陳瑩瑩

（沈陽(yáng)市蘇家屯區(qū)中心醫(yī)院 遼寧沈陽(yáng) 110101）

1 前言

生化分析儀又被稱為生化儀，是一種采用光電比色原理，測(cè)量體液中某種特定化學(xué)元素的儀器，因?yàn)楫a(chǎn)品對(duì)于特定化學(xué)元素的檢測(cè)速度快、準(zhǔn)確率高，以及消耗試劑量小等特點(diǎn)，得到了各大醫(yī)療機(jī)構(gòu)的青睞，并被廣泛應(yīng)用于檢測(cè)中。 因此，在購(gòu)買(mǎi)和選取生化儀時(shí)，為保證科學(xué)性，充分發(fā)揮生化儀的價(jià)值，有必要應(yīng)用專業(yè)的檢測(cè)設(shè)備和技術(shù)，對(duì)生化儀進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量管控和檢測(cè)監(jiān)督。

2 生化儀的構(gòu)成

一般來(lái)說(shuō)，生化分析儀的結(jié)構(gòu)組成為：（1）保溫器，為試驗(yàn)反應(yīng)提供恒定的溫度器皿。（2）樣品器，放置標(biāo)準(zhǔn)品等。

3 生化儀總體檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)及具體檢測(cè)方式方法

3.1 生化儀總體檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)GB 4793.1—2007《測(cè)量、控制和實(shí)驗(yàn)室用電氣設(shè)備的安全要求 第1 部分：通用要求》[1]的安全要求和GB/T 2829—2002《周期檢驗(yàn)計(jì)數(shù)抽樣程序及表（適用于對(duì)過(guò)程穩(wěn)定性的檢驗(yàn)）》[2]等相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，生化儀生產(chǎn)企業(yè)做出的生化儀產(chǎn)品必須具備以下標(biāo)準(zhǔn)：

電源電壓：220 V+22 V，50 Hz+1 Hz；環(huán)境溫度：15℃～30℃；相對(duì)濕度：40%～85%；大氣壓力：86.0～106.0 kPa；雜散光不能大于2.3；控制吸光度線性取值在±5%；最大吸光度應(yīng)該≥2.0，吸光度準(zhǔn)確度應(yīng)符合表1 的規(guī)定[3]。

表1 生化儀吸光度準(zhǔn)確度要求

吸光度的穩(wěn)定性：溫度準(zhǔn)確度與波動(dòng)度設(shè)定值范圍為±0.3，吸光度要小于0.01；溫度值在±0.3℃；波動(dòng)度變化范圍為0.6%，樣品攜帶污染應(yīng)小于該數(shù)值。開(kāi)始樣品準(zhǔn)確度可稍小，重復(fù)性操作加大樣量，進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)，最后保證誤差不超過(guò)6%，變異系數(shù)（CV）不超過(guò)2%。 最大加樣之后，對(duì)儀器進(jìn)行檢測(cè)，保障加樣準(zhǔn)確度誤差在6%以內(nèi)，CV 范圍在3%。 生化儀精密度CV 應(yīng)滿足表2 的要求。

表2 生化儀精密度要求

3.2 生化儀具體檢測(cè)方式方法

3.2.1 雜散光檢測(cè)

用蒸餾水作參比，在340 nm 處測(cè)定50 g/L 的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液；或以空氣作參比，在340 nm 處測(cè)定JB 400 型截止型濾光片的吸光度，應(yīng)符合雜散光吸光度不小于2.3 的要求。

3.2.2 吸光度線性范圍檢測(cè)

色素原液體積分配要考慮高出分析儀要求的上限6%左右[4]。 配置方法詳見(jiàn)表3，然后稀釋溶液，稀釋液按0%～100%（0%、10%、20%……100%）的比例稀釋，最終獲得11 個(gè)濃度梯度。

表3 色素原液的配制方法

在分析儀上，測(cè)定溶液的吸光度，每個(gè)濃度5 倍，計(jì)算平均值。以相對(duì)濃度為水平坐標(biāo)，以平均吸光度為垂直坐標(biāo)，按照式（1）、式（2）、式（3）計(jì)算5～H 點(diǎn)的相對(duì)偏倚D，相對(duì)偏倚小于5%的吸光度范圍即為吸光度線性范圍。

