張 燁，朱文雅，李 唐

（山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，農(nóng)業(yè)有害生物綜合治理山西省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山西太原030031）

赤眼蜂（Trichogramma spp.）是一類(lèi)體型微小的卵寄生蜂，與其他寄生或捕食性天敵相比，它能通過(guò)自身的產(chǎn)卵行為破壞寄主卵，將害蟲(chóng)殺死于孵化階段，故常被作為一種重要的天敵昆蟲(chóng)資源，廣泛應(yīng)用于農(nóng)林類(lèi)害蟲(chóng)的生物防治[1]。

赤眼蜂主要是通過(guò)在田間的淹沒(méi)式釋放來(lái)達(dá)到防治靶標(biāo)害蟲(chóng)的目的[2-4]，根據(jù)其釋放方式的不同，可分為人工釋放和機(jī)械釋放。人工釋放即依靠人力將蜂卡懸掛于作物的特定部位，而機(jī)械釋放則需要借助飛行裝置對(duì)蜂卡進(jìn)行高空投放。由于卡紙上通常為發(fā)育至蛹態(tài)后期的蜂，為了保證其在田間較高的羽化率，對(duì)釋放過(guò)程中及釋放后蜂卡的合理保護(hù)是非常有必要的?；诖耍恍┚哂斜Ｗo(hù)性功能的釋放裝置被逐一研發(fā)，包括紙袋放蜂器[5]、盒式放蜂器[6]、杯型放蜂器[7-8]、球狀放蜂器[9-11]等。根據(jù)不同作物的生長(zhǎng)環(huán)境特點(diǎn)，選擇合適的保護(hù)裝置作為釋放載體單獨(dú)或配套使用以防治靶標(biāo)害蟲(chóng)，例如，將盒式放蜂器和球狀放蜂器應(yīng)用于玉米田防治玉米螟，將球狀放蜂器應(yīng)用于水稻田防治二化螟[12]，將紙袋放蜂器應(yīng)用于棉田防治棉鈴蟲(chóng)[13]，將杯型放蜂器應(yīng)用于梨園防治梨小食心蟲(chóng)等。此外，也有學(xué)者將懸浮溶液作為赤眼蜂無(wú)人機(jī)釋放時(shí)的保護(hù)介質(zhì)[14]。這些保護(hù)性措施均在一定程度上提升了赤眼蜂的田間釋放效率。

螟黃赤眼蜂（Trichogramma chilonis Ishii）寄主種類(lèi)較為廣泛，可寄生的農(nóng)林類(lèi)害蟲(chóng)高達(dá)80 多種，是目前規(guī)?；a(chǎn)及應(yīng)用的赤眼蜂之一[15-17]。梨小食心蟲(chóng)（Grapholita molesta Busck）是一種世界性分布的果樹(shù)害蟲(chóng)，其寄主包括梨、桃、蘋(píng)果、李等薔薇科的多種果樹(shù)[18]，嚴(yán)重影響果實(shí)的品質(zhì)和產(chǎn)量[19]。除了松毛蟲(chóng)赤眼蜂（Trichogramma dendrolimi Matsumura）和暗黑赤眼蜂（Trichogramma pintoi Voegele）[20-22]，螟黃赤眼蜂也是一種對(duì)梨小食心蟲(chóng)具有潛在寄生能力的卵寄生蜂。已有學(xué)者探討了螟黃赤眼蜂對(duì)梨小食心蟲(chóng)的防治效果，但相關(guān)研究集中在適宜蜂種的篩選，以及赤眼蜂釋放同生物農(nóng)藥噴施相結(jié)合的生物防治配套技術(shù)的應(yīng)用[23]，并未涉及到梨園不同栽培狀態(tài)及赤眼蜂不同釋放模式對(duì)蜂卡的出蜂情況及田間防效的影響。

本研究分別對(duì)套袋和無(wú)袋梨園，螟黃赤眼蜂經(jīng)常規(guī)釋放和保護(hù)釋放后蜂卡的出蜂、釋放后蜂種的存活及其對(duì)梨小食心蟲(chóng)的田間防效情況進(jìn)行了比較分析，旨在找到一種簡(jiǎn)便高效的赤眼蜂釋放方法，以期為赤眼蜂的科學(xué)合理化利用提供技術(shù)支持和理論支撐。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

