葉 芬 王麗萍

乳腺癌已成為我國女性最常見的惡性腫瘤，其新發(fā)的病例占女性惡性腫瘤總數(shù)的25%[1]。人表皮生長因子受體2(human epidermal growth factor receptor 2，HER-2)對判斷乳腺癌的進(jìn)展和預(yù)后具有重要的意義[2]。HER-2高表達(dá)的乳腺癌患者中，其癌細(xì)胞增殖能力更強(qiáng)，同時(shí)也具有更高的轉(zhuǎn)移性，容易導(dǎo)致化療耐受等，嚴(yán)重影響了患者的預(yù)后情況[3]。目前對于HER-2的檢查方法主要通過術(shù)后切除的病理標(biāo)本進(jìn)行免疫組化評估，若術(shù)前即可通過無創(chuàng)的方法預(yù)測HER-2的表達(dá)情況將有效提高對乳腺癌的早期診斷能力[4]。超聲檢查是應(yīng)用于臨床的簡單篩查方式，其能了解腫瘤的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，血液供應(yīng)和周圍組織之間的關(guān)系[5]。但目前乳腺癌中超聲顯像特征與乳腺癌組織HER-2表達(dá)的關(guān)系仍不十分清楚，因此，本研究旨在探討超聲成像乳腺癌的特點(diǎn)，并分析其與乳腺癌組織HER-2表達(dá)的相關(guān)性，為乳腺癌的診斷其提供更多的臨床證據(jù)。

1 材料與方法

1.1 病例和分組

回顧性分析2017年1月至2018年9月于我院診治的女性乳腺癌患者共84例，納入標(biāo)準(zhǔn)：①確診為乳腺癌的患者；②所有患者均術(shù)前進(jìn)行彩超檢查，并具有明確的病理檢查結(jié)果；③術(shù)前未進(jìn)行放療和化療；排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并懷孕或哺乳期的女性;②沒有通過超聲發(fā)現(xiàn)腫瘤檢查;③超聲圖像采集并不理想；④缺乏完整的病理學(xué)和組織學(xué)數(shù)據(jù)；⑤合并局部嚴(yán)重解剖異常。共有84例患者符合上述要求標(biāo)準(zhǔn)，年齡30～71歲，平均年齡(48.2±6.4)歲。其中，63例為浸潤癌，11例混合癌，10例為粘液癌。

1.2 檢測方法

超聲檢查：采用iuElite彩色多普勒超聲診斷儀進(jìn)行乳房檢查。患者處于仰臥位或左右側(cè)臥位，探頭頻率為6.0～15 MHz，用于乳房和腋窩區(qū)域的全面掃描。在發(fā)現(xiàn)腫瘤后，應(yīng)進(jìn)行多次掃描以清楚地顯示腫塊的超聲成像。檢測腫塊的部位，數(shù)量，形狀和大小(多節(jié)段觀察，最大直徑采集)，病變的外周和內(nèi)部血液，邊緣毛刺與否，后部回聲與否，鈣化和腋窩淋巴結(jié)腫大。每例患者均由兩名高年資醫(yī)生通過評估，最后經(jīng)過討論達(dá)成統(tǒng)一意見。

免疫組化：采集與病理結(jié)果一致的組織切片，由兩位經(jīng)驗(yàn)豐富的病理學(xué)家獨(dú)立判斷，取病理組織并在切片中用石蠟包埋。二甲苯和乙醇用于檸檬酸修復(fù)脫蠟2 min30 s，PBS成膜后，在水浴箱中加入稀釋的第一抗性，在37 ℃下孵育20 min，抗稀釋，37 ℃攪拌20 min；PBS沖洗3次;滴加DAB色液并在顯微鏡下觀察，蘇木精再次染色，0.1%鹽酸醇用于分化;經(jīng)沖洗后，采用二甲苯用于玻璃化和橡膠安裝。

1.3 資料收集和評價(jià)方法

超聲顯像特征收集：記錄乳腺癌包塊的邊緣是否清晰，腫瘤大小、邊緣是否清晰、形狀是否規(guī)則、腫瘤縱橫比、是內(nèi)部鈣化、內(nèi)部回聲、后方回聲衰減和血供分級情況。

免疫組化分析：在200倍光學(xué)顯微鏡下觀察，每個(gè)樣本中隨機(jī)選擇5個(gè)視圖，從每個(gè)切片到記錄細(xì)胞染色的情況。HER-2在乳腺癌細(xì)胞中染色，陰性為乳腺癌細(xì)胞無著色或<1%癌細(xì)胞著色；弱陽性：弱著色或細(xì)胞膜著色<10%；陽性：著色略顯清晰完整，著色細(xì)胞>10%；強(qiáng)陽性：癌細(xì)胞膜完全強(qiáng)著色和著色細(xì)胞>10%，將陰性和弱分為低表達(dá)，陽性和強(qiáng)陽性為高表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)均應(yīng)用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料計(jì)數(shù)采用百分比表示，比較采用卡方檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析，P>0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié)果

