蔡 鵬，常相偉，朱 瓊△

（1. 江蘇省泰州市食品藥品檢驗(yàn)所，江蘇 泰州 225300； 2. 中國藥科大學(xué)，江蘇 南京 210009）

中藥丹參為唇形科多年生草本植物丹參Labiatae Salvia mihiorrhizaBge. 的莖和根，具有活血化瘀、通經(jīng)通絡(luò)等功效。微量元素在丹參中含量豐富，現(xiàn)代營養(yǎng)學(xué)中微量元素是生活中必不可少的，同時微量元素可增強(qiáng)藥效，如鋅（Zn）、鐵（Fe）、錳（Mn）在人體內(nèi)不僅具有生物活性，還參加人體合成和代謝生物大分子（如合成核苷酸、生物酶等）。微量元素在中藥材中普遍存在，既為植物組織結(jié)構(gòu)的組成部分，也是中藥發(fā)揮藥效治療疾病的有效成分；其含量跟周圍生長的環(huán)境有緊密關(guān)系，對于研究中藥材的道地性和質(zhì)量具有重要指導(dǎo)意義。同時，有毒元素的含量還可作為評價中藥材質(zhì)量的指標(biāo)。電感耦合等離子體-原子發(fā)射光譜（ICP-OES）法作為微量元素快速測定的一種手段，可同時測定多種元素，在藥品的質(zhì)量研究中運(yùn)用廣泛[1-8]。丹參在中國的產(chǎn)地分布很廣，對不同產(chǎn)地丹參中微量元素的研究也可作為丹參鑒別的一種手段[9-10]。本研究中測定7 個產(chǎn)地丹參中的12 種微量元素的含量，分析其微量元素含量的差異性，可為丹參的質(zhì)量控制提供參考。現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

MARS 型微波消解儀（美國CEM 公司）；ICAP-7400 型電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀（美國熱電公司）；Milli-Q 型超純水系統(tǒng)（美國Millipore 公司）；XS-105 型電子天平（瑞士梅特勒天平公司，分度值0.1 mg）。

1.2 試藥

鈣（Ca）單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 000 μg/mL，批號為16032），鋁（Al）單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（100 μg/mL，批號為16032），無機(jī)元素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液[含鉛（Cu），Mn，鎂（Mg），Zn，F(xiàn)e，鋇（Ba），鉻（Cr），鎳（Ni）為50 μg/mL，含鉛（Pb）為100 μg/mL，批號為15111]均由中國計(jì)量科學(xué)研究院提供；鈦（Ti）單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 000 μg/mL，批號為169023，國家有色金屬及電子材料分析測試中心）；65%濃硝酸（優(yōu)級純，德國Mreck 公司）。

丹參樣品產(chǎn)地共7 個，分別為安徽、山西、山東、河北、河南、甘肅、陜西，為避免不同地點(diǎn)肥力均勻性差異，對同一產(chǎn)地多點(diǎn)采樣，經(jīng)南京農(nóng)業(yè)大學(xué)博士生導(dǎo)師郭巧生教授鑒定為正品。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液制備

取丹參樣品30 g，粉碎，過20 目藥篩，置烘箱中85 ℃烘4 h，取0.5 g，精密稱定，置50 mL 聚四氟乙烯材質(zhì)的微波消解罐內(nèi)，加5 mL 65%硝酸，混勻，浸泡過夜，于電熱板上加熱10 min 進(jìn)行預(yù)消解，放冷，蓋上內(nèi)蓋，旋緊外蓋，置微波消解儀中，按表1 中的消解條件進(jìn)行消解；待消解完全后，取出消解罐，擰開蓋子，置趕酸器上，120 ℃趕酸2.5 h，讓樣品里的棕色煙霧揮干凈，待微波消解罐中剩余液體接近1 mL，用超純水分3 次轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中，并用水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液（測定時，如果樣品中元素含量超過標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，稀釋合適的倍數(shù)再測定）。同法制備空白溶液。取無機(jī)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，用2%硝酸溶液稀釋為不同質(zhì)量濃度（Cu，Mn，Mg，Zn，F(xiàn)e，Ba，Cr，Ni，Al 0.2，0.4，0.8，1.0，2.0 μg/mL，Pb 0.4，0.8，1.5，2.0，4.0 μg/mL，Ti 0.05，0.1，0.5，1.0，1.5，2.0 μg/mL，Ca 2，4，6，8，10 μg/mL）的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，同時用2%硝酸溶液作為陰性標(biāo)準(zhǔn)溶液。

