李桂花，葛紹陽，桑躍，劉治麟，王然

（1.北京食品營(yíng)養(yǎng)與人類健康高精尖創(chuàng)新中心，中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)，北京 100083；2.河北省畜產(chǎn)食品技術(shù)創(chuàng)新中心，廊坊 065201；3.北京和益源生物技術(shù)有限公司，北京 100089）

隨著飲食結(jié)構(gòu)的改變和社會(huì)生活壓力的增大，便秘已成為困擾現(xiàn)代人健康的主要問題之一，嚴(yán)重影響著人們的生活質(zhì)量。最近的調(diào)查顯示，在亞洲便秘的發(fā)病率為9.6%[1]。我國(guó)便秘的發(fā)病率為5%～16%[2,3]。大多數(shù)便秘可以獨(dú)立發(fā)生，也可與許多系統(tǒng)性疾病相關(guān)，例如帕金森綜合征、老年癡呆[4～6]等。目前治療便秘通常采用服用瀉藥的方法，如西沙必利和塞納，但是長(zhǎng)期服用此類復(fù)方制劑具有很大的副作用[7,8]，因此找出安全有效的緩解便秘的方法至關(guān)重要。研究表明，益生菌可通過平衡和調(diào)節(jié)腸道菌群實(shí)現(xiàn)通便的效果，已成為近年來健康治療功能性便秘大量采用的方法[9,10]。

大量的研究表明，腸道中足夠的雙歧桿菌可以發(fā)酵寡糖，產(chǎn)生乙酸和乳酸，促進(jìn)腸道蠕動(dòng)和糞便排泄，從而緩解便秘[4]。Whorwel等[11]研究表明嬰兒雙歧桿菌可以緩解便秘型腸易激綜合征婦女的便秘癥狀，Urita等[12]研究表明含有雙歧桿菌的發(fā)酵乳可以緩解便秘。

目前，將益生菌作為發(fā)酵劑或功能因子生產(chǎn)含有益生菌的乳制品，如活菌型酸奶、益生菌奶粉等，受到廣大消費(fèi)者的認(rèn)可與歡迎。所以，本研究以牛奶為介質(zhì)，通過人群試驗(yàn)評(píng)價(jià)長(zhǎng)雙歧桿菌BB68S的潤(rùn)腸通便和調(diào)節(jié)腸道菌群功能，為開發(fā)長(zhǎng)雙歧桿菌BB68S相關(guān)產(chǎn)品奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 菌種及試驗(yàn)樣品

長(zhǎng)雙歧桿菌BB68S保藏于中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心，菌株號(hào)CGMCC No. 14168，由中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)功能乳品實(shí)驗(yàn)室提供。

1.2 受試對(duì)象與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

納入者與排除者標(biāo)準(zhǔn)、試驗(yàn)設(shè)計(jì)同文獻(xiàn)[13]。

1.3 食用劑量及時(shí)間

將添加有BB68S的牛奶樣品于低溫4℃放置，每天早飯和午飯后1h內(nèi)由受試者服用，每天服用兩次，每次50mL，活菌濃度約為1010CFU。連續(xù)服用28d。試驗(yàn)期間不改變?cè)瓉淼娘嬍沉?xí)慣，正常飲食。

1.4 觀察指標(biāo)及試驗(yàn)方法

安全性指標(biāo)、功能性觀察項(xiàng)目及日常飲食情況均同參考文獻(xiàn)[13]。

采用氣相色譜法測(cè)定糞便中短鏈脂肪酸含量，N2000型色譜工作站收集信號(hào)并檢測(cè)。按照《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范（2003年版）》檢測(cè)腸道菌群，對(duì)糞便內(nèi)雙歧桿菌、乳桿菌、腸球菌、腸桿菌、擬桿菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌進(jìn)行計(jì)數(shù)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

利用 SPSS 20.0軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”(mean±SD)表示。自身對(duì)照資料采用配對(duì)t檢驗(yàn)，P＜0.05視為顯著性差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與討論

2.1 受試者一般情況

受試者試食前一般情況見表1。

表1 受試者試食前一般情況

2.2 受試者排便狀況變化情況

排便次數(shù)、排便狀況積分、糞便性狀積分是反映便秘狀況的有效指標(biāo)。從表2可以看出，試食后與試食前比較，受試者排便次數(shù)極顯著增加（P＜0.001），最后一次糞便性狀積分極顯著降低（P＜0.01）。上述結(jié)果表明試食含長(zhǎng)雙歧桿菌BB68S的牛奶有利于提高排便次數(shù)，減少排便不適，利于形成軟便，改善糞便質(zhì)量。

