宜 全，譚芳慧，張貴平

(廣州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院藥理學(xué)教研室，廣東 廣州 511436)

心肌缺血/再灌注(ischemia-reperfusion，I/R)損傷模型常用開(kāi)胸結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支(left anterior descending artery，LAD)的方法建立[1-3]，而結(jié)扎是成模的關(guān)鍵，其確定方法以往文獻(xiàn)報(bào)道均通過(guò)肉眼觀察和心電圖分析，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用光纖氧測(cè)量系統(tǒng)，并在術(shù)后用B超和HE染色進(jìn)行評(píng)估。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF級(jí)SD ♂大鼠(250±25) g，購(gòu)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心[SCXK(粵)2013-0034]，獲得廣州醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)(2013-72)。

1.2 儀器光纖氧測(cè)量系統(tǒng)OXY-MICRO-AOT(美國(guó)World Precision Instruments公司)，小動(dòng)物實(shí)時(shí)超聲成像系統(tǒng)(加拿大Visual Sonic公司，Vevo2100高分辨，RMV 250探頭)，15L8高頻探頭超聲儀Acuson Sequoia 512(Siemens 公司)，動(dòng)物呼吸機(jī)HX-100E(成都泰盟科技有限公司)。

1.3 心肌I/R模型建立大鼠麻醉開(kāi)胸，將小硅膠管墊于冠狀動(dòng)脈行LAD結(jié)扎，1 h后取出硅膠管松解結(jié)扎線，分別在結(jié)扎前、結(jié)扎后和松解后插入光纖氧測(cè)量系統(tǒng)的探針于左心室前壁內(nèi)，測(cè)量結(jié)扎部位下方心肌氧分壓。

1.4 超聲測(cè)量心功能大鼠麻醉仰臥固定于恒溫超聲操作面板上，于乳頭肌水平記錄左心室運(yùn)動(dòng)曲線，采圖，測(cè)量軟件自動(dòng)生成心功能各項(xiàng)指標(biāo)。取10個(gè)連續(xù)完整心動(dòng)周期測(cè)量值的平均值為測(cè)定值。

1.5 心肌組織病理學(xué)檢查大鼠開(kāi)胸取心臟，甲醛固定，酒精梯度脫水、石蠟包埋、切片、脫臘、HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察，拍照。

2 結(jié)果

2.1 大鼠LAD結(jié)扎后，左心室前壁心肌氧分壓下降LAD結(jié)扎前氧分壓為60～70mmHg，結(jié)扎后氧分壓立刻下降≥50%，松開(kāi)結(jié)扎線后，氧分壓迅速回復(fù)至正常水平，說(shuō)明LAD結(jié)扎成功。

2.2 大鼠急性心肌I/R后左心室收縮功能降低在缺血1 h，再灌注3 h和24 h，用B超檢測(cè)心功能，結(jié)果顯示，與Sham組比較，I/R(3 h)和I/R(24 h)模型組左室收縮末期內(nèi)徑(LVIDs)增大(P<0.05)，I/R(24 h)模型組左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)和左室短軸縮短率(LVFS)均降低(P<0.05)，說(shuō)明左心室收縮功能降低，見(jiàn)Tab 1。

2.3 大鼠急性心肌I/R后心肌病理改變?cè)谌毖? h，再灌3 h和24 h，取左心室前壁結(jié)扎線下進(jìn)行HE染色。結(jié)果顯示，Sham組著色均勻，心肌細(xì)胞排列整齊、結(jié)構(gòu)完整，肌纖維橫紋清晰；I/R模型組局部著色不均勻，染色變淺及發(fā)白，I/R(3 h)心肌細(xì)胞間隙水腫及心肌細(xì)胞周?chē)仔约?xì)胞浸潤(rùn)最為明顯；I/R(24 h)肌纖維排列紊亂，局部呈波紋狀改變或部分?jǐn)嗔?，紅細(xì)胞滲出增多。

Tab 1 Echocardiography indicators of rats in each group group n = 6，I/R model groups n=8)

3 討論

本研究首次報(bào)道，采用光纖氧測(cè)量系統(tǒng)監(jiān)測(cè)心肌I/R損傷時(shí)心肌氧分壓的變化，判斷LAD結(jié)扎成功與否，與用肉眼觀察和心電圖方法比較，在操作上更簡(jiǎn)單、直觀和準(zhǔn)確，明顯提高了成模率。