熊鏵龍，蔣左玉，梁正其，姚俊杰

( 1.貴州省甕安縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，貴州 甕安 550400； 2.銅仁學(xué)院 農(nóng)林工程與規(guī)劃學(xué)院，梵凈山特色動(dòng)植物 資源重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，貴州 銅仁 554300； 3.貴州大學(xué) 動(dòng)物科學(xué)學(xué)院 水產(chǎn)科學(xué)系，貴州 貴陽 550025 )

仔稚魚的發(fā)育是魚類生活史的重要階段，仔魚出膜后大部分器官開始分化，在此期間仔魚適應(yīng)環(huán)境的能力較弱，受環(huán)境的影響較大，死亡率較高。因此，為提高魚苗成活率，研究仔稚魚胚后發(fā)育具有重要的意義。近年來，對(duì)鱘魚類仔稚魚生長(zhǎng)發(fā)育的研究頗多，宋聃等[1]研究表明，在適宜溫度下，達(dá)氏鰉(Husodauricus)的生長(zhǎng)速度最快，其次為施氏鱘(Acipenserschrenckii)和達(dá)氏鰉正、反交雜交種，施氏鱘生長(zhǎng)速度最慢。莊平等[2]研究表明，西伯利亞鱘(A.baeri)仔稚魚的全長(zhǎng)生長(zhǎng)呈4種生長(zhǎng)特點(diǎn)，在第9、28、37 d時(shí)均出現(xiàn)生長(zhǎng)拐點(diǎn)，其中第28～37日齡的生長(zhǎng)率最大，而體質(zhì)量的增長(zhǎng)呈負(fù)異速生長(zhǎng)；經(jīng)過人工飼養(yǎng)50 d的達(dá)氏鰉稚幼魚全長(zhǎng)生長(zhǎng)比體質(zhì)量生長(zhǎng)快，且第一個(gè)10 d時(shí)體質(zhì)量的瞬時(shí)生長(zhǎng)率變化最大，屬異速生長(zhǎng)類型[3]；以達(dá)氏鰉為父本，西伯利亞鱘為母本的雜交仔稚魚體質(zhì)量生長(zhǎng)比全長(zhǎng)生長(zhǎng)快得多[4]；人工飼養(yǎng)50 d內(nèi)的中吻鱘(A.medirostris)仔稚魚呈“負(fù)異速生長(zhǎng)—等速生長(zhǎng)—正異速生長(zhǎng)”3種生長(zhǎng)類型[5]。這些研究表明，鱘魚生長(zhǎng)特點(diǎn)不僅存在種屬特異性，同時(shí)還受環(huán)境因素、餌料成分和飼養(yǎng)方式等影響。

鱘類是一種很古老的軟骨硬鱗魚類，具有極高的研究?jī)r(jià)值和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。其中雜交鱘是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖品種，具有生長(zhǎng)速度快，抗病性強(qiáng)，經(jīng)濟(jì)效益高等特點(diǎn)。研究表明，小鱘鰉(H.huso♀×A.ruthenus♂)、達(dá)氏鰉鱘(H.dauricus♀×A.schrenckii♂)和達(dá)氏鰉(♀)×西伯利亞鱘(♂)等雜交鱘均具有明顯的雜交優(yōu)勢(shì)[4,6-7]，本試驗(yàn)研究目前養(yǎng)殖中較廣泛應(yīng)用的雜交鱘(施氏鱘♀×西伯利亞鱘♂)仔稚魚的生長(zhǎng)特性，旨在探尋其早期生長(zhǎng)規(guī)律，為雜交鱘的苗種培育和人工養(yǎng)殖提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)于2015年3月1日—2015年6月1日，在貴州省遵義市綏陽鱘魚魚苗繁育場(chǎng)進(jìn)行。試驗(yàn)魚為剛出膜雜交鱘仔魚，體質(zhì)量(0.014±0.001) g，全長(zhǎng)(0.82±0.08) cm。

