朱詩(shī)雅，翟齊嘯，趙星，孫新凱，路江浩，李華文，趙建新，張灝，田豐偉*，陳衛(wèi)

1(江南大學(xué)，食品科學(xué)與技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 無(wú)錫，214122) 2(江南大學(xué) 食品學(xué)院，江蘇 無(wú)錫，214122)3(河北一然生物科技有限公司，河北 石家莊，050800)

酒精性肝病(alcoholic liver disease，ALD)，是全球慢性肝病的主要原因，包括從肝臟脂肪變性到酒精性肝炎、纖維化、肝硬化和肝細(xì)胞癌發(fā)展的一系列肝損傷疾病[1]。隨著經(jīng)濟(jì)水平的提高和社交活動(dòng)的增多，全世界范圍內(nèi)尤其發(fā)展中國(guó)家的人均酒精消耗量逐年上升，國(guó)內(nèi)外酒精性肝病患者也日益增多。而在我國(guó)，酒精性肝病已經(jīng)上升成為僅次于乙型病毒性肝炎的導(dǎo)致肝硬化的第二大病因[2]。因此，探討酒精性肝病的發(fā)病機(jī)制及防治措施具有十分重要的意義。酒精性肝損傷的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，主要是乙醇及其衍生物乙醛等在代謝過(guò)程中直接或間接導(dǎo)致的氧化應(yīng)激、腸源性內(nèi)毒素、炎性介質(zhì)和炎癥反應(yīng)等多種因素相互作用的結(jié)果[3-6]。其中，腸道屏障功能受損引起的腸源性內(nèi)毒素血癥及內(nèi)毒素激活枯否細(xì)胞(kupffer cells)在ALD的發(fā)生和發(fā)展中起著重要的作用[7-8]。

益生菌已被證實(shí)具有調(diào)節(jié)生理活性、維持腸道微生態(tài)平衡、降低膽固醇水平、提高抗氧化能力、改善機(jī)體免疫功能等多種功能，目前已被廣泛應(yīng)用于發(fā)酵乳制品、乳飲料、果汁、嬰兒食品以及藥品等領(lǐng)域，并得到廣大消費(fèi)者及醫(yī)療工作者的認(rèn)可[9]。已有臨床研究表明，酒精性肝損傷患者通過(guò)服用益生菌，腸道微生態(tài)恢復(fù)平衡，肝臟功能得到明顯改善[10]。目前雖然已經(jīng)有許多學(xué)者關(guān)注到益生菌對(duì)慢性酒精性肝損傷的作用，包括LactobacillusrhamnosusR0011[11]、LactobacillusplantarumLC27[12]、BifidobacteriumlongumLC67[12]、LactobacillusrhamnosusCCFM1107[13]、Bifidobacteriumanimalissubsp.lactisKV9[14]等，但仍主要集中在利用鼠李糖乳桿菌LGG(LactobacillusrhamnosusGG，LGG)對(duì)其機(jī)制進(jìn)行研究，對(duì)其他菌株的篩選及方法研究較少。

乳酸菌具有提高免疫力、降低膽固醇、抗氧化、調(diào)節(jié)腸道菌群等功能[15]。某些乳酸菌可通過(guò)減輕氧化應(yīng)激、調(diào)節(jié)腸道菌群、改善腸道通透性等方面緩解酒精引起的肝功能損傷[16]。乳桿菌屬是目前發(fā)酵行業(yè)應(yīng)用較多的一類(lèi)乳酸菌，包括鼠李糖乳桿菌、植物乳桿菌、干酪乳桿菌、發(fā)酵乳桿菌、瑞士乳桿菌等近10個(gè)種。有研究顯示，雖然都屬于乳桿菌屬，但不同種甚至同一種的乳桿菌其功能也不盡相同[17-18]。本研究選取幾株不同種類(lèi)的乳桿菌，通過(guò)小鼠試驗(yàn)研究比較不同乳桿菌對(duì)慢性酒精性肝損傷的緩解作用，并探討其緩解慢性酒精性肝損傷的機(jī)制，為相關(guān)產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)提供依據(jù)。其中，植物乳桿菌LP45已被證實(shí)具有降低膽固醇、提高免疫力、抑制胃腸道致病菌、調(diào)節(jié)腸道菌群等功能[19-22]。此外，鼠李糖乳桿菌L519分離自云南傳統(tǒng)發(fā)酵乳制品，瑞士乳桿菌L551(Lactobacillushelveticus551，L551)分離自西藏那曲傳統(tǒng)奶制品，以及副干酪乳桿菌L577(Lactobacillusparacasei577，L577)，均為具有較好體外性能的潛力菌株。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 實(shí)驗(yàn)菌株

