劉潤(rùn)春 鄒小波 劉茂軍

摘要：細(xì)菌性疾病?；旌细腥疽鸶嵫蚝统赡暄蛩劳觯：薮?。細(xì)菌性疾病在臨床上多用抗生素防治，但長(zhǎng)期過(guò)量和不合理使用抗生素導(dǎo)致了細(xì)菌耐藥性菌株涌現(xiàn)。就羊源致病性細(xì)菌包括大腸桿菌、巴氏桿菌、肺炎鏈球菌和沙門(mén)氏菌等的耐藥性進(jìn)行綜述，發(fā)現(xiàn)羊源致病性細(xì)菌對(duì)1種藥的耐藥率可達(dá)2.13%～100.00%，且多重耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重，有些菌株可達(dá)19重耐藥。這可以為羊用抗生素的科學(xué)使用和公共衛(wèi)生安全及動(dòng)物源性食品安全的防控提供一定參考。

關(guān)鍵詞：羊;細(xì)菌;耐藥性;多重耐藥;抗生素;羊源致病性細(xì)菌

中圖分類號(hào)： S855.1 ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A ?文章編號(hào)：1002-1302（2020）23-0047-05

在市場(chǎng)需求增加和產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整的背景下，養(yǎng)羊業(yè)得到了空前的發(fā)展，逐漸由散養(yǎng)轉(zhuǎn)變?yōu)樯犸暬虬肷犸暤募s化生產(chǎn)模式。隨著羊群密度的增加，羊病的發(fā)病率也大大增加，其中，細(xì)菌病常作為原發(fā)性或繼發(fā)性疾病，易出現(xiàn)混合感染，引起羊大量死亡[1]。

1 羊細(xì)菌耐藥性的風(fēng)險(xiǎn)

抗菌藥物仍然是治療細(xì)菌性疾病的主要手段，大規(guī)模使用抗生藥物會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌耐藥譜和耐藥率逐漸增加。耐藥菌感染羊后，在體內(nèi)大量繁殖，將細(xì)菌疾病傳染至整個(gè)羊群，導(dǎo)致羊大量死亡，為養(yǎng)殖戶帶來(lái)重大經(jīng)濟(jì)損失，給養(yǎng)羊業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中細(xì)菌性疾病的防治帶來(lái)嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。同時(shí)，研究顯示，獸藥污染會(huì)增加環(huán)境中敏感菌耐藥性，此外，耐藥基因在水環(huán)境的生物群落中富集儲(chǔ)存，通過(guò)一系列發(fā)展和演變，耐藥菌株存在蔓延到人體和環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)。

2 羊常見(jiàn)細(xì)菌性傳染病及其耐藥性研究現(xiàn)狀

常見(jiàn)的羊源耐藥性細(xì)菌包括大腸桿菌、巴氏桿菌、肺炎鏈球菌和沙門(mén)氏菌等。這些細(xì)菌廣泛存在多重耐藥、耐藥率高和耐藥程度強(qiáng)等問(wèn)題，且細(xì)菌整體耐藥性隨時(shí)間延長(zhǎng)呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。

2.1 羊大腸桿菌病

大腸桿菌主要引起羊的出血性胃腸炎及急性敗血癥，也會(huì)引起羊肺炎、成年羊流產(chǎn)、腦膜炎等的并發(fā)癥或混合感染[2]。大腸桿菌表現(xiàn)出多重耐藥性，其主要是通過(guò)自身基因突變或質(zhì)粒、轉(zhuǎn)座子及其他可移動(dòng)片段獲得外源耐藥基因而產(chǎn)生耐藥性。