1.2 飼養(yǎng)管理

雜交鱘魚苗以流水方式養(yǎng)殖，養(yǎng)殖容器為直徑2 m的圓形玻璃缸，水深15～25 cm，水溫7～14 ℃，溶解氧>6 mg/L，氨氮<0.06 mg/L，pH 6.5～6.8，養(yǎng)殖密度1500～2000尾/m2，試驗(yàn)期間各池水源、水溫、供水量及飼養(yǎng)管理保持一致。仔魚開口時(shí)以水絲蚓(Limnodrilushoffmeisteri)為開口餌料，將水絲蚓用5%食鹽水消毒5 min打碎成漿后加水潑入池中，每2 h投喂1次，隨仔魚的生長(zhǎng)，可投喂整條水絲蚓。仔魚進(jìn)入轉(zhuǎn)食階段后用鱘魚專用配合飼料粉與打漿的水絲蚓制成面團(tuán)，再撕成小塊投喂，隨著仔魚的生長(zhǎng)逐漸降低水絲蚓的比例，每3 h投喂1次。仔魚進(jìn)入馴化階段開始投喂北京漢業(yè)科技有限公司生產(chǎn)的鱘魚微粒子開口餌料(粗蛋白≥50%，粗脂肪≥10%，粗纖維≤4%，粗灰分≤16%，鈣2%～5%，總磷≥1%，水分≤10%，賴氨酸≥3%)，日投喂4次。投餌量的控制以試驗(yàn)魚飽食后略有剩餌為準(zhǔn)，每次投喂前，先清除死苗、排泄物及殘餌，保持水質(zhì)清新。

1.3 試驗(yàn)方法

整個(gè)養(yǎng)殖試驗(yàn)歷時(shí)87 d，自第7 d開始取樣，之后每隔10 d自3個(gè)玻璃缸中隨機(jī)取樣50尾魚苗，用顯微鏡和解剖鏡進(jìn)行形態(tài)觀察，全長(zhǎng)使用解剖鏡目測(cè)微尺測(cè)量，精確到0.1 mm；體質(zhì)量使用分析電子天平稱量質(zhì)量，精確到0.1 mg。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 17.0 軟件對(duì)測(cè)量數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。各項(xiàng)參數(shù)及其計(jì)算公式[8]如下：

全長(zhǎng)生長(zhǎng)曲線方程：L=a+bt

體質(zhì)量生長(zhǎng)曲線方程：m=aekt

體質(zhì)量與全長(zhǎng)的關(guān)系式：m=aLb

日均質(zhì)量增加量/g·d-1=(m2-m1)/(t2-t1)

日均增長(zhǎng)量/cm·d-1=(L2-L1)/(t2-t1)

瞬時(shí)增長(zhǎng)率/%·d-1=(lnL2-lnL1)/(t2-t1)×100%

瞬時(shí)質(zhì)量增加率/%·d-1=(lnm2-lnm1)/(t2-t1)×100%

式中，m1、m2分別為時(shí)間t1、t2時(shí)的體質(zhì)量(g)，L1、L2分別為t1、t2時(shí)的全長(zhǎng)(cm)，m為體質(zhì)量(g)，L為全長(zhǎng)(cm)，a、b、k為常數(shù)。

2 結(jié) 果

2.1 雜交鱘魚胚后發(fā)育的形態(tài)學(xué)特征

雜交鱘仔魚胚后發(fā)育分為3個(gè)階段：內(nèi)源性營(yíng)養(yǎng)期，由剛出膜仔魚(0 d)至仔魚開口攝食(7 d)；混合營(yíng)養(yǎng)期，由開始攝取外源開口餌料(7 d)至卵黃囊消失完畢(9 d)；外源營(yíng)養(yǎng)期，9 d后仔魚完全開始攝食外源營(yíng)養(yǎng)，解剖可見尚未消化的水絲蚓，外鰓蓋下可見鰓絲；發(fā)育至第57 d時(shí)進(jìn)入幼魚期，幼魚在形態(tài)上發(fā)生明顯變化，頭部變尖，歪叉尾，尾鰭條基18～21根，前臀鰭?cǎi)尴?，各器官基本發(fā)育完善，形態(tài)上與成魚一致。

0 d：即剛出膜仔魚，此時(shí)仔魚全長(zhǎng)(0.82±0.08) cm，蝌蚪狀，體纖細(xì)透明，呈淡灰白色，眼部色素較深。卵黃囊呈橢圓形，頭較小，身體前部彎向卵黃囊，尾部相對(duì)較大，呈鈍圓形。

3 d：卵黃囊逐漸減小，身體各部色素不斷增加，仔魚頭部上抬幾乎與身體平直；口腔形成，鰓絲增長(zhǎng)且有血液流動(dòng)，仔細(xì)觀察可看見腸道，腸道里有黑色糞便；此階段的仔魚游動(dòng)不能控制平衡，尾部不停地?cái)[動(dòng)，身體往上竄至水面，自由沉落后側(cè)臥片刻，然后又上竄，仔魚做上下垂直游動(dòng)。