2.1 免疫組化結(jié)果分析

84例女性乳腺癌患者中，其中HER-2表達(dá)陰性共21例，弱陽性共26例，陽性29例，強(qiáng)陽性8例，其中低表達(dá)56.0%，高表達(dá)44%。

2.2 超聲現(xiàn)象分析

其中納入的84例女性乳腺癌患者中，平均腫瘤大小為(2.3±0.7)cm，而37例邊緣清晰(44.0%)，44例(50.0%)腫瘤形狀規(guī)則，內(nèi)部回聲均勻的29例(34.5%)，后方回聲衰減的35例(41.7%)，內(nèi)部存在鈣化的41例(48.8%)，血供分級為1～2級的42例(50.0%)。

2.3 超聲顯像特征與乳腺癌組織HER-2表達(dá)的關(guān)系

其中超聲特征中乳腺癌的HER-2表達(dá)水平與腫瘤大小及內(nèi)部鈣化呈顯著相關(guān)性(P<0.05)，而乳腺癌的HER-2表達(dá)水平與邊緣情況、腫瘤形狀、腫瘤縱橫比、內(nèi)部回聲、后方回聲衰減和血供分級無顯著的相關(guān)性(P>0.05)，見表1。

表1 超聲顯像特征與乳腺癌組織HER-2表達(dá)的關(guān)系(例，%)

3 討論

近年來，由于生活方式的改變，乳腺癌的發(fā)病率呈上升趨勢，已成為嚴(yán)重危害女性身心健康的腫瘤之一，發(fā)病年齡較小[6]。早期發(fā)現(xiàn)，準(zhǔn)確診斷和及時(shí)治療可以改善患者的預(yù)后和生存期[7]。隨著診斷技術(shù)的發(fā)展和普及，乳腺癌的檢出率有所提高。由于超聲技術(shù)探頭頻率的不斷提高，超聲檢查的分辨率逐漸提高，圖像更清晰，有助于區(qū)分良惡性腫瘤病變[8]。腫瘤的分子生物學(xué)特征決定了腫瘤組織的結(jié)構(gòu)和形態(tài)，對臨床治療和預(yù)后判斷具有指導(dǎo)意義[9]。然而，目前腫瘤組織分子標(biāo)志物與影像學(xué)表現(xiàn)的相關(guān)性尚不清楚，因此本文主要討論和分析乳腺癌超聲成像特征與乳腺癌組織HER-2表達(dá)的相關(guān)性。

人表皮生長因子受體(HER-2)是目前研究越來越深入的分子標(biāo)志物[8]。HER-2影響腫瘤細(xì)胞分化，增殖，血管生成和轉(zhuǎn)移的途徑[10]。大量研究結(jié)果還表明，HER-2與乳腺癌的發(fā)生、增殖和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，部分乳腺癌過度表達(dá)通常表明預(yù)后不良，復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移率高[11]。本研究發(fā)現(xiàn)，其中腫瘤大小≥2 cm的乳腺癌組織其HER-2陽性表達(dá)水平顯著增高，表明了在超聲特征中，HER-2與腫瘤的增殖密切相關(guān)，本研究結(jié)果也與既往研究[12]結(jié)果相接近。而乳腺癌的HER-2表達(dá)水平與邊緣情況、腫瘤形狀、腫瘤縱橫比、內(nèi)部回聲、后方回聲衰減和血供分級沒有顯著的相關(guān)性。但我們的研究中進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)了乳腺癌中的內(nèi)部鈣化的出現(xiàn)與HER-2的陽性表達(dá)水平存在顯著的正相關(guān)，這也顯示了HER-2可能參與乳腺癌組織的局部代謝情況。乳腺癌的鈣化通常被認(rèn)為是局部壞死細(xì)胞的鈣化或由腫瘤細(xì)胞代謝引起的鈣飽和度[13]。因此，HER-2陽性的乳腺癌更容易出現(xiàn)惡性鈣化的跡象。

由于本研究所納入的病例比較少，對于明確HER-2與臨床特征的關(guān)系仍需要進(jìn)一步納入更多臨床病例進(jìn)行探討。綜合上述，乳腺癌組織中HER-2的表達(dá)水平與腫瘤大小及內(nèi)部鈣化存在密切的關(guān)系。因此，對于在未來超聲的檢查中，根據(jù)超聲的特征具有潛在提高對乳腺癌病理特征的判斷能力。