王 毅，權(quán) 琳

0 引 言

非小細(xì)胞肺癌是發(fā)病率以及死亡率均較高的惡性腫瘤疾病，并且呈現(xiàn)上升趨勢，而肺癌患者中非小細(xì)胞肺癌占比較高［1］。非小細(xì)胞肺癌主要的標(biāo)準(zhǔn)治療是以鉑類藥物為基礎(chǔ)進(jìn)行的雙藥化療方式，但該治療方式只能對患者的生存質(zhì)量狀況進(jìn)行改善，治療的總有效率較低［2-3］。在臨床中吉非替尼的治療效果與傳統(tǒng)的化療藥物比較效果更加顯著，能夠有效提升患者的生存期并顯著改善患者預(yù)后［4］。本研究通過非小細(xì)胞肺癌患者不同用藥方式的比較，探討對患者T細(xì)胞亞群及細(xì)胞因子的影響，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料回顧性分析2017年1月至2018年12月我院接收的84例非小細(xì)胞肺癌患者臨床資料，依據(jù)治療方式的不同分為吉非替尼組、培美曲塞聯(lián)合順鉑組以及三藥聯(lián)合組（給予培美曲塞與順鉑聯(lián)合吉非替尼治療），每組各28例。吉非替尼組患者中男19例，女9例，年齡44～73 歲，平均（62.5±5.5）歲，臨床分期Ⅲ期22例、Ⅳ期6例；培美曲塞聯(lián)合順鉑組患者中男17例，女11例，年齡44～73 歲，平均（62.5±5.5）歲，臨床分期Ⅲ期18例、Ⅳ期10例；三藥聯(lián)合組患者中男20例，女8例，年齡43～72歲，平均年齡（62.3±5.7）歲，臨床分期Ⅲ期15例、Ⅳ期13例。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)病理檢查均確診為非小細(xì)胞肺癌。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并骨髓抑制情況嚴(yán)重的患者；腎損害嚴(yán)重的患者；對本研究使用的藥物過敏的患者；曾有精神病史或者精神異常不能配合治療的患者。3 組患者的基本資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 方法

1.2.1 三藥聯(lián)合組給予患者培美曲塞+順鉑聯(lián)合吉非替尼治療的方法，具體服用方法為：第1 天，靜脈滴注500 mg/m2的培美曲塞（生產(chǎn)廠家：海南錦瑞制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H20163005）；第1～3 天，靜脈滴注75 mg/m2的順鉑（生產(chǎn)廠家：云南個舊生物藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H53021740）；第8～21 天口服吉非替尼（生產(chǎn)廠家：英國阿斯利康Limited，國藥準(zhǔn)字J20140142），250 mg/次，1次/d。

1.2.2 吉非替尼組給予患者單獨使用吉非替尼，服用方式：口服，250 mg/次，1次/d。

1.2.3 培美曲塞聯(lián)合順鉑組給予患者使用培美曲塞聯(lián)合順鉑的治療方法，具體為：第1 天，靜脈滴注500 mg/m2的培美曲塞；第1～3 天，靜脈滴注75 mg/m2的順鉑。以上3 組均治療21 d 作為1個周期，共治療2個周期。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 評估3 組患者的T 細(xì)胞亞群水平分別在治療前后抽取3 組患者5 mL 的空腹靜脈血，利用流式細(xì)胞儀對患者T 淋巴細(xì)胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）以及Treg細(xì)胞亞群（CD4+/CD25+）的比例進(jìn)行檢測，比較3 組患者治療前后的T 細(xì)胞亞群水平。

1.3.2 評估3 組患者的細(xì)胞因子水平治療前后3 組患者血清中的白細(xì)胞介素-2（IL-2）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-10（IL-10）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）以及γ 干擾素（IFN-γ）利用免疫磁珠法分別檢測，比較3 組患者治療前后的細(xì)胞因子水平。

1.3.3 治療后不良反應(yīng)的發(fā)生情況統(tǒng)計3組患者治療后不良反應(yīng)的發(fā)生情況，主要包含惡心嘔吐、皮疹、轉(zhuǎn)氨酶異常、骨髓抑制以及腹瀉。比較3組不良反應(yīng)的總發(fā)生率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS 18.0 進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，其中計數(shù)資料以百分率（%）表示，組間比較行χ2檢驗，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較行t檢驗，以P≤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 治療前后的免疫功能比較三藥聯(lián)合組治療后CD3+、CD4+以及CD4+/CD8+水平分別與吉非替尼組、培美曲塞聯(lián)合順鉑組比較顯著升高（P<0.05），3組患者的CD8+、NK 以及CD4+/CD25+水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），見表1。

2.2 治療前后的細(xì)胞因子水平比較三藥聯(lián)合組治療后的IL-2、TNF-α以及IFN-γ水平分別與吉非替尼組、培美曲塞聯(lián)合順鉑組比較顯著升高，IL-6 及IL-10水平與吉非替尼組、培美曲塞聯(lián)合順鉑組比較顯著降低（P<0.05），見表2。

