鄭麗 易小平 文衍堂等

摘 要 通過對海南省14種熱帶牧草病害的田間調查，結果顯示，常發(fā)生的病害有葉斑病、花/果/莖腐病、枝枯病等，病害類型有39種。分離鑒定的結果表明，真菌性病害32種，細菌性病害1種，根結線蟲引起的病害1種，病毒類病害3種，植原體病害1種，寄生性藻類病害1種。初步查明海南省主要熱帶牧草病害的種類和為害狀況，其中柱花草為害最為嚴重的病害為炭疽病（Colletotrichum gloeosporioides PenZ.），王草則以瘟病[Pyricularia grisea（Cke.）Sacc]發(fā)生最為嚴重，其他牧草以葉斑病為害居多，為害水平中等至輕微。

關鍵詞 海南省；熱帶牧草；病害調查；病原菌

中圖分類號 S432 文獻標識碼 A

在熱帶及亞熱帶地區(qū)，多年生的熱帶牧草種類繁多，而適宜的高溫高濕氣候有利于各種病菌滋生繁殖和傳播蔓延，導致牧草病害嚴重地影響草地生態(tài)系統(tǒng)的可持續(xù)發(fā)展，并成為草地畜牧業(yè)生產(chǎn)的主要限制因素之一[1]，從而影響到熱帶牧草生態(tài)系統(tǒng)的可持續(xù)發(fā)展。

20世紀70年代之前，世界各地對熱帶牧草病害研究甚少。在澳大利亞，隨著牧草種子和種莖數(shù)量引進顯著增加，熱帶牧草病害發(fā)生越發(fā)嚴重，它成為最早對熱帶牧草病害高度重視的國家之一，且在其北部，矮柱花草（Stylosanthes humilis）是最重要的牧草，炭疽病是最主要的病害，一旦流行，會導致植株大量死亡。并且，此病原菌還可侵染柱花草其他品種，為害種子，導致產(chǎn)量大幅度下降乃至絕收[2]。美國佛羅里達州曾報道，鉤柱花草（Stylosanthes hamata）因炭疽病減產(chǎn)50%以上[3]。在我國，炭疽病造成柱花草產(chǎn)量降低21%～40%，種子減產(chǎn)28%～70%，粗蛋白降低51.8%，Ca降低11.0%，Mg降低50%。僅于1979～1986年，在我國華南熱帶地區(qū)，100 hm2的斯柯菲柱花草（Stylosanthes guianensis cv. Graham）和庫克柱花草（Stylosanthes guianensis cv. Cook）因炭疽病而毀滅[4]。2001年中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院試驗場栽培的山毛豆（Tephrosia candida）因根結線蟲為害死亡率高達90%[5]。我國南方熱帶、亞熱帶地區(qū)，物種特有性程度高，被列為世界12個高度多樣性國家之一[6]，隨著熱帶牧草種植面積的增加，各種病害發(fā)生越來越嚴重，但系統(tǒng)普查研究較少[7]。其中，南志標[8]對隴東黃土高原栽培牧草真菌病害進行調查與分析，發(fā)現(xiàn)在10種豆科牧草上有43種真菌病害，在16種禾本科牧草上有50種真菌性病害；張偉麗等[9]在2006年報道了熱研二號柱花草的炭疽病，劉曉妹等[10]對海南地區(qū)幾種主要熱帶牧草的真菌性病害進行調查，發(fā)現(xiàn)分布主要有銀合歡黑腐病、珊狀臂形草大斑病、爪哇大豆褐斑病、山螞蝗炭疽病、野花生炭疽病和王草灰梨孢葉斑病。

隨著我國熱帶牧草種質資源收集、保存的系統(tǒng)化[11]，熱帶牧草在我國發(fā)展的戰(zhàn)略性地位逐步提高[12]，但未見對海南熱帶牧草病害的系統(tǒng)調查和鑒定。本研究主要對中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院熱帶作物品種資源研究所熱帶牧草種質圃進行定點觀察，對其他縣市的牧草病害進行全面調查，意義在于初步明確海南省牧草病害的種類、分布和為害狀況，為幾種主要熱帶牧草病害的預防提供參考。