5 d：仔魚頭部開始變寬，腦部增大，吻端略向前突；胸鰭增大，移至鰓正后方；仔魚開始在孵化槽底部邊緣聚成一團(tuán)，夜間魚群有明顯的趨光性。

6 d：魚體均有色素分布，頭部及軀干后部色素聚集相對(duì)更多；尾鰭鰭?cǎi)藓蟛块_始出現(xiàn)凹陷，呈“Y”形。腸內(nèi)有金黃色油滴，肛門暢通，糞便開始排出，可明顯觀察到池底有少量黑點(diǎn)狀的糞便。同時(shí)，部分仔魚開始臥底活動(dòng)或沿池壁活動(dòng)，仔魚能夠平穩(wěn)的在水中水平游動(dòng)。

7 d：全長(zhǎng)(2.59±0.14) cm，此時(shí)仔魚最明顯的特征就是超半數(shù)的仔魚已臥底活動(dòng)或沿池壁活動(dòng)，池底明顯的觀察到大量糞便，這兩個(gè)特征的出現(xiàn)可以判斷仔魚將主動(dòng)開口攝食，此時(shí)可投喂適量開口餌料，仔魚開始進(jìn)入混合營(yíng)養(yǎng)期；色素覆蓋全身，仔魚分散游動(dòng)。

8 d：仔魚生長(zhǎng)較快，大部分仔魚的卵黃囊基本已經(jīng)消失，胃中可見食物，此時(shí)的仔魚大部分開始臥底活動(dòng)或沿池壁活動(dòng)。

9 d：仔魚消化道發(fā)育基本完成，腸道彎曲，腸內(nèi)有食物殘留，此時(shí)完全轉(zhuǎn)變?yōu)橥鉅I(yíng)養(yǎng)階段，活力強(qiáng)，反應(yīng)靈敏，頭部、背部、肌節(jié)部分色素增加，臀鰭和尾部完全形成。

10～87 d：全長(zhǎng)由7 d的(2.59±0.14) cm增長(zhǎng)至(9.77±1.15) cm，此階段身體各部色素不斷沉積，各器官不斷發(fā)育完善；進(jìn)入外源營(yíng)養(yǎng)期，稚魚的口可自由伸縮，攝食能力開始變強(qiáng)；約19 d時(shí)骨板開始出現(xiàn)，隨著生長(zhǎng)發(fā)育的繼續(xù)，骨板數(shù)量不斷增加；約至57 d雜交鱘已進(jìn)入幼魚期，魚體外形及體色近似于成魚。第67 d后，幼魚外形與各組織器官逐漸發(fā)育完善。

2.2 雜交鱘早期發(fā)育的生長(zhǎng)特性

雜交鱘早期的全長(zhǎng)、體質(zhì)量、日均質(zhì)量增加量和日均增長(zhǎng)量等生長(zhǎng)特征數(shù)據(jù)見表1。由表1可見，雜交鱘魚苗日均質(zhì)量增加量隨著培育時(shí)間的增加而逐漸增加，表現(xiàn)出與全長(zhǎng)日增長(zhǎng)量不同的變化規(guī)律，而瞬時(shí)質(zhì)量增加率卻隨時(shí)間的增加呈波浪式降低，7～87 d仔稚魚的日均質(zhì)量增加量為2.54 g，瞬時(shí)質(zhì)量增加率為5.51%。平均體長(zhǎng)為(2.59±0.14) cm的7 d仔魚，經(jīng)80 d培育后，全長(zhǎng)達(dá)(15.83±1.44) cm，日均增長(zhǎng)量1.66 cm，瞬時(shí)增長(zhǎng)率2.26%，其中7～17 d和37～87 d均出現(xiàn)急速增長(zhǎng)，第78～87 d達(dá)到最高，平均增長(zhǎng)2.85 cm，17～67 d的日增長(zhǎng)量呈波浪式下降，瞬時(shí)增長(zhǎng)率隨著培育時(shí)間的增加而波浪式下降。

表1 雜交鱘早期發(fā)育的生長(zhǎng)特征Tab.1 Growth performance during early development of hybrid sturgeon A. schrenckii ♀×A. baeri ♂

