李仕林綜述，唐 勇審校

0 引 言

膀胱癌(bladder cancer, BC)是泌尿系最常見的惡性腫瘤之一，2018年全世界惡性腫瘤中膀胱癌排名第12位，新發(fā)病例數(shù)為549 393 萬，死亡總數(shù)為 199 922萬，泌尿系排名第二，男性中第六大癌癥，發(fā)病率 9.6/10萬,死亡率為 3.2/10萬、仍持續(xù)升高[1]。 膀胱癌約75%早期診斷為非肌層浸潤性膀胱癌(nonmuscle-invasive BC, NMIBC)，半數(shù)以上5年內(nèi)復(fù)發(fā)，30%出現(xiàn)肌層浸潤，預(yù)后差。膀胱癌診斷以及復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移監(jiān)測主要根據(jù)膀胱鏡檢，尿細胞學(xué)，以及影像學(xué)檢查等，膀胱鏡檢成本高、有并發(fā)癥風(fēng)險，患者依從性差；尿細胞學(xué)檢查敏感性低；計算機斷層掃描(computer tomography, CT)和磁共振成像(magnetic resonance imaging, MRI)不能檢測膀胱癌原位癌、微小病灶，早期病變發(fā)現(xiàn)困難；正電子發(fā)射計算機斷層掃描(positron emission computed tomography, PET-CT)費用相對昂貴，用來評估原位癌也相對困難[2-5]，迫切需要新的非侵入性低成本的手段來改進BC的早期診斷，實時監(jiān)測，來改進臨床分期，檢測微小殘留病灶，預(yù)測治療反應(yīng)和預(yù)測預(yù)后，以及實現(xiàn)個體化治療。因此，本文對膀胱癌的循環(huán)腫瘤細胞(circulating tumor cell，CTC)檢測方法和溶瘤病毒檢測CTC的臨床價值以及未來在膀胱癌中的應(yīng)用展望進行綜述，以期為膀胱癌精準(zhǔn)診治提供一個新思路。

1 CTC檢測方法

CTC是從癌癥原發(fā)灶或轉(zhuǎn)移灶脫落進入血液循環(huán)的惡性腫瘤細胞，可以提供較全面的癌細胞遺傳信息，CTC評估可能比傳統(tǒng)影像學(xué)方法更早發(fā)現(xiàn)疾病[6]，CTC檢測可能用于早期癌癥篩查、診斷、療效評估和預(yù)測預(yù)后，從而實現(xiàn)個體化治療[7-16]。盡管其臨床應(yīng)用前景廣闊，但臨床應(yīng)用并沒有取得預(yù)期的進展，目前CTC檢測方法有逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription polymerase chain reaction RT-PCR)、免疫親和、物理檢測、免疫物理結(jié)合以及高通量成像等技術(shù),由于檢測技術(shù)存在敏感性或特異性方面的不足，尚未標(biāo)準(zhǔn)化[9,17]，CTC在膀胱癌中相關(guān)臨床價值尚未完全挖掘，從而推遲了膀胱癌精準(zhǔn)醫(yī)療的演進。RT-PCR法是最常用的CTC檢測方法，基于上皮特異性轉(zhuǎn)錄本和腫瘤特異性轉(zhuǎn)錄本在癌細胞高表達，在正常細胞不表達，通過將CTC數(shù)轉(zhuǎn)化為探針數(shù)，檢測快速、靈敏高效、成本低，不需分離CTC，然而以RT-PCR檢測CTC的方法可能因特異性標(biāo)志缺乏出現(xiàn)假陰性、非特異性擴增呈現(xiàn)假陽性，以及無法獲得活的CTC用于下游培養(yǎng)和單細胞測序，其轉(zhuǎn)錄本在活CTC和死CTC都會表達，難以進一步區(qū)分[17-21]，免疫親和技術(shù)的出現(xiàn)在一定程度上克服了RT-PCR的缺點,陽性富集法如Cellsearch是利用抗上皮細胞粘附分子(EpCAM)抗體包被的磁珠富集CTC，使用DAPI,CD45,CK等抗體鑒定CTC，是最常用的免疫學(xué)檢測方法，其特異性相對較好[10,12-14,16]，另一些陽性富集法如AdnaTest和 CELLectionTMDynabeads是基于EpCAM抗體和MUC 1抗體、ERBB2抗體捕獲分離CTC，使用多重RT-PCR檢測CTC上腫瘤相關(guān)轉(zhuǎn)錄本。這些方法同時選擇多種抗體捕獲CTC, 可以增加CTC捕獲數(shù)，增加其檢測的靈敏度[17,19-20]。 但是，上述陽性富集法因部分CTC會經(jīng)歷上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial - to - mysenchymal transition,EMT)，產(chǎn)生干細胞或間充質(zhì)表型，使得某些CTC的上皮標(biāo)記物和腫瘤特異性標(biāo)記不表達，也會導(dǎo)致CTC漏檢產(chǎn)生假陰性，或因尿路感染等原因使得正常上皮細胞脫落可能導(dǎo)致假陽性的發(fā)生，而陰性富集法似乎能克服漏檢的CTC，但因血液中白細胞數(shù)量繁多，使用CD45等抗體陰選CTC難以達到高純度，而且不能將傳統(tǒng)CTC與循環(huán)腫瘤微栓(circulating tumor microemboli, CTM)區(qū)分開來[22]。