1 材料與方法

1.1 病害調查及標本采集

采用定點觀察和全面普查方法開展調查，以儋州中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院熱帶作物品種資源研究所（東經(jīng)109°30′，北緯19°30′，年平均氣溫23.5 ℃，年降雨量1 700 mm）熱帶牧草種質圃為定點觀察點，并對?？凇⒉?、東方、文昌、三亞、五指山、澄邁、屯昌、白沙、樂東等市縣進行普遍調查。

在田間調查過程中，描述病害癥狀，記錄其發(fā)生的嚴重程度，嚴重程度分為3個等級：輕度（+），病斑占據(jù)葉片面積的1/3；中度（++），病斑占據(jù)葉片面積的2/3；嚴重（+++），病斑占據(jù)葉片面積大于2/3。采集具有典型發(fā)病癥狀的材料作為標本，帶回實驗室保存，并進行相關分離鑒定。

1.2 病害鑒定

對采集的標本進行癥狀描述，整理并鏡檢觀察，若無噴菌現(xiàn)象，則可初步判斷為真菌性病害，對沒有產(chǎn)生病癥的標本，保濕12～24 h后鏡檢，進行病原菌常規(guī)組織分離，獲得病原菌的純培養(yǎng)后再進一步鑒定并做致病性測定，依據(jù)文獻[13-16]采用常規(guī)病害研究技術[17]，進行病原菌分離、鑒定；若出現(xiàn)噴菌現(xiàn)象，則采取細菌性病害分離方法進行相關分離鑒定[18]；病毒類和植原體病害只做其癥狀描述或參考文獻[19]進行初步判斷，線蟲性病害鑒定見參考文獻[5]。

2 結果與分析

對海南省的柱花草、王草、珊狀臂形草、堅尼草、野花生、光葉野花生、山毛豆、毛蔓豆、卵葉山、螞蟥矮刀豆、距瓣豆、紫花扁豆、銀合歡、田菁等 14種主要牧草的病害調查結果發(fā)現(xiàn)，真菌性病害33種，細菌性病害1種，線蟲病害1種，病毒類2種，植原體類1種。文獻結果顯示，柱花草炭疽病、柱花草小葉病及山毛豆線蟲病害有報道[5，13，19-21]，其他熱帶牧草病害均未見報道。各種熱帶牧草名稱、病害名稱、病原物、主要癥狀、病原物主要性狀和為害嚴重程度。

調查結果表明，海南省柱花草主要病害有7種，分別為：炭疽病、莖腐/立枯病、小葉病、葉腐病、根腐病和花腐病，其中分離到3種炭疽病病原菌，以Colletotrichum gloeosporioides侵染為害最為嚴重，其他2種病原菌C. lindermuthianum和C. truneatum造成的為害表現(xiàn)為輕微癥狀。為害程度表現(xiàn)為中等水平的病害為：莖腐/立枯病和葉腐病，其他4種病害均表現(xiàn)輕微侵染，且花腐病病原菌有2種：Fusarium sp. 和Rhizopus stolonifer。

表2顯示，王草主要病害為葉斑病、瘟病、紅條病、花葉病和齒葉病。其中葉部病害分離到5種病原菌，分別是Phoma sp.、Rhizoctonia oryzae、Curvularia sp.、Drechslera. sacchari和Alternaria sp.，發(fā)生為害程度均為輕微水平。由Pyricularia grisea引起的瘟病，為害程度甚嚴重；Pseudomonas rubrilineans引起的紅條病，屬于細菌性病害，為害程度輕微。此外，依據(jù)標本癥狀，查閱相關文獻初步判斷，花葉病和齒葉病可能是由病毒引起的病害，為害程度也輕微。

海南熱區(qū)其他最為主要的牧草病害調查結果見表3。珊狀臂形草的花葉病推測可能也是由病毒引起的，待鑒定，其為害程度輕微。在堅尼草上發(fā)現(xiàn)有Drechslera sp.和Brachysporium phragmitis引起的葉部病害，二者均輕度侵染植株。由Sclerotium rolfsii引起的野花生葉腐病，表現(xiàn)為中度侵染；而在光葉野花生上發(fā)現(xiàn)了2種病害，分別為莖腐和炭疽病，輕微為害植株。山毛豆上發(fā)現(xiàn)3種不同類型的病害，分別為Cephaleuros sp.引起的藻斑病，發(fā)病輕微；Uromyces sp.引起的銹病，中度侵染；以及由Meloidogyne javanica引起的根結線蟲病，為害較嚴重。Rhizoctonia sp.引起毛蔓豆的莖腐病，表現(xiàn)中度侵染。從卵葉山螞蟥的葉部分離到2種病原菌，分別為Alternaria sp.和Cercospora sp.，二者為害輕微。從矮刀豆上分離到2種病原菌，分別為Cercospora sp.和Colletotrichum sp.，輕微侵染植株。從距瓣豆上分離到由Illosporium sp.引起的葉斑病，從紫花扁豆上分離到Cercospora sp.引起的葉斑病，二者均為輕度為害。銀合歡上分離到3種病原菌，Camptomeris leucaenae引起的葉斑病、Colletotrichum sp.及Fusarium sp.引起的果腐病，均為中度為害。此外，在田菁上也分離到同銀合歡果腐病相同屬的病原菌，但屬輕度為害。