2.1.1 國(guó)內(nèi)外羊源大腸桿菌耐藥性研究現(xiàn)狀 Enriquez-Gómez等對(duì)墨西哥健康羔羊大腸桿菌的耐藥試驗(yàn)結(jié)果顯示，對(duì)四環(huán)素的耐藥率為48.7%，對(duì)萘啶酸的耐藥率為13.7%，對(duì)慶大霉素的耐藥率為6.2%，對(duì)環(huán)丙沙星的耐藥率為3.7%[3]。Medina等對(duì)西班牙羊源致病性大腸桿菌分離株的藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，該菌對(duì)氨芐西林、磺胺甲惡唑等藥物的耐藥率約為30%，對(duì)慶大霉素和多黏菌素敏感率達(dá)90%以上[4]。Blanco等測(cè)定發(fā)現(xiàn)，西班牙羊源大腸桿菌分離株對(duì)四環(huán)素的耐藥性高達(dá)76%，對(duì)鏈霉素的耐藥率為74%，對(duì)磺胺嘧啶的耐藥率為69%，對(duì)氨芐西林的耐藥率為50%，對(duì)卡那霉素的耐藥率為47%，對(duì)新霉素和氯霉素的耐藥率為44%，對(duì)甲氧芐啶和復(fù)方新諾明的耐藥率為35%，對(duì)美洛西林的耐藥率為27%、對(duì)哌拉西林的耐藥率為22%[5]。

在國(guó)內(nèi)的研究報(bào)道中，底麗娜對(duì)分離自新疆某羊場(chǎng)的638株致病性大腸桿菌進(jìn)行耐藥性分析，結(jié)果顯示，對(duì)頭孢噻呋、安普霉素等藥物的耐藥率在8.8%～33.9%之間;62.5%的菌株耐1～3種藥物[6]。劉愛(ài)輝等從河南省某羊場(chǎng)腹瀉病死羊糞便中分離出58株羊源大腸桿菌，對(duì)其耐藥性進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，對(duì)青霉素和紅霉素的耐藥率為100%，對(duì)頭孢克洛、氨芐西林的耐藥率在20.7%～43.1%之間;86.2%的菌株存在3重以上耐藥，有些菌株可達(dá)19重耐藥[7]。姜德相等對(duì)吉林省56株致病性羔羊大腸桿菌做了耐藥性分析，結(jié)果表明對(duì)大觀霉素、氧氟沙星等藥物的耐藥率在82.1%～96.4%之間，對(duì)阿米卡星、多西環(huán)素等藥物的耐藥率在50.0%～78.6%之間，對(duì)頭孢克肟、頭孢曲松的耐藥率在12.4%～28.6%之間[8]。劉正明等測(cè)定了內(nèi)蒙古108株羊源大腸桿菌的耐藥性，其中102株達(dá)7重耐藥性，對(duì)磺胺、黏菌素、頭孢噻吩及阿莫西林均表現(xiàn)為耐藥，對(duì)環(huán)丙沙星、四環(huán)素、阿莫西林/克拉維酸的耐藥率分別為53.7%、62.0%、75.0%[9]。

2.1.2 羊源大腸桿菌的耐藥基因研究情況 檢測(cè)耐藥基因?qū)Ψ乐巩a(chǎn)生細(xì)菌耐藥性、探索細(xì)菌耐藥機(jī)制具有重要意義。張新對(duì)從寧夏、青海等地區(qū)分離的320株羊源大腸桿菌對(duì)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）和AmpC酶的10種耐藥基因進(jìn)行檢測(cè)，檢出率分別為40.00%（TEM）、15.00%（CTX-M）、7.19%（OXA），未檢測(cè)到SHV型ESBLs基因，AmpC類酶3個(gè)基因的檢出率分別為9.69%（ACC）、13.44%（CIT）、14.38%（EBC），未檢測(cè)到DHA型、MOX型和FOX型酶[10]。超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的基因型有明顯的地域差異。國(guó)內(nèi)β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的使用增加和頻率增大，使ESBLs和AmpC酶在羊源大腸桿菌中廣泛流行。

大腸桿菌的耐藥機(jī)制詳見(jiàn)表1。

2.2 羊巴氏桿菌病

多殺性巴氏桿菌分為A、B、D、E、F等5種血清型，其中B型可以引起羊感染，產(chǎn)生發(fā)熱、肺炎等癥狀。研究發(fā)現(xiàn)，其他多殺性巴氏桿菌血清型會(huì)在不同禽類哺乳動(dòng)物之間交叉?zhèn)魅?，且易發(fā)生改變。

