劉宇 羅丹 劉洋

（1．東北制藥集團(tuán)沈陽第一制藥有限公司 制劑檢驗(yàn)中心，遼寧 沈陽 110027；2．東北制藥集團(tuán)沈陽第一制藥有限公司103分廠，遼寧 沈陽110027）

微生態(tài)制劑，是指運(yùn)用微生態(tài)學(xué)原理，利用對(duì)宿主有益無害的益生菌或益生菌的促生長(zhǎng)物質(zhì)，經(jīng)特殊工藝制成的制劑。其中活菌制劑口服進(jìn)入腸道后，可促進(jìn)腸道內(nèi)其他正常菌的生長(zhǎng)繁殖。地衣芽孢桿菌活菌制劑的菌株從人體內(nèi)分離而得，為我國(guó)首次分離的無毒菌株的活菌制劑，經(jīng)研究證明是無毒，安全、有效的國(guó)家一類新藥。

地衣芽孢桿菌活菌制劑的安全性檢查，根據(jù)《中國(guó)藥典》2015 版三部微生態(tài)活菌制品總論中（第45 頁）安全試驗(yàn)進(jìn)行，方法為小鼠口服灌胃。安全試驗(yàn)是通過動(dòng)物試驗(yàn)進(jìn)行的非特異性毒性檢查，應(yīng)根據(jù)制品的使用途徑和人用劑量確定試驗(yàn)方法。安全試驗(yàn)通過給予動(dòng)物一定劑量的藥物，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)觀察動(dòng)物出現(xiàn)的異常反應(yīng)或死亡情況，以判斷藥品中是否存在意外的不安全因素。微生態(tài)活菌制品安全試驗(yàn)為口服灌胃給藥，每次都需要將灌胃針由小鼠口角插入，最終深入胃部，為小鼠被動(dòng)強(qiáng)行給藥。如果在給藥過程中小鼠劇烈掙扎，很容易刺傷食管和內(nèi)臟，即使實(shí)驗(yàn)員再小心操作也無法完全避免小鼠受傷的情況發(fā)生，而且實(shí)驗(yàn)過程中部分小鼠因受驚會(huì)出現(xiàn)炸毛、痙攣等痛苦表現(xiàn)，給小鼠帶來極大的傷害。根據(jù)要求實(shí)驗(yàn)小鼠體重必須在18～22g范圍內(nèi)，小鼠生長(zhǎng)快，體重很容易超標(biāo)，大部分企業(yè)因考慮到實(shí)驗(yàn)成本不可能繼續(xù)飼養(yǎng)，超重的小鼠不滿足實(shí)驗(yàn)要求，只能被淘汰處死，這是對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源的一種浪費(fèi)，也不符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理要求。況且，每次安全試驗(yàn)要求5只小鼠，安全試驗(yàn)?zāi)壳吧袩o替代方法，每年累計(jì)需要使用成百上千只小鼠，既然微生態(tài)活菌制劑是安全的、對(duì)宿主無害的制劑，是否可以考慮取消活菌制劑的安全試驗(yàn)？

地衣芽孢桿菌活菌制劑（2013-2018年）安全試驗(yàn)檢驗(yàn)結(jié)果均無異常，小鼠均健康存活體重增加，符合規(guī)定。通過對(duì)2200批產(chǎn)品檢驗(yàn)結(jié)果歷史數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)可見，生物學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目、鑒別實(shí)驗(yàn)、雜菌檢查和安全試驗(yàn)均符合規(guī)定，無一例不合格結(jié)果。安全試驗(yàn)即異常毒性試驗(yàn)，是指外源性毒性物質(zhì)及意外的不安全因素，通常由生產(chǎn)過程中引入或其他原因所致，不同于藥物本身的毒性特征。是考察藥品在生產(chǎn)過程中引入或藥物降解等導(dǎo)致的毒性，主要和生產(chǎn)工藝水平有關(guān)，并非考察藥品本身毒性。WHO生物測(cè)定專家委員會(huì)曾于1997年開會(huì)討論異常毒性檢查的必要性問題，認(rèn)為最初是在沒有實(shí)施GMP情況下為以防萬一設(shè)定該檢驗(yàn)項(xiàng)。隨著現(xiàn)在GMP已經(jīng)發(fā)展成熟，藥廠都沒有出現(xiàn)異常毒性不合格的現(xiàn)象，WHO 也根據(jù)資料分期分批取消該項(xiàng)，專家認(rèn)為異常毒性檢查缺乏專屬性和科學(xué)性，其結(jié)果各實(shí)驗(yàn)室間差異極大，與產(chǎn)品質(zhì)量和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物都毫無關(guān)聯(lián)，不足以反應(yīng)產(chǎn)品質(zhì)量。歐美等制藥強(qiáng)國(guó)已經(jīng)逐步取消該項(xiàng)檢驗(yàn)，美國(guó)藥典USP41 通則從2019 年1 月1 日已經(jīng)取消2.6.9.Abnormal toxicity異常毒性檢查法。

藥企為了具備安全試驗(yàn)檢驗(yàn)?zāi)芰?，需要建造?dú)立實(shí)驗(yàn)動(dòng)物樓，配備潔凈區(qū)系統(tǒng)或屏障系統(tǒng)、小鼠IVC籠具、滅菌設(shè)備，專業(yè)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)人員和飼養(yǎng)人員，實(shí)驗(yàn)設(shè)施維護(hù)和動(dòng)物飼養(yǎng)也增加企業(yè)成本支出，如果取消安全試驗(yàn)，將大大減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的使用，降低制藥企業(yè)的檢驗(yàn)成本，節(jié)約人力物力，而且取消后藥品檢驗(yàn)周期由原來七天減少為五天，將縮短物流倉(cāng)儲(chǔ)周期，極大方便藥品生產(chǎn)和銷售，大大節(jié)省了時(shí)間成本，減少企業(yè)生產(chǎn)運(yùn)營(yíng)負(fù)擔(dān)。

由于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的突出貢獻(xiàn)，其自身問題得到了世界的高度關(guān)注，英國(guó)在動(dòng)物福利方面做了大量工作，在1986 年，制訂了《動(dòng)物（科學(xué)方案）法令》，同時(shí)英國(guó)動(dòng)物學(xué)家通過大量的調(diào)查研究提出了“3R原則”，即減少每一次實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中所需要的動(dòng)物數(shù)量，優(yōu)化現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)以減少動(dòng)物所受到的痛苦和傷害，使用其它的手段來取代動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。為了加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的管理工作，我國(guó)從1988年11月14日開始施行《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》，至今已經(jīng)三十年，各省市也進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理立法工作，已經(jīng)與國(guó)際接軌。

微生態(tài)活菌制劑是安全的、對(duì)宿主無害的，而且安全試驗(yàn)?zāi)壳盁o其他可替代方法，為滿足實(shí)驗(yàn)動(dòng)物3R原則“減少、替代、優(yōu)化”要求，盡量減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的使用，最大限度地節(jié)約實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的資源，加快實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理水平提高，減輕制藥企業(yè)不必要的生產(chǎn)成本負(fù)擔(dān)，實(shí)現(xiàn)藥典標(biāo)準(zhǔn)與國(guó)際迅速接軌，取消微生態(tài)活菌制劑安全試驗(yàn)，指日可待，勢(shì)在必行。