杜銀存

摘 要 為了研究甘草總黃酮提取工藝的影響因素，使用正交實驗法將乙醇體積分?jǐn)?shù)、料液比、提取時間等進行研究，當(dāng)醇濃度保持在最佳水平時，使用單因素實驗法確定超聲波輔助處理的功率時長對在黃酮提取上的作用力，通過實驗可發(fā)現(xiàn)在濃度較高、料液比達(dá)十四分之一的乙醇溶液中提取兩小時，甘草中總黃酮的提取效果最佳，此時的超聲波工作一小時，功率為100w。

關(guān)鍵詞 甘草黃酮 提取工藝 超聲波輔助處理

中圖分類號：R284.2文獻標(biāo)識碼：A

甘草屬于豆科類植物，它屬于一種中草藥，由甘草酸、甘草黃酮類、甘草多糖類化合物組成，伴隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)加大對甘草的研究，發(fā)現(xiàn)甘草中的黃酮類成分可以消炎、防病毒并緩解疼痛，不僅如此，它們在抗氧化、抗衰老等方面也有奇效，一定程度上可以預(yù)防糖尿病，隨著它的藥理作用不斷被挖掘出來，人們對它也有了更大的需求。提取甘草中的黃酮最為行之有效的方式是乙醇回流，本文主要介紹了乙醇回流提取黃酮的過程，使用正交實驗法確定最佳的提取條件，在此基礎(chǔ)上使用超聲波輔助處理原料，通過實驗結(jié)果總結(jié)出最佳的提取工藝。

1所需材料以及實驗方式

1.1材料

選取種植時間較長的甘草;準(zhǔn)備蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、無水乙醇溶液試劑;實驗儀器為電子天平、分光光度計、粉碎機、恒溫水浴鍋、真空泵、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器以及超聲波破碎儀。

1.2實驗方式

1.2.1測量甘草中的總黃酮量

（1）繪制曲線圖。使用電子天平量取經(jīng)過干燥重量恒定的蘆丁對照品4mg，放入10ml的量瓶中再滴加80%濃度的乙醇溶液，溶解稀釋并晃動均勻，這時的溶液為0.4mg/ml。分別吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml的溶液，放置在25ml的容量瓶中，添加0.3ml亞硝酸溶液靜置一兩分鐘后再添加等量的硝酸鋁，反應(yīng)后滴加4ml氫氧化鈉溶液，添加適量水至25ml，將混合溶液搖晃均勻，充分反應(yīng)后測量數(shù)據(jù)。使用分光光度計實施全波長掃描，可發(fā)現(xiàn)在五百納米左右的地方吸收量最大，滿足一定的條件吸光度會隨濃度的改變而改變，建立函數(shù)關(guān)系得吸光度的數(shù)值等于10.614倍的濃度再加0.0034，其中系數(shù)為0.9995。

（2）測量樣品中甘草的黃酮總量。選取1ml的甘草黃酮提取溶液并用10ml的容量瓶儲存，根據(jù)蘆丁溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的操作流程實施，測出吸光度并代入回歸方程中算出黃酮總量值。

1.2.2提取甘草黃酮工藝的優(yōu)化

（1）切開甘草的根部并曬干，用粉碎機粉碎，在六十度的溫度下干燥到恒定的重量，量取25g甘草粉末，在劃定的溶液濃度、時間范圍內(nèi)，使用乙醇回流方式提取甘草中的黃酮。

（2）正交實驗法。將乙醇濃度、料液比、提取時間三種因素作為測定對象，總黃酮提取率的高低代表提取效果的好壞，進行正交實驗。

（3）使用超聲波輔助處理原料。量取25g甘草粉末放置于容量瓶中，按照十四分之一的料液比添加濃度為百分之七十五的乙醇，再使用超聲波輔助處理原料，將功率時間用單因素的方法進行實驗，通過正交試驗定下的最合適的提取條件提取甘草中的黃酮，再對比沒有使用超聲波處理的數(shù)據(jù)。固定超聲功率，選取不同的超聲時間，觀察超聲時間對甘草黃酮提取效果的差異性;同樣再固定超聲時間，選擇使用不同功率的超聲波，通過實驗找到功率與黃酮提取效果的關(guān)系。

2分析數(shù)據(jù)結(jié)果

2.1正交試驗的結(jié)果

通過實驗可發(fā)現(xiàn)提取乙醇溶液的濃度是甘草黃酮提取中最為重要的一個因素，然后是料液比，最后是提取時間，其中具體需要百分之七十五濃度的乙醇溶液，十四分之一的料液比以及三小時的提取時長。

2.2將實驗進行優(yōu)化

從上述實驗可知時間是最小的影響因子，選擇百分之七十五濃度的乙醇溶液和十四分之一的料液比，將提取時間劃分為三個層次進行實驗，觀察實驗結(jié)果可發(fā)現(xiàn)提取時間在兩個小時或三個小時，提取率沒有太大的差別，但提取時間越短，耗費的能源越少，因此可得兩個小時為最好的提取時間。

2.3超聲波輔助處理確定提取條件

2.3.1超聲功率在提取中的作用力

測定不同超聲功率下甘草黃酮的提取量，可發(fā)現(xiàn)隨著功率加大，提取量呈先增后減的趨勢，選擇最大提取量的功率。

2.3.2超聲時間在提取中的作用力

測定不同超聲時間下甘草黃酮的提取量，可發(fā)現(xiàn)隨著時間的增長，提取量呈先增后減的趨勢，選擇最大提取量的時間。

分析出現(xiàn)上述現(xiàn)象的原因可知：超聲處理的過程中會導(dǎo)致細(xì)胞破碎，溶劑會進入細(xì)胞里，當(dāng)超聲功率、時間變長時，甘草中的其他物質(zhì)與提取液相溶，會干擾實驗數(shù)據(jù)，從而使提取量降低。

3結(jié)語

綜上所述，根據(jù)實驗結(jié)果可知，要使從甘草中提取的黃酮量最多，應(yīng)確保乙醇的濃度為百分之七十五;料液比為十四分之一;提取時間保證在兩個小時，這是最佳的提取條件，同樣超聲條件應(yīng)保證功率、時間兩個因素，這樣可以增長甘草黃酮的提取率。

參考文獻

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