CTC的大小形態(tài)和血細胞不同，因此可以通過CTC與血細胞間的大小差異來分離CTC，不依賴任何抗體和轉(zhuǎn)錄本表達，快速從全血中過濾分離CTC，可以獲得更全面CTC亞群， Fina等[17]將基于形態(tài)學(xué)方法的screencell和將免疫富集技術(shù)和多重RT-PCR結(jié)合的Adnatest進行比較， screencell檢測的陽性率超過80%，而Adnatest則在40%的轉(zhuǎn)移患者中未檢出CTC, 但是基于膜過濾的方法通量較低，容易導(dǎo)致血凝塊堵塞，一些大的血細胞殘留于膜上以及小的CTC丟失，還需抗體進一步鑒定[23]。微流控芯片也是基于細胞大小的CTC捕獲分離，在一定程度上可以克服傳統(tǒng)過濾的堵塞，低通量等問題。Lima等[24-25]使用基于大小的微流控芯片檢測6例MIBC患者外周血CTC，平均CTC計數(shù)為59個/mL，CTC計數(shù)范圍46～108/mL ,所有患者中，94%分離的CTC 上唾液酸聚糖抗原(sialyl-Tn ,STN)過表達，提示STN可能是一種新的CTC轉(zhuǎn)移相關(guān)標(biāo)記物， 并構(gòu)建了一種基于STN親和的微流體裝置，用于STN+CTCs的分離。以上基于大小的無標(biāo)記選擇技術(shù)不僅具有捕獲CTC類型更全面的優(yōu)點，而且具有捕獲的CTC可以進行細胞培養(yǎng)和分子分析的優(yōu)點，但此種檢測方法還存在一些不足,如比WBC小的CTCS容易漏檢，大的WBC與CTC混雜，需要抗體進一步鑒定等缺點。一種新型基于細胞大小的平臺-SMART BiopsyTM系統(tǒng)，該平臺試圖提高基于細胞大小的CTC檢測技術(shù)的靈敏度和特異度，這個平臺通過使用cocktail抗體孵育血細胞，進行密度梯度離心，收集含CTC的細胞懸液，然后使用基于大小的HDM芯片進行過濾富集CTC并轉(zhuǎn)移到微管中，然后使用細胞計數(shù)器衡量細胞大小[26], Kim等[27]抽取膀胱癌患者外周血15mL,使用Smart BiopsyTM系統(tǒng)分離CTC，5 mL用于CTC計數(shù)，10 mL進行體外培養(yǎng)并使用Urovysion FISH法對培養(yǎng)的CTC進行分析，發(fā)現(xiàn)PT1增加到PT4階段CTC總數(shù)量有增加趨勢，同一階段CTCs的免疫表型也表現(xiàn)廣泛分布，在27例患者中，20例(74.1%)、14例(51.9%)和20例(74.1%)在第3、7、17號染色體擴增。9例(33.3%)第3和第7染色體擴增。16例(59.3%)第3和第17染色體擴增和9例(33.3%)出現(xiàn)7號和17號染色體擴增。單獨擴增的患者中，17例(63.0%)符合Urovysion FISH陽性標(biāo)準(zhǔn)，9p21純合性缺失。在不同的患者組中，來源于19例(70.4%)患者培養(yǎng)的CTC中有超過12個細胞符合Urovysion FISH陽性標(biāo)準(zhǔn)，這是首次將FISH Urovysion應(yīng)用于膀胱癌CTCs的培養(yǎng)，可作為確定其來源和分析染色體異常的有效的第一步。將該平臺主要考慮CTC的大小性質(zhì)，但同時也考慮CTC免疫學(xué)特性和其它物理特性，可以在一定程度上有望提高CTC檢測的靈敏度和特異度，但是需要大量抗體孵育，過程相對繁瑣，對于技術(shù)人員要求較高，需要進一步研究驗證。