2.3 雜交鱘早期的生長(zhǎng)

2.3.1 仔魚全長(zhǎng)生長(zhǎng)的模型

參照L=a+bt，根據(jù)出膜期至87 d幼魚的全長(zhǎng)，對(duì)其全長(zhǎng)和日齡進(jìn)行回歸(圖1)，得生長(zhǎng)方程L=0.1546t+1.2357(r2=0.9812)，呈線性生長(zhǎng)模式。

圖1 雜交鱘早期全長(zhǎng)與日齡的關(guān)系Fig.1 The relationship between total length and day old during early development of hybrid sturgeon A. schrenckii ♀×A. baeri ♂

2.3.2 體質(zhì)量與日齡的相關(guān)性

參照m=aekt，根據(jù)出膜期至87 d幼魚的體質(zhì)量，對(duì)其體質(zhì)量和日齡進(jìn)行回歸(圖2)，得回歸方程m=0.3379e0.0479t(r2=0.9851)，呈指數(shù)增長(zhǎng)模式。

2.3.3 體質(zhì)量與全長(zhǎng)的關(guān)系

參照m=aLb，根據(jù)出膜期至87 d幼魚的體質(zhì)量和全長(zhǎng)，并對(duì)其進(jìn)行回歸得到生長(zhǎng)方程為m=0.0289L2.3444(r2=0.993)，呈冪函數(shù)關(guān)系(圖3)。

3 討 論

3.1 雜交鱘仔稚(幼)魚的生長(zhǎng)發(fā)育

由第7 d發(fā)育至第87 d，仔魚體質(zhì)量平均日增長(zhǎng)0.25 g，全長(zhǎng)平均日增長(zhǎng)1.67 mm。生長(zhǎng)速度低于西伯利亞鱘稚幼魚生長(zhǎng)速度和達(dá)氏鰉(♀)×西伯利亞鱘(♂)雜交鱘幼魚生長(zhǎng)速度[4,9]，其可能為屬性、餌料、生活環(huán)境等不同導(dǎo)致[4]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，雜交鱘仔魚在第一個(gè)10 d的瞬時(shí)生長(zhǎng)率變化最大，表明當(dāng)環(huán)境適宜、餌料適口且充足時(shí)，仔魚可通過快速攝食來提高自身對(duì)外界的抵抗，提高成活率。雜交鱘仔魚在7～17 d全長(zhǎng)和體質(zhì)量的生長(zhǎng)量均最大，仔魚早已開口攝食水絲蚓，有效獲得外源營(yíng)養(yǎng)，使其生長(zhǎng)率上升。第17 d后，仔魚的生長(zhǎng)指數(shù)降低，此時(shí)，仔魚進(jìn)入轉(zhuǎn)食馴化階段，餌料由水絲蚓轉(zhuǎn)變?yōu)樗z蚓與鱘魚微粒子開口餌料混合飼喂，需要一個(gè)馴化過渡期，故生長(zhǎng)速度降低。第27 d，雜交鱘稚魚已轉(zhuǎn)食成功，其生長(zhǎng)呈快速生長(zhǎng)趨勢(shì)，這與鱘魚貪食的特性有關(guān)。第57 d，雜交鱘已進(jìn)入幼魚期，外形基本發(fā)育完全，大部分能量用于內(nèi)部器官、組織結(jié)構(gòu)的發(fā)育，全長(zhǎng)的生長(zhǎng)開始下降。第67 d后，幼魚外形與各組織器官發(fā)育完善，攝取的營(yíng)養(yǎng)主要用于生長(zhǎng)，幼魚進(jìn)入快速生長(zhǎng)階段，此研究結(jié)果與其母本施氏鱘的生長(zhǎng)特點(diǎn)有所差異，但類似于其父本西伯利亞鱘的生長(zhǎng)特點(diǎn)[2,10]。

圖2 雜交鱘早期體質(zhì)量與日齡的關(guān)系Fig.2 The relationship between body weight and day age during early development of hybrid sturgeon A. schrenckii ♀×A. baeri ♂

圖3 雜交鱘早期體質(zhì)量與全長(zhǎng)的關(guān)系Fig.3 The relationship between body weight and total length during early development of the hybrid sturgeon A. schrenckii ♀×A. baeri ♂

