孫文濤 沈陽(yáng)沈河愛(ài)康國(guó)賓綜合門(mén)診部有限公司 （遼寧 沈陽(yáng) 110000）

內(nèi)容提要：免疫學(xué)檢驗(yàn)可以為臨床疾病的診療提供有利的條件，檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性對(duì)臨床診療的效果有直接的影響，因此，臨床免疫檢驗(yàn)質(zhì)量控制就顯得尤為重要。文章以全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀為例，從分析前的質(zhì)量控制、分析中的質(zhì)量控制和分析后的質(zhì)量控制三個(gè)方面詳細(xì)分析了質(zhì)量控制的方法，以期為日常工作中保證免疫分析儀檢驗(yàn)質(zhì)量控制提供一定的參考。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果的準(zhǔn)確性是疾病診療和實(shí)驗(yàn)研究有效性的基礎(chǔ)。免疫學(xué)檢驗(yàn)可以為疾病的臨床診療提供非常有利的條件，檢查結(jié)果的有效性和準(zhǔn)確性對(duì)臨床診療的效果可產(chǎn)生直接影響。自從免疫分析儀被廣泛使用后，很多環(huán)節(jié)無(wú)需手工操作，實(shí)現(xiàn)了操作的機(jī)械化。免疫分析儀具有在臨床免疫檢驗(yàn)的過(guò)程中減小因手工操作產(chǎn)生誤差的優(yōu)勢(shì)，但是其檢測(cè)的結(jié)果也受到很多因素的影響，所以，有必要強(qiáng)化免疫分析儀在臨床免疫檢驗(yàn)中的質(zhì)量控制。基于此，筆者以全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀為例，詳細(xì)分析了免疫分析儀臨床免疫檢驗(yàn)質(zhì)量控制的重要性與方法，以期為日常工作中保證免疫分析儀檢驗(yàn)質(zhì)量提供一定的參考。

1.全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢驗(yàn)原理及特點(diǎn)

1.1 檢驗(yàn)原理

反應(yīng)體系中的反應(yīng)物、產(chǎn)物、中間體或熒光物質(zhì)分子吸收了反應(yīng)所釋放的能量由基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài)，然后再?gòu)募ぐl(fā)態(tài)返回基態(tài)，同時(shí)將能量以光輻射的形式釋放出來(lái)，產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光[1]。

1.2 特點(diǎn)

全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀不使用任何光源，可避免背景光和雜散光的干擾，降低了噪聲，因此具有很高的靈敏度，一般情況下可以測(cè)定納克級(jí)或皮克級(jí)的化學(xué)成分；以最大發(fā)光強(qiáng)度定量被測(cè)組分的濃度；自動(dòng)進(jìn)樣，儲(chǔ)存記錄，打印結(jié)果，分析速度更快。

2.免疫分析儀分析臨床免疫檢驗(yàn)質(zhì)量控制方法

免疫分析儀的廣泛使用，使各種檢查由人工操作轉(zhuǎn)變?yōu)閮x器分析，基于此原因，儀器分析前的各項(xiàng)工作在質(zhì)量控制過(guò)程中尤其顯得重要，實(shí)踐證明，儀器分析前的工作是出現(xiàn)誤差最多的環(huán)節(jié)。為了做好分析檢驗(yàn)的質(zhì)量控制，將全過(guò)程細(xì)分為分析前的質(zhì)量控制、分析中的質(zhì)量控制和分析后的質(zhì)量控制[2]。

2.1 分析前的質(zhì)量控制

2.1.1 加大宣傳力度

要經(jīng)常舉辦講座、發(fā)放相關(guān)資料、全員參與病例討論，通過(guò)各種形式不斷加大宣傳力度，使醫(yī)生和醫(yī)護(hù)人員了解免疫分析技術(shù)的檢驗(yàn)原理和免疫分析技術(shù)的技術(shù)要點(diǎn)，避免分析過(guò)程中的干擾因素，指導(dǎo)臨床醫(yī)生選擇合適的項(xiàng)目。

2.1.2 加強(qiáng)護(hù)理人員培訓(xùn)