表2 試食前后受試者排便情況比較（±SD）

表2 試食前后受試者排便情況比較（±SD）

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2.3 試食期間受試者各類食物的攝入情況

采用膳食記錄法調(diào)查受試者在試食前、試食中期（第14～15天）和末期（第27～28天）的主要食物攝入，計(jì)算和統(tǒng)計(jì)受試者主食類、果蔬類、肉蛋類食物及其膳食纖維的平均日攝入量，結(jié)果顯示試食期間各類食物及其膳食纖維平均攝入量均沒有顯著差異。

2.4 受試者安全性指標(biāo)檢測(cè)情況

試食前后，受試者血常規(guī)和血生化變化、尿常規(guī)和便常規(guī)指標(biāo)、心率和血壓、肝、腎功能檢查、胸透、心電圖、腹部B超等各項(xiàng)指標(biāo)均在正常范圍。試食后未見到受試者出現(xiàn)不良反應(yīng)和過敏反應(yīng)癥狀。

2.5 受試者糞便短鏈脂肪酸含量變化情況

圖1 BB68S干預(yù)前后受試者糞便短鏈脂肪酸的變化

乙酸、丙酸、正丁酸等短鏈脂肪酸（SCFAs）的含量是益生菌緩解便秘效果的重要評(píng)價(jià)指標(biāo)。SCFAs是腸道微生物的最終代謝產(chǎn)物，能通過降低腸道pH值抑制致病菌的生長(zhǎng)，促進(jìn)有益菌的增殖，從而改善腸道微環(huán)境；SCFAs為腸黏膜細(xì)胞提供能量來源，促進(jìn)腸上皮細(xì)胞增殖，有利于維護(hù)腸屏障，抵抗炎癥，從而緩解便秘[14]。研究表明，乙酸、丙酸等有機(jī)酸可直接刺激腸壁神經(jīng)，加快腸道蠕動(dòng)；乙酸是微生物的主要代謝產(chǎn)物，其濃度增加可使腸管內(nèi)滲透壓增大，腸道內(nèi)水分吸收增加，從而使糞便質(zhì)量和潤(rùn)滑度增加，使其更易運(yùn)輸與排出[15]。

試食前后差異分析結(jié)果表明（見圖1），試食后受試者糞便中乙酸、丙酸、丁酸含量顯著增加（P＜0.05），總酸（三者總和）含量極顯著增加（P ＜0.01）。

以上結(jié)果說明食用BB68S能增加腸道SCFAs含量。結(jié)合排便狀況綜合分析，說明便秘程度與腸道中SCFAs含量相關(guān)，與Wang等的研究結(jié)果一致[16]。

2.6 受試者糞便中菌群變化情況

圖2 BB68S對(duì)便秘人群糞便中五種細(xì)菌的影響

由圖2可以看出，便秘人群試食BB68S后，糞便中的益生菌（雙歧桿菌和乳酸桿菌）數(shù)量與試食前相比顯著增加（P＜0.05），有害菌腸桿菌、腸球菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌的數(shù)量顯著減少（P＜0.05）。

3 總結(jié)

試驗(yàn)結(jié)果顯示，受試者按要求試食含BB68S純牛奶28d后，排便次數(shù)顯著增加（P＜0.001）；最后一次排便狀況積分顯著降低（P＜0.01）；最后一次糞便性狀積分顯著降低（P＜0.01）。試食期間，受試者的食物及其膳食纖維攝入量沒有差異。綜上所述，BB68S能夠有效緩解功能性便秘。

乙酸、丙酸和丁酸含量在試食后與試食前相比顯著增加（P＜0.05），說明試食BB68S可以顯著改善人糞便中短鏈脂肪酸含量。糞便中益生菌雙歧桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量與試食前相比顯著增加（P＜0.05），有害菌腸桿菌、腸球菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌的數(shù)量顯著減少（P＜0.05）。

綜上，長(zhǎng)雙歧桿菌BB68S具有緩解便秘和調(diào)節(jié)腸道菌群的作用，而其緩解便秘的機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。