魚的全長(zhǎng)、體質(zhì)量是衡量種質(zhì)質(zhì)量和養(yǎng)殖效果的標(biāo)準(zhǔn)之一[11]。本試驗(yàn)中，雜交鱘全長(zhǎng)與體質(zhì)量的關(guān)系式為m=0.0289L2.3444(r2=0.9857)，其中b值小于3，屬負(fù)異速增長(zhǎng)，說明雜交鱘早期的體質(zhì)量生長(zhǎng)比全長(zhǎng)生長(zhǎng)慢，這個(gè)結(jié)果與石振廣等[12]對(duì)達(dá)氏鰉雜交種幼魚生長(zhǎng)特性的研究結(jié)果不同，但與李文龍等[3]對(duì)達(dá)氏鰉稚幼魚生長(zhǎng)特性的研究和文春根等[13]對(duì)俄羅斯鱘仔稚魚生長(zhǎng)的研究結(jié)果一致。分析可能與種屬特性、環(huán)境條件、投喂餌料等因素有關(guān)，導(dǎo)致各種鱘魚的生長(zhǎng)存在著一定的差異。同時(shí)，對(duì)中吻鱘仔稚魚異速生長(zhǎng)的研究也表明，出膜后14 d內(nèi)的仔魚呈負(fù)異速生長(zhǎng)，而15～50 d呈正異速生長(zhǎng)，說明仔魚處在不同的生長(zhǎng)階段也會(huì)導(dǎo)致體質(zhì)量和全長(zhǎng)的生長(zhǎng)存在差異[5]。因此，應(yīng)盡可能分階段研究仔稚魚生長(zhǎng)特點(diǎn)，以便合理的制定投喂策略。

3.2 雜交鱘仔稚魚培育的技術(shù)關(guān)鍵點(diǎn)

剛出膜的鱘魚水花需經(jīng)歷卵黃期、開口期、轉(zhuǎn)食期和飼料馴化期才能發(fā)育為稚幼魚，現(xiàn)結(jié)合本研究和綜合相關(guān)文獻(xiàn)[14-16]，將各時(shí)期培育關(guān)鍵點(diǎn)總結(jié)如下：

卵黃期：本研究表明，在鱘魚苗7 d以前靠吸收卵黃囊中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)生長(zhǎng)發(fā)育，此階段不用投餌，但隨時(shí)觀察水質(zhì)和魚的變化情況，這階段魚苗在行為上依次經(jīng)歷浮游、底棲聚團(tuán)、散開、下底覓食4個(gè)階段。

開口期：底棲聚團(tuán)是仔魚即將開口攝食的信號(hào)，本研究表明，從第7 d開始，仔魚快速生長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)需求大，因而需及時(shí)投餌，鱘魚一般開口餌料為水絲蚓，投喂時(shí)應(yīng)將水絲蚓用清水洗凈，加入適量食用鹽消毒5 min后勻漿投喂，隨著仔魚的快速生長(zhǎng)，可用刀將水絲蚓剁成小段投喂。每隔2 h投喂1次，開口期日投喂量為魚體質(zhì)量的100%，隨魚苗體質(zhì)的增強(qiáng)和規(guī)格的增大，投喂量也要做相應(yīng)調(diào)整，開口后期可降至40%～50%，4～5 d后直接投喂紅線蟲。

轉(zhuǎn)食期：本研究表明，雜交鱘魚苗在第17 d生長(zhǎng)速度減緩，表明此時(shí)進(jìn)入馴食階段，即要開始投喂人工配合飼料，此階段因?yàn)轲D料的改變，對(duì)其攝食有影響，因而生長(zhǎng)速度會(huì)減緩。馴食可用食鹽消毒好的水絲蚓和專用飼料粉末揉成飼料餅后撕成小塊投喂，隨著魚苗的成長(zhǎng)，水絲蚓逐漸減少，飼料粉末逐漸增多，直至最后完全用飼料粉末做飼料餅投喂，此過程約7 d。采用這種方法魚苗的轉(zhuǎn)食率達(dá)95%以上，需要注意的是，應(yīng)及時(shí)挑出此過程中轉(zhuǎn)食不成功、生長(zhǎng)停滯的魚苗，并再次投喂水絲蚓，待其體質(zhì)恢復(fù)后再重新進(jìn)行轉(zhuǎn)食。如果轉(zhuǎn)食成功后，就根據(jù)魚苗大小和生長(zhǎng)情況，及時(shí)投喂適口飼料。