鼠李糖乳桿菌L519、植物乳桿菌LP45、瑞士乳桿菌L551、副干酪乳桿菌L577，河北一然生物技術(shù)有限公司；鼠李糖乳桿菌LGG，美國(guó)菌種保藏中心。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)C57BL/6小鼠80只，雄性，8周齡，體重18～20 g，上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。

1.1.3 試劑

蛋白胨、酵母粉、葡萄糖、無(wú)水乙酸鈉、NaCl、多聚甲醛、無(wú)水乙醇等，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；脫脂乳粉，市售，上海恒天然商貿(mào)有限公司；Lieber DeCarli液體飼料，南通特洛菲飼料科技有限公司；葵花牌護(hù)肝片，黑龍江葵花藥業(yè)股份有限公司；丙二醛、谷胱甘肽、超氧化物歧化酶的測(cè)定試劑盒，南京建成生物工程研究所；小鼠內(nèi)毒素、腫瘤壞死因子α、白細(xì)胞介素6、白細(xì)胞介1β的ELISA試劑盒，南京森貝伽生物科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

SW-CJ-1FD超凈工作臺(tái)，蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司；日本TOMY SX-700全自動(dòng)高壓滅菌鍋，上海鼎謙生物科技有限公司；PB3002-N電子天平和EL204分析電子天平，上海梅特勒-托利多儀器有限公司；DGG-9123A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；GRP-9080恒溫恒濕培養(yǎng)箱，上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；DK-8D電熱恒溫水槽，上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；SCIENTZ-48高通量組織研磨器，寧波新芝生物科技股份有限公司；5424R小型臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)，德國(guó)Eppendorf公司；UV-2450紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，日本島津制造所；MB100-2A微孔板恒溫振蕩器，杭州奧盛儀器有限公司；MULTISCAN GO全波長(zhǎng)自動(dòng)酶標(biāo)儀，美國(guó)Thermo fisher公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 菌株培養(yǎng)及處理

將凍存的4株乳桿菌復(fù)蘇、活化2代后，接入MRS液體培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)18 h，在4℃下6 000 r/min離心10 min，棄去上清，所得菌體用滅菌的生理鹽水洗滌并離心3次后，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)為12%的脫脂乳作為保護(hù)劑，凍干濃縮成菌粉。灌胃小鼠前，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的生理鹽水重懸，調(diào)整菌液濃度為1.0×109CFU/mL，在37 ℃水浴中復(fù)蘇30 min后使用。

1.3.2 動(dòng)物模型的建立

SPF級(jí)健康C57BL/6雄性小鼠80只，8周齡，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，隨機(jī)分成8組，每組10只。采用含35%熱量酒精(alcohol-fed，AF)或等熱量麥芽糊精(pair-fed，PF)的Lieber DeCarli液體飼料飼喂，連續(xù)喂養(yǎng)8周[23]。第1組：空白對(duì)照組(PF)；第2組：酒精模型組(AF)；第3組：陽(yáng)性藥物對(duì)照組(AF+藥)；第4組：LGG陽(yáng)性對(duì)照組(AF+LGG)；第5組：鼠李糖乳桿菌L519干預(yù)組(AF+L519)；第6組：植物乳桿菌LP45干預(yù)組(AF+LP45)；第7組：瑞士乳桿菌L551(AF+L551)；第8組：副干酪乳桿菌L577干預(yù)組(AF+L577)。第1組，攝食量與第2組等量喂養(yǎng)(以等熱量麥芽糊精代替酒精)。第3、4、5、6、7、8組，最后2周添加護(hù)肝片溶液或菌懸液。所有樣品按照10 mg/kg體重進(jìn)行灌胃[16]。每天測(cè)定小鼠的食物攝入量，每周測(cè)定小鼠體重1次。小鼠喂養(yǎng)8周后，禁食12 h，麻醉后摘眼球取血，輔以頸椎脫臼法處死，收集血液和組織樣本。

