裘穎兒 何忠平 朱樓英

（金華市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院 浙江 金華 321000）

香丹注射液是中藥丹參及降香的提取物，在心內(nèi)科患者中使用頻率較高，臨床上用于擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，增加冠脈流量，對(duì)心絞痛及心肌梗死具有良好的應(yīng)用價(jià)值，對(duì)肝炎及腎病也有一定效果[1]。因其含有皂苷等溶血成分，推測(cè)其可能具有潛在的溶血作用，我們通過進(jìn)行香丹注射液溶血性實(shí)驗(yàn)及藥物毒性實(shí)驗(yàn)，擬探討其對(duì)溶血的影響及安全性，對(duì)臨床應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支持，現(xiàn)報(bào)告如下：

1.試驗(yàn)材料

1.1 藥物

香丹注射液，國(guó)藥準(zhǔn)字：Z14021644，規(guī)格：10ml/支，XX公司生產(chǎn)。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物

新西蘭家兔，由杭州余杭科聯(lián)兔業(yè)專業(yè)合作社提供，許可證號(hào)：SCXK(浙)2017-0004。

ICR小鼠，由金華市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXK(浙)2016-0001。

2.實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 溶血性實(shí)驗(yàn)

2.1.1 方法 動(dòng)物選擇健康新西蘭家兔1只，雄性，重1.9kg。選擇家兔右側(cè)頸總動(dòng)脈，剃毛暴露穿刺點(diǎn)，常規(guī)消毒皮膚，無(wú)菌操作下用5mL注射器取動(dòng)脈血共15mL置于錐形瓶中，震蕩15min并去除纖維蛋白原，用0.9%氯化鈉洗滌紅細(xì)胞，離心，傾去上清液，沉淀的紅細(xì)胞繼續(xù)用氯化鈉注射液洗滌，確保上層清澈無(wú)紅細(xì)胞，取下層沉淀紅細(xì)胞，用0.9%氯化鈉稀釋成2%的紅細(xì)胞混懸液。取玻璃試管6支并編號(hào)，1號(hào)為空白對(duì)照，2-6號(hào)按香丹注射液濃度進(jìn)行配比制備（見表1）。將制備好的6支試管充分混勻，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中，3h后取出試管，涂片后在顯微鏡下進(jìn)行觀察，若鏡下紅細(xì)胞出現(xiàn)破裂或者邊緣變形為溶血性實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性（+），若鏡下紅細(xì)胞邊緣整齊、形態(tài)規(guī)則為溶血性實(shí)驗(yàn)陰性（－）。

2.1.2 結(jié)果 香丹注射液各濃度下均未出現(xiàn)溶血性反應(yīng)，見表1。

表1 不同香丹注射液濃度溶血性實(shí)驗(yàn)配比及結(jié)果

2.2 毒性反應(yīng)

2.2.1 方法 動(dòng)物選擇健康ICR小鼠20只，均為雄性，重17～-21g，平均體重（19.02±2.11）g。將20只小鼠按香丹注射液不同給藥劑量（見表2）隨機(jī)分為4組，每組5只。采用靜脈給藥方式，每只小鼠均連續(xù)給藥3天。每天記錄藥物毒性反應(yīng)（主要觀察毛色澤、進(jìn)食情況、活動(dòng)情況及抓鼻搔扒反應(yīng)等）。

2.2.2 結(jié)果 香丹注射液1000mg/kg為安全劑量，所有小鼠在不同時(shí)段均表現(xiàn)正常，未出現(xiàn)明顯不良反應(yīng)。但采用1500mg/kg劑量時(shí)，在48h即可表現(xiàn)出毒性反應(yīng)，當(dāng)劑量達(dá)到2500mg/kg時(shí)，所有小鼠在72h內(nèi)全部死亡。見表2。

表2 不同香丹注射液給藥劑量毒性反應(yīng)觀察

3.討論

香丹注射液中的丹參具有祛瘀止痛、清心除煩、通經(jīng)活絡(luò)等功效，而降香性溫，具有消瘀散結(jié)、止血消痛等功效，研究表明，香丹注射液可明顯擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，進(jìn)而改善心肌供血，適用于各種因冠狀動(dòng)脈痙攣狹窄或閉塞引起的心絞痛及心肌梗死，目前已得到大范圍應(yīng)用[2]。但臨床使用中會(huì)發(fā)現(xiàn)皮疹、寒戰(zhàn)、瘙癢、過敏等全身癥狀，部分患者會(huì)出現(xiàn)胸悶、心慌、頭痛等不良反應(yīng)[3]。

關(guān)于香丹注射液的溶血現(xiàn)象，目前報(bào)道存在爭(zhēng)議。受物理、化學(xué)及生物因素影響，香丹注射液注入血管后可能發(fā)生溶血，可能是香丹注射液誘發(fā)機(jī)體免疫反應(yīng)，進(jìn)而發(fā)生免疫相關(guān)性溶血。還有研究顯示，不同溶血性檢測(cè)方法結(jié)果尚不一致，分光光度法準(zhǔn)確性較高。本次研究顯示，香丹注射液各濃度顯微鏡下均未出現(xiàn)溶血性反應(yīng)，與文獻(xiàn)報(bào)道相符[4]。

香丹注射液的不良反應(yīng)及毒性原因尚不明確，根據(jù)目前研究可歸納為三點(diǎn)：①香丹注射液中含丹參酮及酸性結(jié)晶，這類物質(zhì)可結(jié)合血漿蛋白，繼而誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生變態(tài)反應(yīng)；②鞣質(zhì)是香丹注射液中的一種芳香酸類多羥基物質(zhì)，能夠作為半抗原結(jié)合體內(nèi)氨基產(chǎn)生聚合物，是誘導(dǎo)機(jī)體過敏反應(yīng)的重要物質(zhì)；③香丹注射液中含溶解丹參的水溶性溶劑，這些植物蛋白組成的溶劑雜質(zhì)可介導(dǎo)機(jī)體出現(xiàn)急性毒性反應(yīng)。有報(bào)道顯示，臨床上香丹注射液不良反應(yīng)發(fā)生主要跟超量使用有關(guān)，為追求效果，部分藥物劑量可達(dá)到說明書劑量4倍以上[5]。本研究結(jié)果顯示，小鼠使用1000mg/kg藥物為安全劑量，但采用1500mg/kg劑量時(shí)開始出現(xiàn)毒性反應(yīng)，當(dāng)劑量達(dá)到2500mg/kg時(shí)，小鼠全部死亡。因此，臨床使用香丹注射液應(yīng)嚴(yán)格藥物使用適應(yīng)癥，嚴(yán)格藥物使用劑量，不可為提高效果擅自加大用量，避免發(fā)生急性毒性反應(yīng)。