實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)產(chǎn)生誤差的首要原因就是樣品采集環(huán)節(jié)，醫(yī)生開(kāi)具相關(guān)申請(qǐng)單、標(biāo)本采集和送檢、標(biāo)本處理等各環(huán)節(jié)都有可能出現(xiàn)問(wèn)題。因此，必須要加強(qiáng)培訓(xùn)，避免無(wú)法確定責(zé)任。首先，臨床醫(yī)生要正確開(kāi)具檢驗(yàn)單，檢驗(yàn)單中應(yīng)包含患者的精神狀態(tài)、飲食、藥物和標(biāo)本的采集時(shí)間等詳細(xì)信息；其次，要對(duì)護(hù)理人員加強(qiáng)培訓(xùn)。實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)的結(jié)果是否標(biāo)準(zhǔn)與標(biāo)本的采集方法、送檢時(shí)間等都有關(guān)系，這就要求護(hù)理人員必須提供符合要求的標(biāo)本，對(duì)于不符合要求的標(biāo)本必須要退回。

2.1.3 加強(qiáng)檢驗(yàn)人員培訓(xùn)

護(hù)理人員在采集血清和血漿時(shí)，一定要仔細(xì)認(rèn)真，要保證采集的標(biāo)本中未混入纖維蛋白絲、塵埃、血細(xì)胞和氣泡，以免影響免疫分析儀檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

標(biāo)本分離時(shí)間要準(zhǔn)確掌握。標(biāo)本分離的時(shí)間對(duì)免疫分析儀檢驗(yàn)的結(jié)果有一定的影響。分離過(guò)早，血清中纖維蛋白無(wú)法析出完全，若此時(shí)上機(jī)檢驗(yàn)將造成纖維蛋白被吸入而堵塞吸樣針；分離過(guò)晚，血細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)有可能會(huì)發(fā)生交換。應(yīng)該要等到血液完全凝固再分離血清，分離時(shí)間在8min左右，如果患者自身的凝血功能較差則要延長(zhǎng)時(shí)間待血液凝固后再分離標(biāo)本。

掌握標(biāo)本保存的時(shí)間。甲狀腺激素測(cè)定血清在溫度為-20°C的條件下可穩(wěn)定6個(gè)月；腫瘤標(biāo)志物CA153、鐵蛋白測(cè)定血清在-20°C的條件下可穩(wěn)定12個(gè)月；測(cè)定CA199、TPSA、FPSA時(shí)血清必須要在采集3h內(nèi)分離完成，若超過(guò)24h就要在-20°C的條件下貯存。

2.1.4 考慮到周轉(zhuǎn)時(shí)間產(chǎn)生的誤差

從檢驗(yàn)單開(kāi)出直至發(fā)回檢驗(yàn)報(bào)告的時(shí)間段對(duì)疾病的正確和及時(shí)診斷很重要。一般情況下由周轉(zhuǎn)時(shí)間產(chǎn)生的誤差有：沒(méi)有及時(shí)送檢采集好的標(biāo)本、收到標(biāo)本后檢驗(yàn)人員沒(méi)有及時(shí)檢測(cè)標(biāo)本、檢測(cè)結(jié)果沒(méi)有及時(shí)報(bào)告、臨床醫(yī)生接收到報(bào)告后沒(méi)有針對(duì)問(wèn)題及時(shí)進(jìn)行處理等。

2.2 分析中的質(zhì)量控制

2.2.1 要仔細(xì)校正標(biāo)準(zhǔn)曲線

免疫分析儀檢驗(yàn)前的理想條件為試劑質(zhì)量有保證且儀器沒(méi)有系統(tǒng)誤差，在此條件下標(biāo)準(zhǔn)曲線的有效期可達(dá)到7～28d。若出現(xiàn)以下情況就必須要對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行仔細(xì)校正：如果使用的是不同批號(hào)的試劑，由于不同批號(hào)的試劑之間存在差異，則在使用前必須要對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行校正；若出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線過(guò)期、質(zhì)控值超出控制范圍的情況，也必須要對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行校正，這是因?yàn)楦鳈z測(cè)項(xiàng)目的試劑穩(wěn)定性和監(jiān)測(cè)原理不同；檢測(cè)儀器經(jīng)過(guò)維修、更換配件和升級(jí)緩沖液時(shí)必須要校正。