無標(biāo)記高通量成像技術(shù)克服了過濾和微流控?zé)o法捕獲的比白細胞小的CTC的限制，克服免疫親和方法的局限性，如Epic CTC平臺和Accucyte-cyte Finder，Epic CTC平臺是對血樣進行紅細胞裂解、離心后收集有核細胞，將有核細胞分散到玻片上進行自動免疫熒光染色，使用Epic的快速熒光掃描法和形態(tài)學(xué)算法分析每個有核細胞，區(qū)分CTC與白細胞，可以對感興趣的CTC進行下游遺傳分析，方便建立樣本庫，但需要到專業(yè)平臺由專業(yè)人員處理，該平臺也不能將存活的CTC和死亡CTC區(qū)分開來[28]。另一種高通量成像方法Accucyte-cyte Finder不需血樣預(yù)處理，可以減少潛在CTC丟失，通過密度離心分離CTC和白細胞、將收集的有核細胞分散到玻片上進行自動多參數(shù)熒光染色，然后進行圖像掃描分析，挑選感興趣的CTC進行下游分析，這種基于密度富集有核細胞方法不考慮大小和細胞表面標(biāo)記的表達，該平臺不僅可以識別CTC而且可以發(fā)現(xiàn)CTC上新的靶標(biāo)[29]， Chalfin 等[30]采用Accucyte-cyte Finder檢測38例不同分期的膀胱癌患者CTC，在肌層浸潤性膀胱癌(muscle-invasive bladder cancer，MIBC):7/12(58%), NMIBC：2/8(25%)，轉(zhuǎn)移性膀胱癌：6/9(67%)。在NMIBC患者均未檢出EpCAM(+)CTCs，MIBC 患者2例(17%)檢出EpCAM(+)CTCs。轉(zhuǎn)移性EpCAM(+)CTCs更多。結(jié)果表明BC在各期患者中均能檢測到CTCs，檢測到CTCs表現(xiàn)出細胞大小和EpCAM表達的表型多樣性。在NMIBC患者和MIBC患者中均檢測EPCAM陰性CTCs，但是高通量成像技術(shù)需要使用大量抗體對每個有核細胞進行染色鑒別，才能完成CTC的計數(shù)和鑒定，成本相對較高，另外該平臺也難以區(qū)分血樣中活著的CTC和死CTC，處理時間也相對長，以上各種檢測技術(shù)不斷成熟，但是不同CTC檢測方法在檢出率、回收率，純度，成本、樣本處理速度等方面有很大差異、對專業(yè)技術(shù)人員，細胞的生物學(xué)特性有較嚴(yán)格的要求，而溶瘤病毒法是利用攜帶熒光蛋白基因的溶瘤病毒能夠特異性感染腫瘤細胞并在其內(nèi)高表達熒光蛋白，然后通過熒光顯微鏡、流式細胞儀等成像系統(tǒng)進行檢測，可以檢測出更全面的CTC類型，包括上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)換的CTC，干細胞樣CTC，傳統(tǒng)類型CTC，僅檢測活的CTC，可以克服免疫親和法檢測死細胞的障礙，可以減少抗體孵育的步驟，使成本大大減少，另外操作簡單，對技術(shù)人員、細胞大小形態(tài)、密度、表面標(biāo)志物的表達未做要求，可以彌補現(xiàn)有其他CTC檢測方法存在的上述缺陷， 溶瘤病毒法靈敏度、特異度高[30-37]，有望推進膀胱癌的早期篩查，診斷，療效檢測，改進臨床分期，檢測微小殘留病灶，預(yù)測治療反應(yīng)和預(yù)測預(yù)后，以及基于患者分層的個體化治療。

