鄭涵之(個舊市自來水公司，云南 個舊 661000)

1 影響飲用水中微生物檢測的因素

1.1 檢測環(huán)境對微生物檢測結果有影響

飲用水中微生物的含量的檢測，環(huán)境對于其影響是比較大的?？諝獾臏囟?、濕度以及空氣中的含氧量情況，還有微生物培養(yǎng)基中所含有的營養(yǎng)成分都會產生比較大的影響。有的環(huán)境甚至會導致水樣中的微生物大量死亡，這種情況下，自然是無法準確檢測出飲用水中微生物的含量了。同時，還要確保檢測過程中的所有操作都是在無菌的情況下進行的，避免外部菌群進入待檢測水樣，造成對水樣中微生物群落的污染，導致最終檢測出的菌群的數量其實是大于飲用水中實際含有的菌群的數量的，造成對飲用水質量的誤判。

1.2 實驗設備對微生物檢測結果有影響

對于用于飲用水微生物檢測的實驗設備一定要進行定期的保養(yǎng)和維護，要確保其各項指標在使用時都是正常的，一定不能出現(xiàn)因為設備老化等問題導致的檢測結果不準確。尤其是在飲用水的微生物的檢測過程中，會頻繁地用到恒溫箱，檢測人員在使用培養(yǎng)箱對檢測樣品進行培養(yǎng)時，一定要預先對恒溫箱中各個區(qū)域或者角落的溫度進行檢測，確保恒溫箱內部的溫度是在規(guī)定的標準范圍之內的，才可將檢測樣品放進去。避免因為溫度問題導致對水樣中的菌落培養(yǎng)不到位，致使最終檢測結果失誤。

1.3 人為因素導致微生物檢測結果有異常

實驗操作人員對于飲用水中微生物檢測的主要影響在于操作人員技術的規(guī)范性。若檢測人員在進行微生物檢測的過程中沒有按照規(guī)定的檢測標準去執(zhí)行，或者執(zhí)行得不夠到位，則有可能造成最終檢測結果出現(xiàn)比較大的誤差。另外，飲用水中微生物含量的檢測是有時效性的，若實驗人員沒有及時對采取的式樣進行檢測，則水樣中的微生物有可能因為時間的原因被破壞掉或者已經發(fā)生一些改變。

2 飲用水微生物檢測質量控制

為了增強生活飲用水中微生物的檢測與分析結果的準確性，檢測人員在進行取樣檢測的過程中要注意對各影響因素的控制，要控制好實驗室的檢測環(huán)境，注意各檢測設備以及試驗器皿的清潔與消殺工作，將實驗環(huán)境對于檢測結果的影響降到最低。要使用能夠滿足水樣的檢測需求的設備，其測量精度以及溫度控制范圍等一定要符合相關的檢測規(guī)定。

3 飲用水中微生物檢測的檢測項目

3.1 菌落總數

飲用水水樣中的菌落總數指的是在有氧環(huán)境中，將待檢測的水樣與與菌落培養(yǎng)基混合放置于37℃的恒溫環(huán)境中培養(yǎng)48小時，之后檢測水樣中的菌落的數量并除以水樣的體積所獲得的數字即為標準體積的水樣中的菌落總數[1]。菌落總數只能作為飲用水的一般性污染檢測指標，因為對于某些厭氧或微需氧菌以及有特殊要求的菌類來說，這樣的培養(yǎng)環(huán)境并不能滿足其生存需求，致使這些菌類很難繁殖，會導致其銳減甚至死亡。

3.2 總大腸菌群

大腸菌群在一定的條件下夠幫助乳糖發(fā)酵產生酸液或者氣體，進行水樣中的總大腸菌群的測定時使用的就是這個原理。總大腸菌群作為反映飲用水被糞便污染情況的指標，其一般檢測結果為每100mL的水樣中的大腸菌群的最近似數，若其結果超過了飲用水中微生物含量規(guī)定，就說明飲用水可能受到了人畜糞便的污染[2]。