1.3.3 分析方法

1.3.3.1 肝組織病理學(xué)觀察

取小鼠肝臟左葉同一位置的組織，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的多聚甲醛溶液固定后，經(jīng)過(guò)石蠟包埋、切片、蘇木精和伊紅染料染色后，在切片掃描儀下掃片觀察。

1.3.3.2 相關(guān)生化指標(biāo)測(cè)定

小鼠血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性，均利用全自動(dòng)血清生化分析儀進(jìn)行測(cè)定。肝勻漿中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽和丙二醛的測(cè)定，均按照相應(yīng)試劑盒具體操作說(shuō)明進(jìn)行。

1.3.3.3 血清內(nèi)毒素含量測(cè)定

血清中內(nèi)毒素的含量測(cè)定采用酶聯(lián)免疫分析法，按照ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.3.3.4 肝臟炎癥因子表達(dá)測(cè)定

肝臟中炎癥因子腫瘤壞死因子α、白細(xì)胞介素-1β、白細(xì)胞介素-6的表達(dá)水平均采用ELISA試劑盒檢測(cè)。

1.3.3.5 腸道緊密連接蛋白mRNA表達(dá)水平測(cè)定

采用Trizol法提取腸道組織中總RNA，然后利用反轉(zhuǎn)錄試劑盒進(jìn)行RNA逆轉(zhuǎn)錄，最后對(duì)腸道中緊密連接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1的mRNA表達(dá)水平進(jìn)行實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative real-time polymerase chain reaction，RT-PCR)分析。

1.3.3.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以平均值±均值標(biāo)準(zhǔn)誤差(mean±SEM)表示。兩組數(shù)據(jù)間的統(tǒng)計(jì)分析采用獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)，多組數(shù)據(jù)間的統(tǒng)計(jì)分析采用One-Way Aonva單因素方差分析。當(dāng)P<0.05時(shí)，視為組間具有顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 乳桿菌對(duì)慢性酒精暴露小鼠肝臟組織病理?yè)p傷的影響

長(zhǎng)期大量飲酒導(dǎo)致的慢性酒精性肝損傷，初期通常表現(xiàn)為酒精性脂肪肝。如圖1所示，慢性酒精暴露對(duì)小鼠肝臟造成了嚴(yán)重的病理?yè)p傷。對(duì)照組肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)較完整，有明顯的界線且胞漿均勻，有輕微脂肪空洞，無(wú)炎性浸潤(rùn)；而造模組脂肪變性明顯，有大片的脂肪空洞，肝細(xì)胞腫脹變形，有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，出現(xiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；乳桿菌干預(yù)則有效地緩解了這些病理?yè)p傷，表現(xiàn)為脂肪泡減少，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)減輕。其中，鼠李糖乳桿菌L519、植物乳桿菌LP45和瑞士乳桿菌L551效果較為顯著，肝細(xì)胞恢復(fù)正常，而副干酪乳桿菌L577效果較差，肝細(xì)胞仍腫脹變形，存在脂肪空泡。

a-PF組：b-AF組；c-AF+藥組；d-AF+LGG組；e-AF+L519組；f-AF+LP45組；g-AF+L551組；h-AF+L577組圖1 乳桿菌對(duì)慢性酒精暴露小鼠肝臟組織病理?yè)p傷的影響Fig.1 Effects of Lactobacillus treatment on pathological injuryof liver tissue in mice exposed to chronic alcohol(H&E,×200)