2 溶瘤病毒聯(lián)合CTC的臨床應(yīng)用

2.1 溶瘤病毒聯(lián)合CTC對腫瘤進行篩查診斷CTC作為標(biāo)志物與疾病的診斷密切相關(guān)，Xiao等[31]收集63例肺癌患者外周血6 mL,紅細胞裂解后，利用MOI=2的11型端粒酶腺病毒感染，固定染色后使用熒光顯微鏡及成像系統(tǒng)根據(jù)染色情況和形態(tài)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)進行檢測，結(jié)果此CTC檢測系統(tǒng)的敏感性和特異性分別為89%(56/63)和90%(35/39)。肺腺癌、非小細胞癌和小細胞癌的CTC檢測陽性率分別為84%(32/38)、92%(12/13)和100%(12/12), 初步證實腺病毒檢測CTC是一種敏感、特異、簡便無創(chuàng)的肺癌診斷方法，同樣在肺癌中，Togo等[32]使用腺病毒OBP-1101結(jié)合熒光顯微鏡成像系統(tǒng)檢測123例不同病理分期非小細胞肺癌患者血CTC,對Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者的檢測的敏感性分別為59.6%、40.0%、85.7%和75.0%，結(jié)果表明溶瘤腺病毒OBP-1101是高度敏感的CTC檢測系統(tǒng)，可作為NSCLC患者早期診斷的有效篩選工具。而Xu等[34]使用腺病毒探針檢測黑色素瘤體外模型中CTC，在細胞系中檢測的敏感性為88.7%，特異性為99.9%。上述使用不同的溶瘤病毒檢測CTC的敏感度、特異度都很高，因此，使用溶瘤病毒檢測CTC有望成為癌癥患者的早期篩查診斷方法。

2.2溶瘤病毒聯(lián)合CTC對腫瘤進行分期分級目前分期系統(tǒng)主要采用TNM分期，2010年將CTC納入乳腺癌分期cM0i(+),新發(fā)布的一項研究證實CTC計數(shù)及分型與非小細胞肺癌(Non-small cell lung cancer，NSCLC)的TNM分期及轉(zhuǎn)移相關(guān)[38]，為了探索CTC與腫瘤分期相關(guān)性，Zhang等[33]收集不同分期肺癌患者外周血4 mL，非小細胞肺腺癌52例(76.5%)，非小細胞肺鱗癌16例(84.2%)，小細胞肺癌9例(69.2%)，對40例肺腺癌分別用oHSV1-hTERT-GFP法和cellsearch法檢測, oHSV1-hTERT-GFP法陽性率70%，cellsearch法陽性率25%，數(shù)據(jù)顯示使用oHSV1-hTERT-GFP法檢測CTC更敏感，且不同病理類型CTC數(shù)目不同，CTC數(shù)目M1>N+M0>N0M0,證實使用oHSV1-hTERT-GFP法檢測CTC，可以實現(xiàn)對肺癌患者進行分期分級。因此，隨著病毒法的引入，通過CTC計數(shù)進行癌癥患者分期分級，并輔助TNM分期實現(xiàn)患者的風(fēng)險分層，從而進一步實現(xiàn)腫瘤患者精準(zhǔn)個體化治療。

2.3溶瘤病毒聯(lián)合CTC進行腫瘤療效監(jiān)測在腫瘤治療前后進行CTC計數(shù)，基因組分析可以評估治療效果以及藥物的敏感性[39-40]。Ju等[41]使用端粒酶腺病毒檢測2例肌層浸潤性膀胱癌患者，患者1的CTC數(shù)目在放療前0，放療后數(shù)量202個CTC/mL,該患者最終死亡，患者2放療前631個CTC/mL，放療后194個CTC/mL，較放療前明顯減少，連續(xù)監(jiān)測CTC可以評估治療療效，并獲取輔助治療的膀胱癌患者的管理信息，使用病毒法檢測CTC進行療效監(jiān)測初步顯示了可行性，但是要更好的評估治療療效，不能僅停留在CTC計數(shù)上，應(yīng)進一步分析CTC的分子特征。Xu等[34]使用溶瘤病毒檢測黑色素瘤患者中的CTC時發(fā)現(xiàn)BRAF突變狀態(tài)與CTC顯著增加有關(guān)，化療后不再發(fā)現(xiàn)BRAF突變，BRAF突變狀態(tài)與原發(fā)腫瘤吻合，證實了CTC的惡性來源，可以評估連續(xù)使用BRAF靶向藥患者的疾病狀況，判斷疾病進展，并不斷追蹤患者的基因變化可以實現(xiàn)進一步精準(zhǔn)治療，所以，在治療前后使用溶瘤病毒檢測CTC數(shù)量變化，并在其基礎(chǔ)上分析CTC相關(guān)基因變化，并與原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移灶基因位點比對，可以及時判斷治療療效，調(diào)整治療方案，從而實現(xiàn)精準(zhǔn)治療[42]。