式（1）中：a—線性截距；Ai—某濃度吸光度平均值；b—線性擬合的斜率；Ci—相對(duì)濃度；i—濃度序號(hào)，范圍為5～11。 式（2）和式（3）中：Ai—某濃度點(diǎn)實(shí)際測(cè)定的吸光度的平均值；q—相對(duì)濃度；n—選定的濃度個(gè)數(shù)；z—濃度序號(hào)，范圍為1～4。

3.2.3 吸光度準(zhǔn)確度

以重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液在340 nm 處的吸光度為標(biāo)準(zhǔn)，測(cè)定分析儀在標(biāo)準(zhǔn)重鉻酸鉀溶液的吸光度，數(shù)值為0.5 和1.0 時(shí)需要重復(fù)測(cè)量3 次（蒸餾水為空白），6%為允許偏差。 最后計(jì)算算術(shù)平均值，結(jié)果符合表1 的要求（與標(biāo)準(zhǔn)值的差值）。

3.2.4 吸光度穩(wěn)定性

分析儀的吸光度穩(wěn)定性在350～600 nm 內(nèi)，同時(shí)測(cè)定700 nm 波長(zhǎng)范圍。 350 nm 溶液的吸光度為0.5（±6%為可以偏差），在二氨酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液下測(cè)定，在700～7 500 nm 內(nèi)，硫酸銅溶液標(biāo)準(zhǔn)液體下任意吸光度波長(zhǎng)為0.5 nm（以偏差±6%、純清水為空白標(biāo)準(zhǔn)）。根據(jù)以上條件設(shè)定檢測(cè)內(nèi)容，通過(guò)最大值與最小值的差，測(cè)定溶液的吸光度，計(jì)算滿足要求：（1）最大反應(yīng)時(shí)間為測(cè)定時(shí)間。 （2）讀數(shù)間隔時(shí)間小于測(cè)定時(shí)間。

3.2.5 吸光度重復(fù)性

分析儀在350 nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度重復(fù)性具有重要意義。設(shè)定溶液的吸光度在1.0 的情況下（以蒸餾水或者純凈水為空白，允許偏差為±6%），可以設(shè)定以下策略：最小反應(yīng)體積（這里指溶液總量）；10 min 或者化學(xué)反應(yīng)時(shí)間盡量長(zhǎng)，上述溶液的吸光度重復(fù)20 次，按公式（4）計(jì)算變化量CV，應(yīng)符合CV 要求，不大于1.5%：

從以上數(shù)據(jù)可以得出，實(shí)驗(yàn)用2 種品牌的生化儀生化檢測(cè)結(jié)果都在正常范圍內(nèi)，不存在明顯差異，檢測(cè)均值和偏差稍有差異，但是總體不影響最終檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性， 故沈陽(yáng)市蘇家屯區(qū)中心醫(yī)院的2臺(tái)生化儀均符合標(biāo)準(zhǔn)， 滿足檢測(cè)要求和臨床需要，可以作為生化檢測(cè)的常規(guī)儀器。

4 討論

影響生化儀檢測(cè)的因素有很多，包括取血方法、溫度、濕度、試紙條批號(hào)及保存等，要保證生化儀測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，同時(shí)保證不同生化儀所測(cè)結(jié)果的一致性，就需要加強(qiáng)對(duì)生化儀的質(zhì)量管理[5-9]。 （1）制定生化儀監(jiān)測(cè)檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程和程序步驟，用制度做事、 管理相關(guān)從業(yè)工作人員才是長(zhǎng)久之計(jì)。（2）建立健全生化儀監(jiān)測(cè)系統(tǒng)和質(zhì)量控制體系，從體系建立就作出明確懲罰措施，用科學(xué)的手段不斷完善質(zhì)量控制體系，避免出現(xiàn)監(jiān)測(cè)不到位和無(wú)人值守等極端情況。（3）科學(xué)完善沈陽(yáng)市蘇家屯區(qū)中心醫(yī)院生化儀房間質(zhì)量評(píng)估體系建設(shè)，確保硬件設(shè)施滿足監(jiān)測(cè)檢測(cè)條件[10-14]。