2.2.2 質(zhì)控方法和質(zhì)控品

標(biāo)準(zhǔn)曲線在經(jīng)過(guò)仔細(xì)校正后，還要有精準(zhǔn)的室內(nèi)質(zhì)量控制系統(tǒng)，用來(lái)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否準(zhǔn)確。質(zhì)控品中商品化多值質(zhì)控血清質(zhì)量好、設(shè)置合理、操作簡(jiǎn)單，被廣泛選用。質(zhì)控方法一般的常規(guī)項(xiàng)目采用Levey-Jennings控制圖，而對(duì)于有效期短的試劑盒項(xiàng)目一般采用Crubbs氏法。

2.2.3 標(biāo)本上機(jī)時(shí)間務(wù)必嚴(yán)格控制。

標(biāo)本上機(jī)的時(shí)間務(wù)必要嚴(yán)格按照儀器加樣的速度，此外為了避免標(biāo)本濃縮，還要保證在3h內(nèi)加樣中心的標(biāo)本加樣結(jié)束。

2.2.4 儀器發(fā)生報(bào)警必須及時(shí)處理。

在檢測(cè)過(guò)程中經(jīng)常會(huì)發(fā)生儀器報(bào)警的情況，產(chǎn)生原因一般有樣本量不足、定標(biāo)超限、樣品空缺、未輸入項(xiàng)目等。對(duì)發(fā)現(xiàn)以上報(bào)警情況時(shí)要及時(shí)采取措施。

2.3 分析后的質(zhì)量控制

2.3.1 細(xì)致分析檢測(cè)結(jié)果。

要嚴(yán)格按照質(zhì)控值精準(zhǔn)地繪制出質(zhì)控圖，對(duì)檢測(cè)結(jié)果的分析一般采用傳統(tǒng)的質(zhì)控方法即可，以確保結(jié)果有效。若有項(xiàng)目質(zhì)控失控則必須要重新復(fù)核結(jié)果或更換試劑。

2.3.2 嚴(yán)格審核結(jié)果。

在審核結(jié)果時(shí)要遵循以下原則：如果結(jié)果≤0，要及時(shí)找出原因并且加以糾正。一般情況下出現(xiàn)這種情況的原因有樣品不足、被檢測(cè)物的含量在反應(yīng)線性范圍以外、加樣針被堵塞等；如果檢查結(jié)果大多都是陽(yáng)性，需要認(rèn)真分析各結(jié)果之間的關(guān)聯(lián)性。要仔細(xì)檢查血清樣品中是否有無(wú)溶血、纖維蛋白絲等，必要的時(shí)候要進(jìn)行復(fù)檢；如果結(jié)果在參考值下線以下，同樣要檢查血清樣品。

2.3.3 加強(qiáng)與臨床的交流。

實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)的目的是為臨床服務(wù)，因此必須要加強(qiáng)與臨床的溝通和交流，尤其是遇到檢驗(yàn)的結(jié)果與臨床表現(xiàn)不相符的時(shí)候，以免出現(xiàn)問(wèn)題時(shí)相互推卸責(zé)任。臨床與實(shí)驗(yàn)室一定要相互信任，加強(qiáng)有效的交流，這樣有利于改進(jìn)檢驗(yàn)方法并提高檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，也能加強(qiáng)臨床醫(yī)生進(jìn)一步了解患者的病情。

3.小結(jié)

全自動(dòng)免疫分析儀具有技術(shù)先進(jìn)、應(yīng)用范圍廣、操作簡(jiǎn)便和自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn)，在臨床科研上被廣泛應(yīng)用。醫(yī)務(wù)人員務(wù)必要意識(shí)到免疫分析儀在臨床免疫檢驗(yàn)的過(guò)程中質(zhì)量控制的重要性，對(duì)于標(biāo)本的采集、采集方法和貯存、運(yùn)送過(guò)程、控制檢測(cè)的干擾因素、規(guī)范操作等方面都必須要嚴(yán)格落實(shí)，這樣才能做好質(zhì)量控制。實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)人員對(duì)質(zhì)量控制的意識(shí)要強(qiáng)，要以質(zhì)量控制為中心展開(kāi)檢驗(yàn)檢測(cè)工作，只有這樣才能使檢驗(yàn)檢測(cè)的水平得到提高[3]。總而言之，只有加強(qiáng)臨床免疫檢驗(yàn)質(zhì)量的控制，才能提高免疫檢驗(yàn)結(jié)果的有效性和準(zhǔn)確性。