3.3 耐熱大腸菌群

耐熱大腸菌群又名糞大腸菌群，它也是大腸菌群的一種，耐熱大腸菌群在44～44.5℃的環(huán)境中進行培養(yǎng)后會在24小時內發(fā)酵乳糖并產酸產氣[3]。耐熱大腸菌群的生存條件更為苛刻，絕大多數的耐熱大腸菌群都是直接來源于人畜的糞便。故而，若所測試的水樣中含有耐熱大腸菌群則更能說明飲用水受到了糞便的污染，進而說明飲用水中含有腸道致病菌的可能性也更大。耐熱大腸菌群的測定是對水樣中的總大腸菌群測定的一種補充，是對飲用水是否受到污染的進一步確認，是指示飲用水糞便污染的更明確的指標。

4 水樣采集規(guī)則及注意事項

4.1 采集原則

在進行飲用水的水樣采集的過程中，一定要注意所采集的水樣必須能夠代表所要測試的水源的質量，除此之外還要保證所采集的水樣不會受到外部的任何意外因素的污染。在進行水樣采集之前，一定要制定相關的采樣計劃，要確定將使用怎樣的采樣方法，在什么地點，采取多少數量的水樣，每份水樣的體積又是多少。同時，還要注意，采集到的水樣的保管與運輸，要進行一定的采樣質量控制，確保所采集的水樣最終的測定結果是能夠完全代表所要測定的飲用水的質量的。

4.2 采集容器

在進行采樣容器的選擇時，要遵循一定的選擇原則，要從待測水樣的采集需求出發(fā)，選取最合適的采集容器，要注意采集容器的材質，開口，體積等。此外，容器的內壁也不能對所要測試的組分有吸收或者吸附的影響。裝取水樣的容器對于外界的環(huán)境要有充分的適應性并且其抗震能力也要相對強一些。在容器的大小，形狀以及質量的選擇上都要與采樣的目標相結合，幫助采樣人員更準確地獲取到最合適的水樣。

4.3 自來水水樣

自來水的水樣采集包含兩個部分：首先是出場水。出廠水是經自來水廠處理過后的水，進行出廠水的采集時，采集地點的設置應該著重于出廠二字，也就是在飲用水處理完成之后，被送往城市的各用水區(qū)域之前的之一時間段的某一個點上。末梢水則是城市居民的水龍頭出的水。進行末梢水的水樣采集時，要注意采集的時間。在水樣采取時，應該先將水龍頭打開讓水流流出一段時間，避免自來水在管道中滯留造成的部分組分的析出，附著。同時還應該對水龍頭進行消毒處理，避免水龍頭上的微生物混入采集的水樣中。

4.4 水源水水樣

所謂的水源水是指城市生活飲用水供水水源地的水。在進行水源水的采樣是，一般會選取汲水處的水進行采集。水源水的采集有：表層水的采集。如河流，湖泊等水源地，可以直接使用水桶等容器進行水樣采集。一定深度的水的采集。如水庫等有一定水深的水源地，則可使用直立式采水器進行水樣采集。最后還有泉水和井水的水樣采集。泉水的采樣分為兩種狀況，一種是自噴泉水，這種直接在泉水涌出口進行水樣采集即可。而不自噴的泉水，則需要將抽水管中的水用新水代替后，才能使用采樣工具進行采集。

4.5 水樣采集注意事項

在進行飲用水的水樣采集的過程中，要注意所有的環(huán)節(jié)都要進行嚴格的無菌操作，避免水樣遭受到來自外界菌群的污染。對于采集好的水樣，要做好其標記工作。要按照一定的規(guī)律標記好每份水樣的名稱，采集地點，時間等。并將所有的水樣整齊地放置好。在運送水樣的過程中，要注意中間消耗的時間最好不要超過2h。

