汪定軍 陳 茜 石 蕾

肺癌是最常見的惡性腫瘤之一，由于肺癌起病隱匿，早期病變難以發(fā)現(xiàn)[1]，約70.0%的肺癌患者在首次就診時已屬晚期，使得生存率低于30%[2-3]。肺癌的臨床表現(xiàn)主要有咳嗽、咳血、胸痛、發(fā)熱，隨著病情的進(jìn)展，可侵犯胸膜引起胸腔積液，也可引起阻塞性肺部炎癥[4]。肺癌的早期診斷與檢測有助于對肺癌高危人群進(jìn)行普查、診斷、鑒別診斷及療效觀察，對病情判斷與預(yù)后預(yù)測都有重要的價值[5-7]。趨化因子可與細(xì)胞表面的受體相互作用，在機(jī)體的免疫、發(fā)育、正常生理反應(yīng)中發(fā)揮重要作用[8-9]。巨噬細(xì)胞炎性蛋白(macrophage inflammatory protein，MIP)-3α又稱為CCL3，能夠趨化多種巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞，在多種惡性腫瘤中呈現(xiàn)高表達(dá)[10]。IL-8也稱為CXCL8，可趨化腫瘤組織中的血管內(nèi)皮細(xì)胞，通過促進(jìn)血管形成來推進(jìn)腫瘤的生長，并可誘導(dǎo)腫瘤轉(zhuǎn)移。Fractalkine也稱為CX3CL1，是CX3C家族的唯一成員，在肺癌患者中的表達(dá)量顯著高于正常人群，且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈現(xiàn)正相關(guān)性[11]。本文具體探討了血清趨化因子在肺癌診斷及預(yù)后中的應(yīng)用，以期建立一種有效的診斷肺癌與預(yù)測預(yù)后的方法?，F(xiàn)總結(jié)報告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

研究時間為2015年2月到2017年9月，采用回顧性總結(jié)研究方法，選擇我院診治的肺癌患者72例(肺癌組)、肺炎患者72例(肺炎組)與健康人72例(對照組)。納入標(biāo)準(zhǔn)：醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)了此次研究；所有入選者的臨床病例資料完整；都有明確的病理檢查結(jié)果；肺癌組術(shù)前經(jīng)胸片、CT檢查發(fā)現(xiàn)肺部占位，術(shù)后病理等綜合診斷為肺癌；年齡在20～80歲之間；檢測前未接受過手術(shù)、激素、放療、化療等治療；入選者在自愿條件下簽署了知情同意書；無嚴(yán)重心肺、肝腎等疾患。排除標(biāo)準(zhǔn)：妊娠與哺乳期婦女；臨床資料與病理學(xué)資料缺項者；合并其他系統(tǒng)腫瘤病史；合并心、肺、肝、胃等重要臟器的疾病。

對照組：男性40例，女性32例；年齡最小28歲，最大77歲，平均年齡(58.33±3.11)歲，體重指數(shù)(22.48±1.28)kg/m2。肺炎組：男性41例，女性31例；年齡最小29歲，最大78歲，平均(59.11±2.879)歲，平均體重指數(shù)(22.10±2.19)kg/m2。肺癌組：男性38例，女性34例；年齡最小28歲，最大77歲，平均年齡(58.23±4.11)歲，平均體重指數(shù)(22.83±1.23)kg/m2；臨床分期：Ⅱ期38例，Ⅲ期28例，Ⅳ期6例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：無轉(zhuǎn)移13例，有轉(zhuǎn)移59例；分化程度：低分化24例，中分化36例，高分化12例。3組的性別、年齡、體重指數(shù)對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 檢測指標(biāo)與方法

采集所有入選者的空腹肘靜脈全血3～6 ml，平分為2份，第1份樣本采用離心機(jī)在4 ℃ 離心(3 000 r/min 離心10 min)后，取上層血清。采用酶聯(lián)免疫法檢測血清MIP-3α、IL-8、Fractalkine水平，按照試劑說明書進(jìn)行操作(美國SIGMA公司)。第2份樣本不進(jìn)行抗凝，采用全自動血液分析儀檢測外周血白細(xì)胞計數(shù)。

1.3 隨訪方式

隨訪采用電話、信訪相結(jié)合的方式，了解肺癌組患者的生存情況。

1.4 統(tǒng)計方法

應(yīng)用SPSS 22.00 for windows軟件包對計量數(shù)據(jù)與計數(shù)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，影響因素采用多因素logistic回歸分析，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差、率等表示計量數(shù)據(jù)與計數(shù)數(shù)據(jù)，計量數(shù)據(jù)與計數(shù)數(shù)據(jù)的對比方法為t檢驗與卡方分析，檢驗水準(zhǔn)為α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 外周白細(xì)胞計數(shù)對比

肺癌組外周白細(xì)胞計數(shù)為(12.98±2.88)×109/l，肺炎組外周白細(xì)胞計數(shù)為(13.30±2.48)×109/l，對照組外周白細(xì)胞計數(shù)為(18.87±4.00)×109/l；肺癌組的外周白細(xì)胞計數(shù)顯著低于對照組(t=10.14，P<0.05)，肺炎組的外周白細(xì)胞計數(shù)顯著低于對照組(t=10.04，P<0.05)，肺癌組與肺炎組對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=0.714，P>0.05)。

2.2 趨化因子含量對比

肺癌組與肺炎組的血清MIP-3α、IL-8、Fractalkine水平都高于對照組，肺癌組高于肺炎組，對比差異都有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 3組趨化因子含量對比(±s，pg/ml)