2.2.1 國(guó)內(nèi)外羊源巴氏桿菌耐藥性研究現(xiàn)狀 Cárdenas等在西班牙分離到1株對(duì)喹諾酮敏感的羊源多殺性巴氏桿菌，用逐漸增加抗生素濃度的方法誘導(dǎo)培養(yǎng)，其誘導(dǎo)后的菌株最小抑菌濃度（MIC）增加了10倍以上[13]。Tang等對(duì)我國(guó)分離的233株豬源多殺性巴氏桿菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，70%的菌株對(duì)阿莫西林、林可霉素、磺胺二嘧啶、新諾明呈高度耐藥性[14]。陳建春等從西藏那曲病死牦牛肺臟中鑒定出13株多殺性巴氏桿菌，3株菌對(duì)克林霉素有耐藥性，9株菌對(duì)萬(wàn)古霉素耐藥[15]。

2.2.2 國(guó)內(nèi)外羊源巴氏桿菌耐藥基因研究現(xiàn)狀 Cárdenas等在西班牙分離到1株對(duì)喹諾酮敏感的羊源多殺性巴氏桿菌，用增加抗生素方法誘導(dǎo)培養(yǎng)，使MIC增加了10倍以上，PCR擴(kuò)增gyrA基因發(fā)現(xiàn)其喹諾酮耐藥決定區(qū)（QRDR）第83位氨基酸由絲氨酸突變?yōu)楫惲涟彼醄13]，符合QRDR單點(diǎn)突變規(guī)律。李寶寶等克隆了羊源多殺性巴氏桿菌ompW基因，比對(duì)進(jìn)化樹(shù)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，羊源多殺性巴氏桿菌與豬源多殺性巴氏桿菌親緣關(guān)系最近[16]。王蕾等從患肺炎羊肺中分離到1株莢膜血清型D型的多殺性巴氏桿菌，它攜帶8個(gè)毒力相關(guān)基因（sodA、sodC、ptfA、hgbA、exBD-tonB、fimA、oma87和toxA），僅對(duì)青霉素、林可霉素、慶大霉素、復(fù)方新諾明等有耐藥性[17]。

巴氏桿菌的耐藥機(jī)制詳見(jiàn)表2。

2.3 羊肺炎鏈球菌病

羊肺炎鏈球菌病在患病初期表現(xiàn)為羊的體溫發(fā)生較大波動(dòng)，在患病后期，病癥轉(zhuǎn)化為高燒不退、身體抽搐，最終死亡。張博等檢測(cè)1株β溶血性羊源鏈球菌，結(jié)果顯示其對(duì)四環(huán)素和卡那霉素等有耐藥性[22]。段龍川等在溫州地區(qū)4個(gè)羊場(chǎng)分離出對(duì)青霉素鈉、阿莫西林等藥物耐藥的鏈球菌[23]。楊霞等在河南省偃師市某羊場(chǎng)流產(chǎn)羊胎兒與羊水中分離到1株鏈球菌，其對(duì)頭孢噻肟、環(huán)丙沙星等藥物高度敏感，并且發(fā)現(xiàn)其對(duì)青霉素產(chǎn)生較強(qiáng)耐藥性[24]。

達(dá)娃卓瑪從西藏某地采集的綿羊樣品中分離到鏈球菌，其對(duì)頭孢氨芐、多西環(huán)素等藥物具有耐藥性[25]。

鏈球菌的耐藥機(jī)制詳見(jiàn)表3。

2.4 羊沙門(mén)氏菌病

羊感染沙門(mén)氏菌后主要表現(xiàn)為腹瀉、精神不振、身體虛弱，同時(shí)體溫升高。該病多見(jiàn)于幼年期的羊，死亡率可達(dá)50%～70%[27]。攜帶沙門(mén)氏菌的動(dòng)物糞便有可能成為環(huán)境和食品沙門(mén)氏菌污染的主要傳染源。

江萍等在新疆某羊場(chǎng)分離的沙門(mén)氏菌對(duì)12種抗菌藥物表現(xiàn)出不同程度的耐藥性，被檢喹諾酮類藥物中，對(duì)諾氟沙星的耐藥性為86.5%;被檢氨基糖類藥物中，對(duì)卡那霉素和阿莫西林/克拉維酸鉀的耐藥性分別為84.6%、82.7%;被檢測(cè)的β-內(nèi)酰胺酶類藥物中，對(duì)阿莫西林/克拉維酸和氨芐西林的耐藥性分別為82.7%、80.8%;對(duì)四環(huán)素和氟苯尼考的耐藥性分別為90.4%、92.3%;僅對(duì)阿米卡星和頭孢噻呋敏感[28]。劉英玉等研究新疆地區(qū)某屠宰場(chǎng)和農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)中牛羊源沙門(mén)氏菌的耐藥性，結(jié)果顯示沙門(mén)氏菌對(duì)17種抗菌藥物均存在不同程度的耐藥性，耐藥率為2.13%～59.57%，多重耐藥沙門(mén)氏菌數(shù)量較多，其中有1株沙門(mén)氏菌耐12種抗菌藥，可見(jiàn)沙門(mén)氏菌的多重耐藥性較嚴(yán)重[29]。