3 討論與結論

對海南省14種熱帶牧草病害的田間調查，結果顯示，常發(fā)生的病害有葉斑病、花/果/莖腐病、枝枯病等，有39種病害。分離鑒定的結果表明，真菌性病害32種，細菌性病害1種，根結線蟲引起的病害1種，病毒類病害3種，植原體病害1種，寄生性藻類病害1種。初步查明海南省主要熱帶牧草病害的種類和為害狀況，其中柱花草為害最為嚴重的病害為炭疽病（Colletotrichum gloeosporioides PenZ.），王草則以瘟病[Pyricularia grisea（Cke.）Sacc]發(fā)生最為嚴重，其他牧草以葉斑病居多，為害水平中等至輕微。由此可見，真菌、細菌、線蟲、寄生性藻類、病毒和植原體等6個類群病原物都可能引致牧草病害發(fā)生，但以真菌性病害發(fā)生最常見，真菌性病害又以葉斑病居多，為害程度大多表現(xiàn)為中等至嚴重水平，其嚴重發(fā)生時，降低葉片的光合作用，影響產(chǎn)量和品質。

國外曾報道[13]，柱花草病原菌主要是C. gloeosporioides（Penz） and Sacc.和C. truncatum（Schwein）Andrus and Moore，國內張?zhí)盏萚22]發(fā)現(xiàn)，病原菌主要是C. gloeosporioides（Penz） and Sacc.。馮淑芬等[23]報道在海南引起該病的病原菌還有菜豆炭疽菌（C.lindermuthianum）。而本次調查發(fā)現(xiàn)這3種病原均存在，其中由C. gloeosporioides引起的柱花草炭疽病最嚴重，全年都可發(fā)生；其他2種炭疽菌（C.lindermuthianum和C. truneatum）引起的病害表現(xiàn)為輕微癥狀，與易克賢等[24]的研究觀點相同。筆者推測，這可能與病原菌的致病力相關。另外，小菌核菌（Sclerotium rolfsii）引起柱花草萎蔫較普遍，是柱花草次要病害，在個別地方發(fā)生也比較嚴重。王草（Pennisetum purpureum）是海南省重要的禾本科牧草，本次調查發(fā)現(xiàn)，由P. grisea引起的瘟病最嚴重，尤其是雨季刈割后。其他種類牧草發(fā)生則以葉斑病為主，如山螞蟥炭疽病與劉曉妹[10]報道的一致，病原菌類型多樣，但侵染植株程度大多表現(xiàn)為輕微。

本次調查的對象主要是從國外引進的熱帶牧草品種，對其病原種類及為害情況進行初步調查研究，但部分病原（特別是病毒類和植原體類）尚未鑒定出，只是根據(jù)癥狀，和參考文獻描述的內容進行比對，對其分類進行初步推測，因此調查結果對我國海南省熱帶牧草病害種類調查的詳盡性尚有不足。此外，本研究僅僅對海南省主要的牧草種類病害進行調查，未能對幾種危害嚴重的病原菌進行系統(tǒng)研究，也未對同一種牧草的不同品系的病害類型進行詳細分類調查。我國熱帶牧草資源豐富，可以考慮從抗病品種選育的角度，篩選出適合我國生態(tài)環(huán)境的優(yōu)質抗病品種，從而提高牧草產(chǎn)量。另外，海南省地域相對遼闊，地理環(huán)境較復雜，5個定點調查的實驗基地牧草種類差異較大，因人力、時間等方面因素的限制，調查采樣的地點、時間存在局限性，調查研究的全面性尚需進一步深入。

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責任編輯：沈德發(fā)