2.2 乳桿菌對(duì)慢性酒精暴露小鼠血清中轉(zhuǎn)氨酶含量的影響

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase，ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate aminotransferase，AST)主要存在于肝細(xì)胞胞漿內(nèi)，當(dāng)肝臟受到損傷時(shí)，細(xì)胞胞漿內(nèi)的轉(zhuǎn)氨酶進(jìn)入血液，導(dǎo)致血液中ALT和AST的含量升高[24]。對(duì)小鼠血清中ALT和AST的活性進(jìn)行分析，結(jié)果如圖2所示，慢性酒精暴露導(dǎo)致小鼠血清中ALT和AST活性顯著升高，且AST的含量大幅上升，明顯高于ALT，而乳桿菌干預(yù)后可以有效恢復(fù)ALT、AST的活性。其中，植物乳桿菌LP45和瑞士乳桿菌L551效果最為顯著，表明植物乳桿菌LP45和瑞士乳桿菌L551能夠有效抑制慢性酒精肝損傷小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶的升高。

a-小鼠血清中ALT變化;b-小鼠血清中AST變化圖2 乳桿菌對(duì)慢性酒精暴露小鼠血清中ALT和AST變化的影響Fig.2 Effects of Lactobacillus treatment on serum ALT and ASTlevels in mice exposed to chronic alcohol注：# P<0.05表示與PF組比較，具有顯著差異；*P<0.05表示與AF組比較，具有顯著差異。

2.3 乳桿菌對(duì)慢性酒精暴露小鼠肝臟中氧化指標(biāo)的影響

自由基及其誘導(dǎo)的脂質(zhì)過(guò)氧化是造成肝臟組織損傷的重要原因之一。正常情況下，細(xì)胞內(nèi)存在超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、谷胱甘肽(glutathione，GSH)、過(guò)氧化氫酶、和VE等抗氧化劑，可以有效清除自由基，維持體內(nèi)的抗氧化防御系統(tǒng)平衡[25]。但大量飲酒會(huì)破壞這種平衡，誘發(fā)氧化應(yīng)激，導(dǎo)致脂質(zhì)過(guò)氧化，抗氧化物質(zhì)SOD、GSH等大量消耗，脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛(malondialdehyde，MDA)增高，從而導(dǎo)致肝臟發(fā)生病變，各種生化指標(biāo)出現(xiàn)異常[26-27]。對(duì)小鼠肝臟中氧化指標(biāo)進(jìn)行分析，結(jié)果如圖3所示，慢性酒精處理后，與對(duì)照組相比，酒精模型組小鼠肝臟中MDA濃度明顯升高，而GSH含量和SOD活性顯著降低。相對(duì)于模型組，乳桿菌干預(yù)可以有效地降低MDA濃度，并恢復(fù)了GSH含量和SOD活性。其中，植物乳桿菌LP45表現(xiàn)最為突出。表明植物乳桿菌LP45能夠有效抑制慢性酒精引起的氧化損傷。

a-小鼠肝臟中MDA變化;b-小鼠肝臟中GSH變化;c-小鼠肝臟中SOD變化圖3 乳桿菌對(duì)慢性酒精暴露小鼠肝臟中MDA、GSH、SOD變化的影響Fig.3 Effects of Lactobacillus treatment on liver MDA, SOD and GSH levels in mice exposed to chronic alcohol