5 各項微生物指標的檢測方式

5.1 菌落總數測定方式

在進行水樣的菌落總數的測定過程中，要先將即將檢測的水樣充分混勻，避免因為靜止造成水樣中的微生物分布不均。之后要將已經混勻的待測樣品移取到培養(yǎng)皿中，在進行樣品移取的過程中要注意所使用的移取儀器以及培養(yǎng)皿的消毒工作。在已經盛放有待測樣品的培養(yǎng)皿中倒入一定量的已經處理好的培養(yǎng)基并做好其與待測樣品的混合工作，這里不能使用攪拌的方式，而是要通過旋搖培養(yǎng)皿來進行混勻工作。之后，按照規(guī)定的培養(yǎng)方式，對已有的待測混合物進行足夠時間的培養(yǎng)，完成后進行菌落計數即可。

5.2 總大腸菌群測定方式

總大腸菌群的測定一般使用多管發(fā)酵法。第一步是初步發(fā)酵實驗。將水樣與乳糖蛋白培養(yǎng)液混合后在在特定的溫度下對其進行固定時間的培養(yǎng)，觀察其有無產酸產氣現(xiàn)象。若是有，就可進行第二步，這一步對于待測樣品的培養(yǎng)需要用到的是伊紅美藍培養(yǎng)基，主要是觀測待測樣品中的菌落特征，對菌落的種類進行一個大致的判斷，而為了幫助這種判斷的結果更加明確，一般還需要進行革蘭氏染色和顯微鏡檢的操作。最后一步是驗證試驗。為了確保檢測出的菌群的確是大腸菌群，要進行再次試驗對其種類進行驗證。這里重復上述步驟的操作即可。

5.3 耐熱大腸菌群測定方式

耐熱大腸菌群的測定方式與總大腸菌群的測定方式類似，知識在第一步的初步發(fā)酵實驗之后，要再添加一步耐熱培養(yǎng)。即將第一步發(fā)酵后的陽性管中的培養(yǎng)物與EC肉湯進行接種，然后在44.5℃的培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)24h，到時間之后觀察期產酸產氣情況。第三步則是平板培養(yǎng)[4]。對于耐熱培養(yǎng)后產氣的樣品將其接種在EMB平板上，在36±1℃的培養(yǎng)溫度中培養(yǎng)24h。這一步屬于是證實實驗，若發(fā)現(xiàn)有典型菌落，則查詢MPN表獲取菌落的具體信息，之后出具檢測報告。

5.4 大腸埃希氏菌測定方式

大腸埃希氏菌測定使用的是EC-MUG培養(yǎng)基，其檢測對象是總大腸菌群檢測中經過初步發(fā)酵實驗后產出了酸液或者氣體的樣品。將檢測試管中的樣品液體倒入裝有EC-MUG培養(yǎng)液的試管中，使用與耐熱大腸桿菌檢測中同樣的培養(yǎng)條件，進行恒溫箱或者恒溫水浴培養(yǎng)，若使用的是恒溫水浴，培養(yǎng)管中的液體必須完全淹沒在水浴中。完成培養(yǎng)步驟后，通過紫外燈的輔助來幫助查看是否有大腸埃希氏菌的存在。

6 分析飲用水水樣微生物檢測的結果

通過上述檢測方式依次檢測出所有待檢測的水樣中的的各菌落群數后，通過統(tǒng)計學的方式計算出平均的菌群數量，查詢相關的國家標準，出具飲用水中微生物含量是否合格的檢測報告。若不合格，要指明其污染等級以及是哪種污染。要注意，飲用水微生物含量檢測報告中所包含的各項數據在進行錄入時，若其菌落數為1～100時，可直接錄入真實數據即可，若大于100時，則取其中兩位有效數字。合格的飲用水中應該是不含有總大腸菌群，耐熱大腸菌群以及大腸埃希氏菌群的，而菌落的總數也應該在100/100mL以內。

7 結語

城市生活飲用水中的微生物的檢測與分析反映了城市生活飲用水中的微生物的含量，進而反映了飲用水中是否包含有腸道致病菌，是否適合居民的日常飲用，是檢測生活飲用水的質量的重要內容，也是保障城市居民飲水安全的重要措施。檢測人員要在嚴格的檢測環(huán)境下對精心采集的檢測水樣進行專業(yè)的檢測工作，幫助城市居民做好生活飲用水的質量把關工作，提高城市居民的用水安全。