李崢，楊佳雯，陳冶秋，史小杰，吳天真，陳峰，陳鵬

（1.南京醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院法醫(yī)學系，江蘇 南京 211166；2.南京市公安局法醫(yī)中心，江蘇 南京 210012）

1 案 例

1.1 簡要案情

某年6月25日上午，某街道一河道中發(fā)現(xiàn)一具未知名女童尸體。該女童衣著完整，身上背一雙肩包，主袋拉鏈閉合，內(nèi)裝有兩塊水泥磚?，F(xiàn)場未見明顯打斗痕跡。

1.2 尸體檢驗

尸表檢查：尸長131cm，體表未見明顯損傷。

尸體解剖：水性肺氣腫，肺膜下見點狀出血，支氣管腔內(nèi)見泥沙，余未見明顯異常，可排除因機械性損傷死亡。

毒（藥）物檢驗：提取心血、胃內(nèi)容物、部分肝組織進行理化檢驗，未檢出常見毒（藥）物成分，可排除因常見毒（藥）物中毒死亡。

1.3 硅藻檢驗

提取死者肺組織2g，肝和腎組織各10g，進行硅藻檢驗。對發(fā)現(xiàn)死者的河道分段采取水樣，每個采樣點取水樣4mL進行硅藻檢驗。比較死者肺組織與各采樣點水樣中硅藻種屬的差異。

1.3.1 采樣點的選擇

本案在選取采樣點時，結(jié)合當時河道的水流速度，確定尸體的漂流范圍約為上游距現(xiàn)場10 km處。考慮若采樣點相隔太近，硅藻的種類分布可能沒有明顯差別，故采樣點間隔設置為5km。同時，由于上游距現(xiàn)場4 km處有另一條河流匯入，此處的水文環(huán)境可能存在較大差異，故該河流交匯處也作為采樣點。最后，對下游距現(xiàn)場4km處也采集水樣，原因為：（1）尸體可能被船舶拖帶發(fā)生逆流；（2）作為陰性對照，在不發(fā)生逆流的情況下，下游水樣的硅藻種屬構成應與尸體內(nèi)部不同，但若下游水樣與現(xiàn)場水樣的硅藻種屬構成無明顯差異，則無法排除現(xiàn)場下游落水的可能。因此，選取現(xiàn)場、上游距現(xiàn)場10km處、上游距現(xiàn)場5km處、上游河流交匯處、下游距現(xiàn)場4km處5個位置采集水樣進行硅藻檢驗，用于落水地點的推測。

1.3.2 器官組織的硅藻檢驗

采用微波消解法消解器官組織。消解完成后，將純水與消解液按5∶1的體積比混合加至消解罐，稀釋消解液。將稀釋后的消解液合并倒入尼龍膜濾杯中抽濾；加50mL純水繼續(xù)抽濾，使濾膜表面接近中性；再加10 mL無水乙醇繼續(xù)抽濾，去除濾膜內(nèi)水分；取出濾膜，烘干。用Phenom XL臺式掃描電子顯微鏡（荷蘭飛納公司）對濾膜進行觀察，參照硅藻圖譜等相關資料，記錄檢出硅藻的種類及每種硅藻的數(shù)量用于后續(xù)比對分析。

1.3.3 水樣的硅藻檢驗

取水樣10mL加入消解罐中，其余操作同器官組織的硅藻檢驗。涂片抽濾富集后，在電鏡下掃描并記錄結(jié)果。

1.3.4 結(jié)果比對

實驗完成后，計算肺組織中優(yōu)勢硅藻群落與5處水樣中硅藻群落的Sprensen相似系數(shù)[1]和平方弦距離（squared-chord distance，SCD）[2]，分析肺組織與周邊水體中硅藻種屬構成的相似性。

1.4 硅藻檢驗結(jié)果及溺亡位置推斷

死者肺、肝、腎組織中均檢出硅藻（圖1），結(jié)合尸體檢驗所見，分析認為該女童符合溺死，且肺組織中檢出的硅藻形態(tài)、種類與現(xiàn)場水樣中硅藻相同。

根據(jù)每種硅藻在所有檢出硅藻中的數(shù)量占比，得到肺組織及5處水樣的硅藻種屬構成（表1）。分別計算5處水樣和肺組織中硅藻種屬構成之間的Sprensen相似系數(shù)和SCD，結(jié)果見表2，發(fā)現(xiàn)尸體現(xiàn)場的水樣和肺組織中硅藻種屬構成的SCD遠小于其他幾個采樣點，且Sprensen相似系數(shù)最大，因此推測該女童的入水位置在該現(xiàn)場附近。

1.5 鑒定意見

綜合分析認為，該女童符合溺死，且推斷落水點為發(fā)現(xiàn)尸體現(xiàn)場附近。

圖1 組織及現(xiàn)場水樣的硅藻檢驗結(jié)果Fig.1 Diatom test results of tissues and water samples collected at the scene

表1 肺組織與各采樣點的硅藻種屬構成Tab.1 The diatom species composition of lung tissue and water samples of different sampling points （%）

表2 肺組織與各采樣點硅藻種屬構成間的Sprensen相似系數(shù)及SCDTab.2 The Sprensen coefficient and SCD of diatom species composition between lung tissue and water samples of different sampling points

2 討 論

硅藻是一種廣泛存在于水域中的單細胞浮游植物，種類多，抗外界環(huán)境干擾能力強，一直以來，硅藻檢驗是業(yè)內(nèi)判斷生前溺水或死后拋尸的重要依據(jù)之一[3]。硅藻對環(huán)境敏感，其分布具有明顯的區(qū)域性特征，在確定溺死的情況下，通過分析比較水中尸體組織器官和可疑落水點水樣的硅藻種屬構成，可輔助推測落水溺亡位置[3-10]。在統(tǒng)計學中，Sprensen相似系數(shù)是用于比較兩樣本種屬構成相似程度的常用指標[1]，而SCD則是判斷差異程度敏感的距離測量指標[2]。根據(jù)Sprensen相似系數(shù)和SCD的大小，可推斷兩樣本間的相似程度，即Sprensen值越大或SCD值越小，則兩樣本間相似度越高。

本例根據(jù)死者肺組織與案發(fā)現(xiàn)場附近5處水樣（現(xiàn)場、上游距現(xiàn)場10 km處、上游距現(xiàn)場5 km處、上游河流交匯處、下游距現(xiàn)場4km處）的硅藻種類及頻率分布計算Sprensen相似系數(shù)和SCD，發(fā)現(xiàn)尸體現(xiàn)場處水樣的硅藻種屬構成與死者肺組織最為接近，因而推測死者的實際落水點位于該現(xiàn)場附近。案件偵破后證實，該女童8歲，是在發(fā)現(xiàn)尸體現(xiàn)場附近被犯罪嫌疑人推入河中溺亡。本案采用微波消解-真空抽濾-電鏡掃描的方法進行硅藻形態(tài)學檢驗，相較于傳統(tǒng)硅藻檢驗方法，該法硅藻檢出率更高，能對硅藻種類和數(shù)量進行更為精確的統(tǒng)計，因此更適合落水點推斷[11-12]。本案提示，對于類似案例，在硅藻檢驗的基礎上，可計算案發(fā)附近水樣和尸體肺組織硅藻種屬構成的相似程度，有助于推測實際落水點，尋找第一案發(fā)現(xiàn)場。