2.4溶瘤病毒聯(lián)合CTC對腫瘤進行預(yù)后評估可使用CTC作為標(biāo)記物對腫瘤患者進行預(yù)后評估，判斷無進展生存，腫瘤特異性存活，以及腫瘤的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。Igawa等[43]使用腺病毒OBP-401法檢測30例小細胞肺癌患者放化療前后外周血活的CTCs，陽性率29/30(96%)。治療前<2細胞/7.5mL組(基線)中位生存期明顯長于治療前≥2/7.5 mL組(分別為14.8個月和3.9個月，P=0.007)。多因素分析結(jié)果表明，基線CTC計數(shù)是影響生存時間的獨立預(yù)后因素。在對治療取得部分療效的患者中，兩周期化療后CTC計數(shù)<2/7.5 mL的患者與有≥2/7.5 mL的患者相比，中位無進展生存期更長(分別為8.3個月和3.8個月；P=0.07)。因此，可以通過OBP-401法檢測小細胞肺癌患者的CTCs，認為治療前的CTC計數(shù)似乎是一個較強的預(yù)后因素。另外基于CTC突變位點的檢測可以判斷不良預(yù)后，在結(jié)直腸癌患者中，Shigeyasu等[35]使用溶瘤病毒OBP-401檢測CTC時認為KRAS、BRAF基因突變在肝轉(zhuǎn)移的頻率顯著高于原發(fā)腫瘤，KRAS 、BRAF基因突變狀態(tài)的遺傳分析可以預(yù)測KRAS野生型結(jié)直腸癌患者的轉(zhuǎn)移潛能，其突變狀態(tài)與不良預(yù)后顯著相關(guān)。

2.5溶瘤病毒聯(lián)合CTC對腫瘤進行個體化治療手術(shù)切除，圍手術(shù)期放化療是目前癌癥患者的主要治療策略，但是仍有大量患者尤其是晚期患者無法從放化療中獲益，或者化療耐藥后沒有進一步的治療策略，在CTC計數(shù)的基礎(chǔ)上，對癌癥患者的分子分析可以實現(xiàn)精準(zhǔn)靶向治療和免疫治療。Hwang 等[44]使用前列腺特異性腺病毒Ad5/35E1aPSESE4檢測前列腺癌患者CTC時，對分離的CTC進行測序發(fā)現(xiàn)MMP9、Coffilin1、FCER1G、GPX1、SPP1、CD63、EMMPRIN、CD44等基因過表達，認為對基因組分析可以了解耐藥機制，評估藥物敏感性，進一步指導(dǎo)治療決策， Shigeyasu等[35]使用流式細胞儀分選OBP401感染的表達GFP的上皮細胞，間充質(zhì)細胞，上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)換的CTC,通過直接測序或者突變特異性PCR的方法檢測到結(jié)直腸癌患者外周血中CTC上的KRAS、BRAF、KIT突變，可以用于監(jiān)測結(jié)直腸癌患者出現(xiàn)對EGFR抗體的西妥昔單抗的耐藥性，根據(jù)已檢測的基因突變進一步調(diào)整治療方案用于下一步個體化治療?；诖?，對CTC的研究有助于提供新靶點，我們還可以發(fā)現(xiàn)新的免疫檢查點指導(dǎo)靶向免疫治療，Anantharaman等[28]發(fā)現(xiàn)PD-L1+不僅存在于CK-/CD 45-也存在 CK+/CD 45-的CTCs上，PD-L1+/CD 45-CTC負擔(dān)高、凋亡CTCs負擔(dān)低的患者總體生存率較低,這可能具有指導(dǎo)檢查點抑制劑免疫療法的潛力，這些免疫療法已被確定為具有活性，在這部分患者中通常具有持久的反應(yīng)[45]，因此，我們可以使用溶瘤病毒和流式細胞儀以及其他分選設(shè)備分選出病毒感染的表達熒光蛋白的細胞進行分子表征和單細胞測序發(fā)現(xiàn)新的治療靶點和免疫檢查點從而實現(xiàn)個體化治療。