2.3 不良反應(yīng)情況比較吉非替尼組患者中出現(xiàn)惡心嘔吐3例、皮疹3例、轉(zhuǎn)氨酶異常2例、骨髓抑制5例以及腹瀉3例；培美曲塞聯(lián)合順鉑組中出現(xiàn)惡心嘔吐2例、皮疹3例、轉(zhuǎn)氨酶異常1例、骨髓抑制4例以及腹瀉2例；而三藥聯(lián)合組患者中出現(xiàn)惡心嘔吐1例、皮疹2例、轉(zhuǎn)氨酶異常1例、骨髓抑制1例以及腹瀉1例。三藥聯(lián)合組不良反應(yīng)的總發(fā)生率（21.4%）顯著低于吉非替尼組（57.1%）、培美曲塞聯(lián)合順鉑組（42.9%），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

表1 入組非小細(xì)胞肺癌患者治療前后的免疫功能比較（±s）

表1 入組非小細(xì)胞肺癌患者治療前后的免疫功能比較（±s）

與本組治療前比較，*P<0.05；與三藥聯(lián)合組治療后比較，#P<0.05

表2 入組非小細(xì)胞肺癌患者治療前后的細(xì)胞因子水平比較（±s，pg/mL）

表2 入組非小細(xì)胞肺癌患者治療前后的細(xì)胞因子水平比較（±s，pg/mL）

與本組治療前比較，*P<0.05；與三藥聯(lián)合組治療后比較，#P<0.05

3 討 論

人體內(nèi)的抗腫瘤的免疫效應(yīng)主要包含體液免疫以及細(xì)胞免疫兩方面，兩者之間通過相互作用而對腫瘤細(xì)胞進(jìn)行消滅，其中的細(xì)胞免疫為主要免疫效應(yīng)［5］。細(xì)胞免疫主要是指非特異性的細(xì)胞（NK 細(xì)胞）與特異性細(xì)胞（T 淋巴細(xì)胞亞群）介導(dǎo)的免疫反應(yīng)［6］。對患者外周靜脈血的檢測有助于對NK 細(xì)胞與T 淋巴細(xì)胞亞群水平進(jìn)行評估，從而對患者腫瘤細(xì)胞的免疫功能進(jìn)行有效評價，并能在對藥物治療過程中細(xì)胞免疫功能的變化進(jìn)行有效分析［7-8］。NK細(xì)胞是具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞群體的一種，能夠?qū)⒉《靖腥绢惖募?xì)胞或者腫瘤細(xì)胞進(jìn)行直接殺傷，因此NK 細(xì)胞活性的降低或者數(shù)量的減少能夠明顯的降低對于腫瘤細(xì)胞的清除以及殺傷功能，從而導(dǎo)致患者抗腫瘤的功能降低［9-10］。對晚期非小細(xì)胞肺癌患者主要的治療方式為化療治療，該項治療措施能夠有效延長患者的生存期，但同時也會對患者正常的細(xì)胞功能產(chǎn)生一定的損傷，從而使免疫功能得到抑制，不利于患者預(yù)后。

T 淋巴細(xì)胞主要用于對于機(jī)體抗腫瘤的免疫情況進(jìn)行有效的監(jiān)視，其中CD3+T 細(xì)胞代表T 淋巴細(xì)胞的總數(shù)量，從而對細(xì)胞的總體免疫狀態(tài)進(jìn)行有效反應(yīng)；CD4+T細(xì)胞是一種輔助性細(xì)胞，對于機(jī)體內(nèi)抗腫瘤的反應(yīng)起到輔助功能；CD8+T是一種細(xì)胞毒的T細(xì)胞，對于淋巴細(xì)胞以及CD4+T 細(xì)胞進(jìn)行有效的抑制，進(jìn)而對患者免疫的功能進(jìn)行有效的抑制［11-12］。非小細(xì)胞肺癌患者自身機(jī)體免疫力低下，Treg 細(xì)胞的抑制功能相對增強，而使用的藥物同時也作用于Treg，減弱其抑制功能，所以通過CD4+CD25+T 細(xì)胞群代替。Treg細(xì)胞是一種具有獨特免疫調(diào)節(jié)功能的T 淋巴細(xì)胞亞群，根據(jù)相關(guān)研究證實Treg 細(xì)胞具有預(yù)防自身免疫性疾病、維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定以及腫瘤免疫監(jiān)視等功能。該細(xì)胞數(shù)量過多能夠阻礙機(jī)體內(nèi)抗腫瘤免疫應(yīng)答的情況，從而導(dǎo)致患者的免疫力相對較低，因此機(jī)體的免疫功能與Treg 細(xì)胞具有一定的相關(guān)性。