表1 3組趨化因子含量對比(±s，pg/ml)

組別例數(shù)MIP-3αIL-8Fractalkine肺癌組7211.38±1.44①②5.68±1.44①②118.30±11.52①②肺炎組729.44±1.41①4.21±1.47①89.77±10.24①對照組727.20±2.192.09±0.8861.49±12.98

注：①與對照組對比，P<0.05；②與肺炎組對比，P<0.05。

2.3 隨訪預(yù)后

隨訪至2018年9月，肺癌組中患者死亡6例，存活66例，死亡率為8.3%。

2.4 肺癌患者預(yù)后影響因素分析

在肺癌組72例患者中，以預(yù)后死亡作為因變量，以檢測指標(biāo)與病理學(xué)特征為自變量，多因素logistic回歸分析淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、組織學(xué)分化、MIP-3α、IL-8、Fractalkine為影響患者預(yù)后死亡的主要獨立危險因素(P<0.05)。見表2。

3 討論

肺癌是全球死亡率最高的惡性腫瘤之一，當(dāng)前在我國的發(fā)病率逐年增加[12]。肺癌早期癥狀隱匿，缺乏有效的敏感而特異的早期診斷方法，多數(shù)患者就診時已是晚期，預(yù)后比較差[13]。而在發(fā)病早期，很多患者常會被誤診為肺炎等疾病。當(dāng)前肺癌的病因尚不十分清楚，其中經(jīng)歷了多步驟、多階段、多因素、多基因變異參與的復(fù)雜的生物學(xué)演變過程，發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜[14]。本研究顯示肺癌組與肺炎組的外周白細(xì)胞計數(shù)顯著低于對照組(P<0.05)，肺癌組與肺炎組對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。從機(jī)制上分析，隨著肺癌、肺炎病情的發(fā)展，在凝血酶、花生四烯酸代謝產(chǎn)物的刺激下，可激活血小板并形成聚集，導(dǎo)致白細(xì)胞計數(shù)減少[15]。

表2 影響肺癌患者預(yù)后的影響因素(n=72)

在肺癌的發(fā)生機(jī)制中，趨化因子和趨化因子受體具有重要的作用，特別是肺癌細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞釋放出的特定趨化因子，可以誘導(dǎo)肺癌相關(guān)的白細(xì)胞成分的表達(dá)和分布，從而調(diào)節(jié)肺癌細(xì)胞的生長[16]。本研究顯示肺癌組與肺炎組的血清MIP-3α、IL-8、Fractalkine水平都高于對照組，肺癌組高于對照組，對比差異都有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。MIP-3α位于染色體17q12 上，也趨化T細(xì)胞、NK細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等腫瘤殺傷細(xì)胞，其在肺癌患者組織中表達(dá)增高，也與肺癌侵襲、浸潤及患者的預(yù)后密切相關(guān)，可促進(jìn)肺癌細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移[17]。IL-8是一種促血管生成因子，自分泌或旁分泌方式促進(jìn)肺癌細(xì)胞增殖，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)性更強(qiáng)，可趨化并刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞生長的活性，從而參與肺癌的血管形成和轉(zhuǎn)移。Fractalkine可增加瘤細(xì)胞之間的黏附，誘導(dǎo)腫瘤血管生成，介導(dǎo)腫瘤的浸潤以及轉(zhuǎn)移[18]。

肺癌的早中期發(fā)病過程較為隱匿，癥狀缺乏特異性，使得肺癌的早期檢出率偏低，臨床上誤診和漏診現(xiàn)象比較常見。而隨著分子遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的研究與不斷發(fā)展，當(dāng)前許多學(xué)者越來越深入對肺癌在分子水平致癌機(jī)制進(jìn)行了研究[19]。手術(shù)為早中期肺癌的主要治療方法，也是唯一的根治性方法，但是很多患者在術(shù)后容易復(fù)發(fā)，且手術(shù)創(chuàng)傷也有一定的應(yīng)激作用，使得患者的死亡率一直居高不下。本研究隨訪至今，肺癌組中患者死亡6例，存活66例，死亡率為8.3%；多因素logistic回歸分析淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、組織學(xué)分化、MIP-3α、IL-8、Fractalkine都為影響患者預(yù)后死亡的主要獨立危險因素(P<0.05)。從機(jī)制上分析，趨化因子參與了免疫介導(dǎo)的惡性腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移[20]。MIP-3α可介導(dǎo)腫瘤組織炎癥細(xì)胞的浸潤以及腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移等過程，從而降低機(jī)體對腫瘤的免疫殺傷作用、促進(jìn)腫瘤生長[21]。IL-8、Fractalkine也能促進(jìn)肺癌細(xì)胞的增殖，并與肺癌的總體生存率低和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，可作為疾病的獨立預(yù)后因素[22-23]。不過任何單一的指標(biāo)對檢測肺癌的效果都不能十分滿意，各種指標(biāo)的聯(lián)合檢測有助于提高肺癌的早期診斷準(zhǔn)確率[24]。相關(guān)研究也顯示趨化因子之間具有協(xié)同性、重疊性等特點，聯(lián)合檢測多種趨化因子，可對肺癌早期進(jìn)行整體而客觀的評價[25]。

總之，MIP-3α、IL-8、Fractalkine等趨化因子聯(lián)合現(xiàn)有的腫瘤標(biāo)志物，可用于診斷早期肺癌與預(yù)測預(yù)后。