張 蓮，廖 君，鄒崢嶸,2

(1.江西師范大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，南昌 330022； 2.江西省亞熱帶植物資源保護(hù)與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，南昌 330022)

蠟梅(Chimonanthuspraecox(L.)Link)又名臘木、巖子桑、臭臘梅、干枝梅，是蠟梅科蠟梅屬植物[1]，主要分布于我國(guó)的山東、河南、陜西、四川、貴州、云南、廣東、廣西、浙江、江蘇和福建等省[2]，是原產(chǎn)我國(guó)的傳統(tǒng)觀(guān)賞花木，具有較高的觀(guān)賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，主要用于園林、切花、香精、醫(yī)藥和保健飲品[3]。素心蠟梅(Chimonanthuspraecoxcv.Luteus)為蠟梅的變種，其內(nèi)外輪花被片均為純黃色，具有香味濃郁等特點(diǎn)，是一種廣受歡迎的園林綠化樹(shù)種。

蠟梅的果實(shí)藥用名為土巴豆[4]，富含油脂。目前，蠟梅屬植物化學(xué)成分研究以揮發(fā)油為主[5-6]，對(duì)非揮發(fā)性成分研究較少，主要報(bào)道了生物堿、黃酮、香豆素等成分[7-8]，并主要是從蠟梅的枝葉[9]中得到，對(duì)素心蠟梅種子化學(xué)成分的研究較少。因此，本研究采用正己烷分別提取素心蠟梅種皮油和種仁油，用索氏提取法和氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用技術(shù)對(duì)素心蠟梅種皮和種仁含油量及油脂化學(xué)成分進(jìn)行分析，以期為蠟梅屬植物的進(jìn)一步資源化利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 原料與試劑

素心蠟梅種子(于2018年5月在江西師范大學(xué)的校園里采集，并由鄒崢嶸教授鑒定，憑證標(biāo)本存放于江西省亞熱帶植物資源保護(hù)與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，標(biāo)本號(hào)為2017-137)；雙蒸水；活性炭、二硫化碳、正己烷、氫氧化鉀、乙醇、濃硫酸、無(wú)水硫酸鈉和石油醚等均為分析純，購(gòu)自西隴科學(xué)股份有限公司。

1.1.2 儀器與設(shè)備

7890A/5975C氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國(guó)Agilent Technologies公司)，電子天平(奧豪斯儀器(上海)有限公司)，中藥材粉碎機(jī)(永康市鉑歐五金制品有限公司)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海愛(ài)朗儀器有限公司)，干燥器(上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司)，索氏提取器。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 水分和油脂含量的測(cè)定

將素心蠟梅種子分為種皮和種仁兩部分，分別粉碎、過(guò)篩備用。水分含量的測(cè)定參照文獻(xiàn)[10]的方法。將稱(chēng)量瓶烘干，冷卻至室溫，并重復(fù)至恒溫準(zhǔn)確稱(chēng)重(W0)，分別稱(chēng)取種皮粉末或種仁粉末5 g，放入稱(chēng)量瓶中，精密稱(chēng)重(W1)。在95～105℃下烘干4 h后，于干燥器中放置30 min，精密稱(chēng)重(W2)，按下式計(jì)算種皮和種仁水分含量。

水分含量=(W1-W2)/(W1-W0)×100%

采用GB 5009.6—2016的索氏提取法進(jìn)行油脂含量的測(cè)定。

1.2.2 素心蠟梅種皮油和種仁油的提取

分別精密稱(chēng)取素心蠟梅種皮和種仁的粉末150 g，加入正己烷，于60～70℃加熱浸泡提取12 h，過(guò)濾得正己烷提取液，將提取液在55～65℃下進(jìn)行減壓蒸餾回收溶劑，最后加入0.5%活性炭進(jìn)行脫色及除雜質(zhì)，分別得到素心蠟梅種皮油和種仁油。

1.2.3 脂肪酸組成的測(cè)定

分別稱(chēng)取素心蠟梅種皮油和種仁油10 g，置于250 mL燒瓶中，加6%的KOH乙醇溶液50 mL，連接回流冷凝管，在85℃水浴上煮沸2 h，對(duì)素心蠟梅種皮油和種仁油進(jìn)行皂化處理。

皂化完成后，停止加熱，從回流管頂部加入50 mL水并旋轉(zhuǎn)搖動(dòng)。冷卻后轉(zhuǎn)移皂化液到250 mL分液漏斗，將50 mL石油醚倒入分液漏斗，反復(fù)萃取不皂化物3～4次，合并石油醚層，水洗至中性，回收石油醚得不皂化物。皂液加硫酸酸化，再用石油醚抽提3次，合并石油醚層，水洗至中性，加無(wú)水硫酸鈉干燥，回收石油醚得總脂肪酸。

將上述得到的總脂肪酸加甲醇15 mL，再加濃硫酸1.5 mL，水浴回流1 h，冷卻，加水，用石油醚抽提3次，合并石油醚層，水洗至中性，加無(wú)水硫酸鈉干燥，回收石油醚，得總脂肪酸甲酯，按GC-MS條件分析脂肪酸組成。