表1 微波消解條件

2.2 儀器條件

等離子體功率：1 150 W；霧化器流速：0.5 L/min；曝光時間：5 s；冷卻氣流速：12 L / min；輔助器流速：0.5 L/min；積分時間：15 s；清洗時間：40 s。各元素的檢測波長見表2。采用ICP-OES 全波長掃描得出的檢測波長，各元素的檢測干擾均最小。

表2 各元素分析測定波長

2.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察：依次將各系列質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測定，以響應(yīng)強(qiáng)度為縱坐標(biāo)（Y）、標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度（X）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，回歸方程見表3。所有相關(guān)系數(shù)均在0.999 以上，表明線性關(guān)系良好。取10 個空白溶液測定空白強(qiáng)度值，按空白值的3 倍標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算檢測限（LOD）。

表3 各元素的線性范圍、線性回歸方程及檢出限

精密度試驗(yàn)：取1.0 μg/mL 的各元素標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)進(jìn)樣6 次，讀出響應(yīng)值。結(jié)果響應(yīng)值的RSD均在0.12% ～0.87%間（n=6），表明儀器精密度良好。

重復(fù)性試驗(yàn)：稱取樣品（產(chǎn)地安徽） 6 份，依法制備供試品溶液，按擬訂儀器條件測定，計(jì)算含量。結(jié)果的RSD均小于2%（n=6），符合微量元素分析要求。

加樣回收試驗(yàn)：取樣品（產(chǎn)地安徽）粉末6 份，每份0.25 g，精密測定，分別精密加入不同濃度的對照品溶液，依法制備供試品溶液，進(jìn)樣測定，計(jì)算加樣回收率。結(jié)果見表4。

2.4 樣品含量測定

依法制備供試品溶液，注入ICP -OES 的進(jìn)樣管中進(jìn)行測定，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算各元素的含量。結(jié)果見表5。

3 討論

丹參中主要含有微量元素Cu，Mn，Mg，Zn，F(xiàn)e，Ba，Al，Ti，Ca，而Cr，Ni，Pb 有害元素的含量較少，說明不同產(chǎn)地的丹參質(zhì)量均良好，但存在地域性差異。

丹參中常見元素Mg，F(xiàn)e，Al，Ca 的含量相比其他元素均較高，這是人體的必需微量元素。其中山東丹參中的Mn，Mg，F(xiàn)e 含量較高，明顯高于其他產(chǎn)地。

Ti 元素在不同產(chǎn)地丹參中含量存在一定的差異性，其中安徽丹參中Ti 含量達(dá)40.06 μg/g，且Ti 含量對植物有自身修復(fù)和保護(hù)作用。安徽丹參中Al 含量明顯高于其他產(chǎn)地，甘肅丹參中的Ca 含量明顯高于其他產(chǎn)地，出現(xiàn)這種地域性差異可能與當(dāng)?shù)氐耐寥拉h(huán)境有關(guān)系。

樣品前處理中采用了微波消解法，操作簡單，減少了人為的因素干擾，樣品的損失減少，且采用趕酸器對樣品進(jìn)行趕酸，溫度易于控制，特別是對易于揮發(fā)的元素，合理的溫度更有利于元素的準(zhǔn)確測定。除了用微波消解，還采用了濕法消解對前處理做了比較，結(jié)果濕法消解較煩瑣，2 種前處理結(jié)果無明顯差異，說明微波消解能消解完全，操作簡便，故采用微波消解進(jìn)行前處理。

表4 各元素加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n=3）

表5 不同產(chǎn)地丹參中各元素含量（n=3，μg/g）

ICP-OES 在測定過程中，可對樣品行全波長掃描，選擇干擾少的譜線作為測定波長。其軸向和徑向2 種觀測模式中，徑向模式抗干擾能力強(qiáng)，適合強(qiáng)度高，信號不容易溢出；軸向模式水平通道長，適合測定非機(jī)體干擾的樣品。文中濃度高的元素采用徑向觀測模式，濃度低的元素采用軸向觀測模式。ICP-OES 在環(huán)境、食品等行業(yè)的應(yīng)用也廣泛，對元素的形態(tài)研究也很有優(yōu)勢[11-15]。

中藥材中的微量元素還有很多，用ICP-OES 還不能對其進(jìn)行全面分析。對于含量更低的元素，可采用電感耦合等離子體-質(zhì)譜進(jìn)行測定，且微量元素對人體的藥理作用也很重要，今后的研究可進(jìn)一步探討含量與藥理作用的關(guān)系。