blotting)測(cè)定NF-KB 蛋白表達(dá)水平，具體操作嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行，NF KappaB p65 ELISA 試 劑 盒 購(gòu) 自abcom 公 司（ab176648），并同時(shí)測(cè)定血清糖化血紅蛋白（HbA1C），C反應(yīng)蛋白（CRP）等相關(guān)指標(biāo)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：計(jì)數(shù)資料以例數(shù)表示，用χ2檢驗(yàn)比較各組炎性因子的水平差異，計(jì)量資料符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以±s表示，非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)行對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后表示為±s再進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析，均以P＜0.05 為有顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1 4 組FPG、HbA1C 及hs-CRP 水平比較：氣陰兩虛組、氣虛組、陰虛組hs-CRP、FPG、HbA1c 均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)；氣陰兩虛組、氣虛組、陰虛組間hs-CRP、FPG、HbA1c無(wú)顯著差異(P＞0.05）,見表1。

表1 4組FPG、HbA1C及hs-CRP水平比較（±s）

表1 4組FPG、HbA1C及hs-CRP水平比較（±s）

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.05。

組別陰虛組氣虛組氣陰兩虛組對(duì)照組例數(shù)62 68 72 73 FPG（mmol/L）8.15±2.87*7.67±2.54*7.86±2.45*4.65±0.47 HbA1C（%）7.73±1.53*7.23±1.24*6.95±1.05*4.65±0.98 hs-CRP（mg/L）9.07±4.12*8.67±3.78*9.67±4.89*5.67±2.54

2.2 4 組患者的NF-KB 水平比較：氣陰兩虛組NF-KB 1710.03±287.23ng/ml，明顯高于對(duì)照組的1448.96±287.23ng/ml 及氣虛組的1543.82±342.38ng/ml（P＜0.01），高于 陰 虛組的1543.82±342.38ng/ml(P＜0.05)。氣虛組患者NF-KB 水平與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；陰虛組患者NF-KB 水平與對(duì)照組比較差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05）。

3 討論

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,過度表達(dá)誘導(dǎo)炎癥的因子可同時(shí)引起數(shù)個(gè)代謝性危險(xiǎn)因素,導(dǎo)致肥胖、脂肪肝及糖耐量受損[2],予抗炎治療后,這些危險(xiǎn)因素可部分得到改善[2-3]。抗炎治療糖尿病已取得可喜的進(jìn)展，白細(xì)胞介素1受體抗體改善胰島功能[4]；黃連素治療伴脂代謝紊亂的2 型糖尿病有效[5]；因此值得關(guān)注和研究抗炎治療糖尿病。

NF-KB 是1986 年由Sen 和Baltimore 在B 細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)的調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄的關(guān)鍵因子之一,是一系列異二聚體家族的總稱，是一種特異性的轉(zhuǎn)錄因子[6]。在大多數(shù)細(xì)胞中，NF-KB 構(gòu)成同源或異源二聚體以未激活狀態(tài)與IkBs 結(jié)合存在于細(xì)胞質(zhì)中[7]。當(dāng)受到刺激因子如病毒、放射線、氧自由基、細(xì)菌脂多糖(LPS)、TNF-α 等刺激時(shí)，NFKB-IKBs 復(fù)合物被激活，NF-KB 解離出來并轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核，與相應(yīng)位點(diǎn)特異性結(jié)合促進(jìn)相應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄，從而啟動(dòng)和調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)，介導(dǎo)細(xì)胞黏附、分化、增殖、凋亡和炎癥反應(yīng)，并在各種免疫炎癥性疾病和腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用[8-9]?，F(xiàn)有研究表明，NF-KB 在血中的表達(dá)水平可提示炎癥反應(yīng)，在本研究中，氣陰兩虛患者的NF-KB水平顯著高于其它組。

氣虛或氣機(jī)不利是糖尿病的基本病機(jī)，在疾病發(fā)生發(fā)展過程中，會(huì)演變?yōu)殛幪?、氣陰兩虛證[10]，臨床實(shí)踐中，應(yīng)用益氣、養(yǎng)陰、益氣養(yǎng)陰法治療2 型糖尿病，均能收到較好療效，而氣陰兩虛證出現(xiàn)的較氣虛證和陰虛證在病程上相對(duì)較晚。明代醫(yī)家樓英所著的《醫(yī)學(xué)綱目》中指出“蓋肺藏氣，肺無(wú)病則氣能管攝津液之精微，津液之精微者收養(yǎng)筋骨之血脈，余者溲，肺病則津液無(wú)氣管攝，津微亦隨之溲下”，結(jié)果是氣陰俱損，形成氣陰兩虛之體質(zhì)。國(guó)內(nèi)相關(guān)研究也表明，應(yīng)用益氣養(yǎng)陰法能夠抑制機(jī)體炎癥因子[11-12]。結(jié)合本研究結(jié)果，可以推論在2 型糖尿病的發(fā)生發(fā)展過程中，氣陰兩虛證可能是2型糖尿病患者機(jī)體產(chǎn)生明顯炎癥反應(yīng)的一個(gè)階段，其炎癥因子的表達(dá)較單純的氣虛和陰虛階段均更明確，臨床中醫(yī)治療2 型糖尿病應(yīng)當(dāng)辨證論治，分清氣虛、陰虛、氣陰兩虛的不同，辨證處方，才能取得良好療效。NF-KB 的表達(dá)水平能否作為氣陰兩虛型2型糖尿病的辨證客觀依據(jù)，尚需多中心、大樣本的研究予以證實(shí)。