2.4 乳桿菌對(duì)慢性酒精暴露小鼠血清內(nèi)毒素含量的影響

內(nèi)毒素是來(lái)自腸道革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁外膜上的脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)成分，具有十分廣泛的生物活性，過(guò)量時(shí)能夠引起嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)[28]。研究表明，酒精導(dǎo)致腸道屏障受損，大量腸源性LPS進(jìn)入肝臟與kupffer細(xì)胞結(jié)合，引發(fā)一系列炎癥反應(yīng)，從而導(dǎo)致肝臟損傷[29]。對(duì)小鼠血清中LPS含量進(jìn)行分析，由圖4可知，慢性酒精處理后，酒精模型組小鼠血清中LPS含量明顯升高，而乳桿菌攝入后顯著降低了LPS含量。同時(shí)，本研究使用的Lieber-DeCarli標(biāo)準(zhǔn)型酒精液體模型飼料是一種高脂肪的酒精液體飼料，其中，脂肪熱量高達(dá)35%[30]。對(duì)照液體飼料和酒精液體飼料等熱量喂養(yǎng)，因此，長(zhǎng)期喂養(yǎng)后對(duì)照組可能出現(xiàn)輕微的非酒精性脂肪肝，導(dǎo)致血清中LPS水平略高于正常水平，而乳桿菌攝入后顯著降低了LPS水平，甚至恢復(fù)略低于對(duì)照組的正常水平。表明所選乳桿菌均能夠有效抑制慢性酒精引起的血清中LPS含量的升高。

圖4 乳桿菌對(duì)慢性酒精暴露小鼠血清中LPS變化的影響Fig.4 Effects of Lactobacillus treatment on serum LPS levels in mice exposed to chronic alcohol

2.5 乳桿菌對(duì)慢性酒精暴露小鼠肝臟中炎癥因子含量的影響

促炎性細(xì)胞因子腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(interleukin 6，IL-6)、白細(xì)胞介素-1β(interleukin 1β，IL-1β)是誘導(dǎo)酒精性肝損傷的關(guān)鍵因素之一，參與肝臟炎癥反應(yīng)、脂肪變性和細(xì)胞凋亡過(guò)程[31]。對(duì)小鼠肝臟中炎癥因子含量進(jìn)行分析，由圖5可知，慢性酒精處理后，小鼠肝臟中TNF-α、IL-6、IL-1β含量明顯增加，而乳桿菌處理后大大降低了TNF-α、IL-6、IL-1β的含量。同時(shí)，本研究使用的Lieber-DeCarli標(biāo)準(zhǔn)型酒精液體模型飼料，對(duì)照組可能出現(xiàn)輕微的非酒精性脂肪肝，對(duì)照組可能出現(xiàn)輕微的非酒精性脂肪肝，導(dǎo)致組織中IL-1β和IL-6水平略高于正常水平，而乳桿菌攝入后顯著降低了IL-1β和IL-6水平，甚至恢復(fù)略低于對(duì)照組的正常水平。其中，鼠李糖乳桿菌L519效果最為顯著。表明鼠李糖乳桿菌L519能夠顯著抑制慢性酒精引起的肝臟中炎癥因子含量的升高。

2.6 乳桿菌對(duì)慢性酒精暴露小鼠腸道緊密連接蛋白表達(dá)水平的影響

緊密連接(tight junction，TJ)是腸黏膜上皮細(xì)胞間最重要的連接方式，對(duì)維持黏膜上皮細(xì)胞極性及調(diào)節(jié)腸屏障的通透性發(fā)揮著重要作用，用以維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定[32]。其中，外周蛋白1(zonula occludens-1，ZO-1)、密封蛋白1(claudin-1)、閉合蛋白(occludin)是構(gòu)成緊密連接的重要成分[33]。對(duì)ZO-1、claudin-1、occludin的mRNA表達(dá)情況進(jìn)行分析，由圖6可知，慢性酒精處理后，小鼠腸道中ZO-1、claudin-1、occludin的mRNA表達(dá)水平明顯降低，而乳桿菌處理后得到恢復(fù)。其中，鼠李糖乳桿菌L519和植、物乳桿菌LP45效果最為顯著。表明鼠李糖乳桿菌L519和植物乳桿菌LP45能夠有效改善慢性酒精引起的腸道緊密連接蛋白表達(dá)水平的降低。

a-小鼠肝臟中TNF-α變化;b-小鼠肝臟中IL-1β變化;c-小鼠肝臟中IL-6活性變化圖5 乳桿菌對(duì)慢性酒精暴露小鼠肝臟中TNF-α, IL-1β, IL-6變化的影響Fig.5 Effects of Lactobacillus treatment on liver TNF-α, IL-1β, IL-6 levels in mice exposed to chronic alcohol

a-小鼠腸道中ZO-1變化;b-小鼠腸道中claudin-1變化;c-小鼠腸道中Occludin變化圖6 乳桿菌對(duì)慢性酒精暴露小鼠腸道緊密連接蛋白表達(dá)水平的影響Fig.6 Effects of Lactobacillus treatment on intestinal tight junction protein expression levels in mice exposed to chronic alcohol