1.2.4 不皂化物成分鑒定

將1.2.3中提取的不皂化物溶解于0.2 mL二硫化碳中，按GC-MS條件分析不皂化物成分組成。

1.2.5 GC-MS分析條件

GC條件：Agilent HP-5MS氣相色譜柱(30 m×250 μm×0.25 μm)；載氣為高純氦氣；起始柱溫60℃，程序升溫以4℃/min升至250℃，保持10 min；進(jìn)樣量0.4 μL，以分流比10∶1分流進(jìn)樣；柱流量1 mL/min。

MS條件：EI離子源，全掃描方式，接口溫度250℃，離子源溫度220℃，電離能量70 eV。

2 結(jié)果與分析

2.1 素心蠟梅種皮、種仁水分和油脂含量

按1.2.1方法對(duì)素心蠟梅種皮、種仁水分含量進(jìn)行測(cè)定，同一樣品測(cè)定3次，得到素心蠟梅種皮和種仁水分含量無(wú)顯著差異，水分含量為6.05%～7.65%，平均水分含量為6.76%。素心蠟梅種皮油脂含量為12.14%，種仁油脂含量為32.51%。

2.2 素心蠟梅種皮油和種仁油的脂肪酸組成

表1、表2分別為素心蠟梅種皮油和種仁油的脂肪酸組成。

從表1可以看出，素心蠟梅種皮油中共檢測(cè)出16種脂肪酸，其中14種被定性鑒定，主要脂肪酸為十八碳二烯酸(57.70%)、棕櫚酸(21.78%)、油酸(8.27%)、二十烷酸(4.13%)。素心蠟梅種皮油中不飽和脂肪酸含量較高，為70.72%。

從表2可以看出，素心蠟梅種仁油中共檢測(cè)出16種脂肪酸，其中13種被定性鑒定，主要為十八碳二烯酸(56.76%)、棕櫚酸(17.03%)、二十烷酸(8.26%)、油酸(7.31%)。素心蠟梅種仁油中不飽和脂肪酸含量較高，為71.28%。

表1 素心蠟梅種皮油脂肪酸組成及相對(duì)含量 %

表2 素心蠟梅種仁油脂肪酸組成及相對(duì)含量 %

脂肪酸參與人體代謝，有廣泛的生理作用[11]。研究表明，不飽和脂肪酸具有降低血清膽固醇的作用，進(jìn)而降低高血壓、心臟病及中風(fēng)等疾病的發(fā)病率[12]。素心蠟梅種子油中十八碳二烯酸含量較高，是一種新發(fā)現(xiàn)的富含十八碳二烯酸資源。十八碳二烯酸在工業(yè)上可用于制肥皂、油漆、乳化劑等，醫(yī)藥上可用于治療動(dòng)脈粥樣硬化和血脂過(guò)高等癥狀。從脂肪酸組成上看，素心蠟梅種子油有較好的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和保健功能，可進(jìn)一步提高其開(kāi)發(fā)利用價(jià)值，使其能廣泛應(yīng)用于醫(yī)療、香料、化妝品等行業(yè)[13-14]。因此，素心蠟梅種子油具有較大的潛在經(jīng)濟(jì)價(jià)值。

2.3 素心蠟梅種皮油和種仁油不皂化物組成

表3、表4分別為素心蠟梅種皮油和種仁油的不皂化物組成。

從表3可以看出，從素心蠟梅種皮油中共檢測(cè)出20種不皂化物，其中鑒定了18種，相對(duì)含量較高的是二十三烷(60.82%)和二十烷(33.93%)。

從表4可以看出，素心蠟梅種仁油中共檢測(cè)出20種不皂物，其中鑒定了19種，相對(duì)含量較高的是二十三烷(53.23%)和二十烷(35.30%)。

素心蠟梅種子油不皂化物中富含的二十三烷和二十烷可用于有機(jī)合成。素心蠟梅種仁油不皂化物中角鯊烯的含量較高，角鯊烯可用于調(diào)節(jié)膽固醇代謝及降血脂、降血糖，并具有抑菌、抗菌作用。此外，角鯊烯還在化妝品、食品機(jī)械潤(rùn)滑劑、殺蟲(chóng)劑等行業(yè)有著廣泛應(yīng)用[15]。

表3 素心蠟梅種皮油不皂化物組成及相對(duì)含量

表4 素心蠟梅種仁油不皂化物組成及相對(duì)含量

3 結(jié) 論

素心蠟梅種皮油脂含量為12.14%，種仁油脂含量為32.51%。素心蠟梅種皮油和種仁油中都以十八碳二烯酸和棕櫚酸的含量最高，其中種皮油中十八碳二烯酸和棕櫚酸的含量分別為57.70%和21.78%，種仁油中十八碳二烯酸和棕櫚酸的含量分別為56.76%和17.03%。素心蠟梅種皮油和種仁油中不皂化物主要成分都是二十三烷和二十烷。素心蠟梅種子油不飽和脂肪酸含量較高，具有良好的開(kāi)發(fā)利用價(jià)值和廣闊的應(yīng)用前景。