沙門(mén)氏菌的耐藥機(jī)制詳見(jiàn)表4。

3 控制細(xì)菌耐藥性的措施

3.1 加強(qiáng)獸藥管理，限制抗菌藥物使用

過(guò)度依賴以及濫用抗生素加速了細(xì)菌耐藥性出現(xiàn)。因此，我國(guó)應(yīng)加強(qiáng)獸藥審批管理，強(qiáng)化細(xì)菌耐藥性管理和監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)分享， 對(duì)人體產(chǎn)生不利影響的藥物進(jìn)行管控和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。鞏固管理，防止對(duì)獸用抗菌藥物的不恰當(dāng)宣傳與使用。

3.2 加強(qiáng)細(xì)菌耐藥性的檢測(cè)

為了應(yīng)對(duì)日漸嚴(yán)重的細(xì)菌耐藥性問(wèn)題，我國(guó)發(fā)展建設(shè)了細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)網(wǎng)（CHINET）。2004年以來(lái)，其監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)提供了重要參考意義，計(jì)劃在未來(lái)5年內(nèi)完善布局全國(guó)多家醫(yī)院的耐藥性檢測(cè)網(wǎng)，使其逐漸規(guī)模化，進(jìn)而開(kāi)展新的檢測(cè)目標(biāo)和監(jiān)測(cè)計(jì)劃。

3.3 開(kāi)發(fā)新藥、老藥新用以及使用中藥

積極應(yīng)用創(chuàng)新技術(shù)，如納米技術(shù)，化學(xué)改造[30]，使改造后的抗生素鈍化細(xì)菌靶位點(diǎn)或?qū)ふ倚挛稽c(diǎn)進(jìn)而抑制細(xì)菌活性。開(kāi)發(fā)新型抗生素的難度、時(shí)間和成本越來(lái)越大，重新應(yīng)用老抗生素或?qū)ふ遗R床試驗(yàn)中治療其他疾病的藥物來(lái)應(yīng)對(duì)細(xì)菌感染，也不免為對(duì)抗多重耐藥菌的選擇。金諾芬（auranofin）、依布硒啉（ebselen）、塞來(lái)昔布（celecoxib）、辛伐他?。╯imvastatin）這4種非抗感染藥物具有一定抗菌作用，且對(duì)現(xiàn)有抗生素耐藥菌沒(méi)有耐藥性，可以較快地為我們提供可適用于臨床的新型抗菌藥物，對(duì)研究新的抗菌藥物作用靶點(diǎn)和抗菌作用的分子機(jī)制具有開(kāi)拓意義[31]。

此外，中藥是天然產(chǎn)物，安全無(wú)毒副作用、價(jià)格低廉、資源廣泛，在治療多種細(xì)菌性疾病方面效果顯著。

4 研究展望

各組織部門(mén)亟需密切合作，獲取掌握有關(guān)耐藥信息，加強(qiáng)臨床監(jiān)督。通過(guò)監(jiān)測(cè)過(guò)去，了解現(xiàn)在，預(yù)測(cè)未來(lái)，有利于遏制耐藥性的進(jìn)一步傳播[32]。

國(guó)內(nèi)現(xiàn)有的調(diào)查比較少且方法不規(guī)范，對(duì)細(xì)菌數(shù)量、耐藥性和耐藥基因的研究也不夠充分。動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性文章大多關(guān)于豬、牛、禽類，羊源細(xì)菌耐藥研究較少且不深入。隨著養(yǎng)羊業(yè)規(guī)?；陌l(fā)展，羊源細(xì)菌耐藥性研究凸顯緊迫，繼續(xù)完善羊源耐藥細(xì)菌研究，對(duì)養(yǎng)羊產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展、安全肉食品生產(chǎn)以及人類和生態(tài)安全意義重大。

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