3 討論

長(zhǎng)期大量飲酒會(huì)引起酒精性肝損傷，包括從酒精性脂肪肝到酒精性肝炎、肝纖維化、肝硬化甚至肝癌發(fā)展的一系列肝損傷疾病[1]。先前的大量研究已表明，氧化應(yīng)激在酒精性肝損傷的發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮著極為重要的作用[25,34]。近來(lái)研究也表明，腸道屏障功能受損引起的腸源性內(nèi)毒素血癥是導(dǎo)致酒精性肝損傷的關(guān)鍵因素之一[7]。臨床研究發(fā)現(xiàn)，酒精性肝損傷患者血漿中的內(nèi)毒素水平顯著高于正常人[8]，酒精、內(nèi)毒素和肝損傷之間的關(guān)系日趨明顯。同時(shí)，大量研究表明，酒精會(huì)導(dǎo)致腸道屏障功能受損，腸道對(duì)內(nèi)毒素的通透性增加[35]，導(dǎo)致內(nèi)毒素從腸道轉(zhuǎn)移到肝臟，從而激活kupffer細(xì)胞，引發(fā)一系列導(dǎo)致炎癥反應(yīng)和肝損傷的事件[36]。本研究結(jié)果同樣顯示，慢性酒精暴露引起小鼠肝臟中形成大量的脂肪積累，肝臟氧化損傷增加，腸道通透性顯著增加，血液中內(nèi)毒素含量顯著上升，肝臟炎癥水平增加。

益生菌具有抗氧化、提高免疫力、調(diào)節(jié)腸道菌群平衡、改善腸道屏障功能等功能。研究表明，益生菌可以通過(guò)調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，刺激腸道生長(zhǎng)和黏膜免疫活性，增強(qiáng)腸黏膜上皮細(xì)胞間的緊密連接[37]，改善腸道屏障功能[38]，從而減輕腸源性內(nèi)毒素血癥，緩解酒精性肝損傷。同時(shí)，已有研究表明鼠李糖乳桿菌LGG處理能夠顯著抑制廣譜產(chǎn)生內(nèi)毒素的革蘭氏陰性菌的生長(zhǎng)，從而降低酒精引起的內(nèi)毒素增加[39]，抑制肝臟炎癥反應(yīng)[40-41]。

本研究結(jié)果表明，所選乳桿菌均能夠一定程度地改善慢性酒精引起的小鼠肝損傷。其中，植物乳桿菌LP45能夠有效抑制慢性酒精引起的氧化損傷以及肝臟炎癥反應(yīng)，并有效改善腸道緊密連接，這可能與其已被證實(shí)的降低膽固醇、提高免疫力、抑制胃腸道致病菌、調(diào)節(jié)腸道菌群等功能有關(guān)[19-22]。同樣，鼠李糖乳桿菌L519也能夠顯著抑制慢性酒精引起的肝臟炎癥反應(yīng)，并有效改善腸道緊密連接。同時(shí)，本研究結(jié)果也進(jìn)一步驗(yàn)證，所選乳桿菌尤其鼠李糖乳桿菌L519和植物乳桿菌LP45，能夠通過(guò)改善腸道緊密連接蛋白表達(dá)的降低，修復(fù)腸上皮屏障功能受損，同時(shí)降低酒精引起的內(nèi)毒素增加，進(jìn)而阻止腸道內(nèi)毒素泄漏，減輕腸源性內(nèi)毒素血癥，緩解小鼠肝臟氧化損傷以及炎癥反應(yīng)，從而改善酒精性肝損傷。