3 溶瘤病毒檢測CTC在膀胱癌中的應(yīng)用展望

目前膀胱癌CTC檢測技術(shù)持續(xù)發(fā)展，尚未標(biāo)準(zhǔn)化，各種檢測技術(shù)各有優(yōu)缺點，但是一些檢測技術(shù)間可以相互彌補一些缺陷，各種類型的重組溶瘤病毒相繼被開發(fā)用于檢測其他實體瘤患者CTC。評估CTC與臨床價值的相關(guān)性的研究仍處于起步階段，但是初步研究結(jié)果表明溶瘤病毒檢測膀胱癌患者CTC表現(xiàn)出較高的敏感性，特異性，且具有不依賴抗體就可以檢測傳統(tǒng)類型CTC以及CTC亞群，不檢測已經(jīng)死亡的CTC,使檢測CTC類型更有意義， 如前文所述，在2例BC患者中，Ju等[41]在放療前后使用溶瘤腺病毒檢測CTC，放療后，1例CTC增多的患者最終死亡，另1例CTC明顯減少的患者預(yù)后相對較好，結(jié)果表明可以用此方法在CTC計數(shù)層面進行膀胱癌患者的療效追蹤和預(yù)后評估。但是要發(fā)現(xiàn)疾病根源，對疾病深入研究不僅只停留于CTC計數(shù)，更要從單細胞測序?qū)用孢M行分子分析，使用熒光溶瘤病毒結(jié)合流式細胞儀等光學(xué)成像設(shè)備分選CTC，進行單細胞測序，分析CTC亞群間、原發(fā)灶，轉(zhuǎn)移灶間的基因組，轉(zhuǎn)錄組，表觀遺傳組間的差異，充分挖掘CTC的生物學(xué)信息有望推進膀胱癌患者精準(zhǔn)診治[42]，如在結(jié)直腸癌中的一項研究，Su等[8]使用陰性富集熒光原位雜交(SE-iFISH)在一名健康女性中檢測出CTC, 并進行外顯子測序判斷癌癥來源從而實現(xiàn)結(jié)直腸癌早期篩查早診早治。在膀胱癌中，Yang等[46]在3個膀胱癌患者標(biāo)本中對59個細胞進行單細胞測序，在膀胱癌干細胞中鑒定了21個關(guān)鍵的突變基因，其中6個新的突變基因ETS1，GPRC5A，MKL 1，PAWR，PITX 2和RGS9BP在BC中未見報道，并發(fā)現(xiàn)ARIDA 1、GPRC5A和Mll2在維持膀胱癌干細胞特性起著至關(guān)重要的作用，基于單細胞突變模式的腫瘤細胞分子分型有望提高BC診治的準(zhǔn)確率，新的突變基因的發(fā)現(xiàn)為膀胱癌的靶向治療提供了更多的可能性。也可像使用溶瘤病毒檢測胃癌患者腹腔沖洗液中的癌細胞一樣利用溶瘤病毒檢測膀胱癌患者腹腔沖洗液中的癌細胞來判斷膀胱癌患者有無轉(zhuǎn)移情況[47]。

因此，在膀胱癌的研究中，使用溶瘤病毒檢測CTC,進行CTC計數(shù)和CTC單細胞測序, 充分挖掘CTC的生物學(xué)信息有望推進膀胱癌患者早期診斷、分期分級、療效評估，預(yù)測預(yù)后，進而實現(xiàn)個體化治療。將來可利用新型溶瘤病毒檢測膀胱癌患者CTC[48-49]，并利用CTC體外模型、異種移植模型以及對膀胱癌臨床樣本進行驗證?？傊褂萌芰霾《緳z測CTC的技術(shù)在推進膀胱癌的精準(zhǔn)醫(yī)療中有非常廣闊臨床應(yīng)用前景。