在機(jī)體對腫瘤免疫應(yīng)答的反應(yīng)中，細(xì)胞因子具有至關(guān)重要的調(diào)節(jié)功能。細(xì)胞因子的主要來源為被激活的T 淋巴細(xì)胞等具有免疫活性的細(xì)胞，其中的IFN-γ 主要是由Th1 型細(xì)胞進(jìn)行分泌，具有抗腫瘤的功能，主要通過增加巨噬細(xì)胞表面的表達(dá)受體，進(jìn)而有效促進(jìn)巨噬細(xì)胞的抗體以及免疫復(fù)合物等被腫瘤以及病原體細(xì)胞進(jìn)行包圍。而IL-10 則則主要由Th2 型細(xì)胞進(jìn)行分泌，是細(xì)胞因子合成中的抑制因子，對活化的T細(xì)胞具有顯著的抑制功能，進(jìn)而促使細(xì)胞免疫應(yīng)答的情況得到有效抑制。培美曲塞通過對細(xì)胞復(fù)制過程中葉酸代謝情況進(jìn)行有效的干擾，從而發(fā)揮抗腫瘤的功能，是一種抗葉酸性的化療類藥物。根據(jù)有關(guān)研究表明，培美曲塞對于胸苷酸合成酶具有顯著的抑制功能，同時能夠有效的抑制二氫葉酸還原酶的活性，以上均為葉酸中重要的依賴性的輔助酶，培美曲塞通過以上關(guān)鍵酶的活性而對多個靶點進(jìn)行有效的抑制，進(jìn)而對腫瘤細(xì)胞的合成產(chǎn)生影響［13-14］。

本研究對采用不同治療方式的3組患者比較發(fā)現(xiàn)：三藥聯(lián)合組患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平與吉非替尼組和培美曲塞聯(lián)合順鉑組比較顯著升高（P<0.05），3 組患者的CD8+、NK 以及CD4+/CD25+水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；三藥聯(lián)合組患者的IL-2、TNF-α 以及IFN-γ 水平與吉非替尼組、培美曲塞聯(lián)合順鉑組比較顯著升高，IL-6及IL-10水平顯著降低（P<0.05）。充分說明培美曲塞+順鉑與吉非替尼聯(lián)合的治療方式，能夠顯著改善患者的免疫功能以及細(xì)胞因子水平，有助于患者預(yù)后。在本研究中通過對不良反應(yīng)情況的比較發(fā)現(xiàn)：三藥聯(lián)合組患者不良反應(yīng)的發(fā)生情況與吉非替尼組、培美曲塞聯(lián)合順鉑組比較明顯較低（P<0.05），骨髓抑制為最常見的不良反應(yīng)，培美曲塞+順鉑聯(lián)合吉非替尼治療后能夠顯著降低患者不良反應(yīng)的發(fā)生，對于治療效果的提升有積極的促進(jìn)作用。

目前對非小細(xì)胞肺癌患者進(jìn)行化療的過程中標(biāo)準(zhǔn)的方案為鉑類藥物與第3 代藥物的聯(lián)合使用，但經(jīng)該方案實施后患者容易出現(xiàn)復(fù)發(fā)的情況，因此需要實施二線方案的治療［15-16］。而吉非替尼是表皮生長因子受體（EGFR）酪氨酸激酶抑制劑，是第一個獲準(zhǔn)上市治療晚期非小細(xì)胞肺癌的分子靶向藥物，屬于非細(xì)胞毒性蒽喹琳類藥物，該藥物通過對細(xì)胞的轉(zhuǎn)移以及異常增生情況進(jìn)行有效的阻止，從而使抗非小細(xì)胞肺癌的功能得到有效的發(fā)揮［17-18］。培美曲塞可以有效抑制細(xì)胞內(nèi)葉酸依賴性的正常代謝過程。順鉑抑制了腫瘤細(xì)胞的分裂，同時還能夠破壞體內(nèi)癌細(xì)胞的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)。吉非替尼進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，通過與ATP 競爭EGFR 的特定結(jié)合位點，抑制酪氨酸激酶活性，影響細(xì)胞傳導(dǎo)通路，抑制腫瘤血管生成，從而抑制腫瘤的生長與進(jìn)展。在本研究中對非小細(xì)胞肺癌患者采用培美曲塞與順鉑聯(lián)合吉非替尼治療，可促使患者的免疫水平得到顯著改善，進(jìn)而促進(jìn)患者免疫力的提升，由此可見，采用該方案治療能夠顯著提升患者的細(xì)胞免疫功能，進(jìn)而利于患者預(yù)后。同時，能夠促使其機(jī)體的免疫微環(huán)境得到優(yōu)化，進(jìn)而促使外周血CD8+T 細(xì)胞的水平顯著降低，進(jìn)而能夠從多方面對腫瘤免疫逃逸的情況進(jìn)行有效干預(yù)，促進(jìn)機(jī)體免疫監(jiān)視系統(tǒng)的恢復(fù)。

綜上所述，對非小細(xì)胞肺癌患者治療時采用吉非替尼與培美曲塞+順鉑聯(lián)合使用，不僅可以幫助改善患者的T 細(xì)胞亞群以及細(xì)胞因子的水平，還可以減少治療后發(fā)生不良反應(yīng)的情況，同時還可以有效的抑制癌細(xì)胞的生長和擴(kuò)散，幫助增加治療效果，后續(xù)可能考慮進(jìn)行免疫治療。