楊 璇 那文靜 李曉凡

（河北工業(yè)大學(xué)，天津300401）

1 TRPM4 通道的發(fā)現(xiàn)

TRPM4 通道首先由Colquhoun 等發(fā)現(xiàn)，廣泛存在于多種組織和器官細(xì)胞中，如心臟、血管、免疫細(xì)胞和神經(jīng)系統(tǒng)等。Liman等測(cè)定了TRPM4 通過蛋白的分子量，為152KDa。QLaunay 等發(fā)現(xiàn)TRPM4 通道是一種Ca2+激活的陽離子通道；Miyoshi 等證實(shí)通道對(duì)一價(jià)離子Na+、K+、Cs+、Li+等均具有很高的通透性[1]。

2 TRPM4 通道的結(jié)構(gòu)與表達(dá)

TRPM4 通道的基因在人體中位于19 號(hào)染色體上，在小鼠中位于17 號(hào)染色體上[2]。TRPM4 通道的結(jié)構(gòu)由一個(gè)類似三層組件構(gòu)成，從上到下分別為TMD，MHR3/4 和MHR1/2 域。TMD 結(jié)構(gòu)域與其他TRP 子家族的結(jié)構(gòu)相當(dāng)，并且與電壓門控的Ca2+，K+和Na+通道類似。

一端N 末端結(jié)構(gòu)域是機(jī)體細(xì)胞環(huán)境和其它分子相互作用的主要位點(diǎn)，另一端C 末端結(jié)構(gòu)域，是一種傘狀結(jié)構(gòu)，被一個(gè)“桿狀結(jié)構(gòu)”和四個(gè)螺旋狀的“肋骨”所支撐，提供了用于配體結(jié)合的位點(diǎn)。肋螺旋通過柔性連接器連接到TRP 螺旋，TRP 螺旋是TRP 通道的標(biāo)志，并連接到門控螺旋S6。跨膜螺旋S5 和S6加上Loop 形成了離子傳導(dǎo)孔結(jié)構(gòu)域，稱為選擇性過濾器，該結(jié)構(gòu)域被S1-S4 域包圍。

孔結(jié)構(gòu)域和S1-S4 結(jié)構(gòu)域在TRP 通道的門控中起著重要作用。并且TRPM4 通道的S1-S4 域包含激動(dòng)劑Ca2+和其他配體的結(jié)合位點(diǎn)[3]。

3 TRPM4 的選擇性

TRPM4 是TRP 超家族中Ca2+不可滲透的僅有的兩個(gè)成員之一，其他TRP 通道都是可滲透Ca2+的非選擇性陽離子孔或高度Ca2+選擇性的通道[4]。

與經(jīng)典的電壓門控離子通道不同，TRPM4 中的S4 僅包含一個(gè)帶正電的殘基。研究發(fā)現(xiàn)，TRPM4 通道不介導(dǎo)Ca2+的內(nèi)流，但對(duì)Na+、K+的通透性沒有明顯顯著區(qū)別，單價(jià)陽離子的通透率為Na+>K+>Cs+>Li+，同時(shí)N- 甲基-D- 葡糖胺及Ca2+均不能透過TRPM4 蛋白通道[5]。

4 TRPM4 通道的調(diào)控特性

TRPM4 通道的活性受PKC 活性，溫度以及細(xì)胞內(nèi)ATP，PIP2和十釩酸鹽的調(diào)節(jié)。最近的數(shù)據(jù)表明TRPM4 通道也是一個(gè)熱激活通道[6]。與所有其他類型的酶一樣，所有離子通道都顯示出一定的溫度依賴性，加熱使依賴于電壓的通道打開的激活曲線向負(fù)的生理電位移動(dòng)。另一方面，在TRPM4 蛋白的假定ATP結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行突變，從TRPM4 的氨基酸序列可以預(yù)測(cè)到多個(gè)ATP 結(jié)合位點(diǎn)[7]。

此外，這些突變極大地加速了通道對(duì)Ca2+的脫敏。因此，這些發(fā)現(xiàn)表明，ATP 通過直接結(jié)合通道蛋白在保持TRPM4 的Ca2+敏感性中起著至關(guān)重要的作用[8]。

另一種TRPM4 調(diào)節(jié)劑PIP2是磷脂酶C（PLC）的底物之外，還產(chǎn)生第二信使，PIP2已成為許多離子通道和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的重要調(diào)節(jié)劑。在TRP 家族中，PIP2對(duì)通道活性的影響可以是刺激性的（如TRPM5，TRPM7，TRPM8 和TRPV5） 或抑制性的（如TRPV1 和TRPL）。當(dāng)Ca2+緩沖在低電平時(shí)，PIP2無法直接選通TRPM4。取而代之的是，PIP2 充當(dāng)通道對(duì)Ca2+和電壓的敏感度的調(diào)制器：PIP2水平的增加會(huì)導(dǎo)致Ca2+敏感度增加100 倍，并且向激活電壓依賴性的更負(fù)電勢(shì)急劇轉(zhuǎn)變，從而大大增加了打開的概率[9]。

5 TRPM4 與心律不齊

鈉鈣交換劑（NCX）在心肌細(xì)胞上的反向轉(zhuǎn)運(yùn)是導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)Ca2+超負(fù)荷的主要途徑之一。Voigt 等人在2011 年研究證明，增加NCX 的表達(dá)和活性可以延遲去極化后的時(shí)間，這會(huì)觸發(fā)并促進(jìn)慢性心房顫動(dòng)。

TRPM4 在心房心肌細(xì)胞中高表達(dá)，2009 年在遺傳性心臟病患者中檢測(cè)到TRPM4 突變：第7 位的谷氨酸被賴氨酸替代，從而導(dǎo)致進(jìn)行性心臟束分支阻滯[10]。這些突變可以通過結(jié)合SUMO 和目標(biāo)蛋白來調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)功能，突變蛋白的突變導(dǎo)致TRPM4 蛋白表達(dá)及其在質(zhì)膜上的電流水平發(fā)生改變。TRPM4是重要的Ca2+調(diào)節(jié)劑，與心臟傳導(dǎo)系統(tǒng)疾病密不可分。

6 展望

TRPM4 通道是一種鈣激活的非選擇性陽離子通道，其在心臟中廣泛表達(dá)，與多種心血管疾病密切相關(guān)。目前有關(guān)TRPM4通道離子選擇性的研究一直是TRP 通道的研究熱點(diǎn)，現(xiàn)已有多種結(jié)晶結(jié)構(gòu)，并已證實(shí)TRPM4 通道在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的許多疾病相關(guān)。但最近，出現(xiàn)了新的證據(jù)將TRPM4 的表達(dá)與某些癌癥的侵襲聯(lián)系起來，TRPM4 的表達(dá)介導(dǎo)癌細(xì)胞的過程還需進(jìn)一步研究。