螟黃赤眼蜂：采自山西省運(yùn)城市鹽湖區(qū)泓芝驛鎮(zhèn)梨園梨小食心蟲(chóng)寄生卵，經(jīng)鑒定純化，以米蛾（Corcyra cephalonica Stainton）卵為寄主繁育多代建立穩(wěn)定的室內(nèi)飼養(yǎng)種群。飼養(yǎng)條件為溫度25 ℃、相對(duì)濕度75%、光周期15L∶9D。

米蛾卵：以麥麩混配大豆面、玉米面和小麥面作為人工飼料飼養(yǎng)米蛾，獲取新鮮干凈的米蛾卵并于紫外燈下照射30 min 以殺死卵內(nèi)胚胎，后用于螟黃赤眼蜂的繁育。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 簡(jiǎn)易杯形放蜂器的制備 一次性紙杯1 個(gè)，細(xì)鐵絲1 根。將細(xì)鐵絲沿紙杯內(nèi)壁穿過(guò)杯底，待鐵絲到達(dá)杯口處稍長(zhǎng)些，將其向外彎折以勾住杯口外壁。使用時(shí)，將細(xì)鐵絲一端纏繞在果樹(shù)枝干，使杯口朝下懸掛于合適的放蜂位置。

1.2.2 蜂卡的批量繁育 將滅活后的新鮮米蛾卵均勻撒在涂有白乳膠的卡紙（長(zhǎng)4.00 cm、寬2.50 cm）上，卵粒間無(wú)堆砌和重疊，待晾干后形成未寄生卵卡，保證1 000 粒卵/卡。選擇出蜂率較好的寄生卵卡作為蜂種，按照寄生卵卡∶未寄生卵卡＝1∶7 的數(shù)量比例進(jìn)行接蜂，培養(yǎng)條件為溫度25 ℃、相對(duì)濕度75%、光周期15L∶9D。待米蛾卵寄生變黑后，選擇寄生率在90%以上的卵卡作為果園釋放蜂卡備用。

1.2.3 果園釋放赤眼蜂及釋放后存活情況和防效調(diào)查 于放蜂區(qū)選擇套袋梨園和無(wú)袋梨園，分別進(jìn)行赤眼蜂的保護(hù)釋放和常規(guī)釋放。保護(hù)釋放：將蜂卡用膠棒黏于杯形放蜂器內(nèi)壁，用尾端鐵絲將其懸掛于果樹(shù)枝干，使放蜂點(diǎn)位于梨樹(shù)樹(shù)冠中部；常規(guī)釋放：將蜂卡直接用大頭針固定于梨樹(shù)樹(shù)冠中部葉片的背部。放蜂點(diǎn)在果園分布均勻，且保證每公頃450 張蜂卡。放蜂同時(shí)，選擇果園邊角及中心未設(shè)置放蜂點(diǎn)的梨樹(shù)，用大頭針將已滅活且未寄生的米蛾卵卡固定于梨樹(shù)樹(shù)冠中部葉片的背部，保證每公頃75 張卵卡。

放蜂時(shí)間分別為7 月中旬至下旬、8 月上旬至中旬，每批放蜂3 次，每次放蜂時(shí)間間隔3～5 d，具體時(shí)間根據(jù)當(dāng)?shù)貧夂蜃兓M(jìn)行適當(dāng)調(diào)節(jié)。自每月第2 次放蜂結(jié)束起，開(kāi)始回收前一次的蜂卡及卵卡，其中，蜂卡取回后直接于室內(nèi)鏡檢觀察，統(tǒng)計(jì)寄生卵數(shù)和出蜂卵數(shù)，計(jì)算出蜂率。卵卡取回后，先于溫度25 ℃、相對(duì)濕度75%、光周期15L∶9D 環(huán)境下培養(yǎng)至其出蜂，后鏡檢觀察，統(tǒng)計(jì)寄生卵數(shù)和出蜂卵數(shù)，計(jì)算出蜂率，方法同上。3 次放蜂結(jié)束后進(jìn)行1 次防效調(diào)查，分別統(tǒng)計(jì)保護(hù)放蜂區(qū)、常規(guī)放蜂和未放蜂區(qū)梨果上寄生（黑卵）及未寄生（白卵）的梨小食心蟲(chóng)卵數(shù)，計(jì)算防效。

1.3 數(shù)據(jù)處理及分析

試驗(yàn)中所獲得的出蜂率數(shù)據(jù)先進(jìn)行反正弦轉(zhuǎn)換。采用單因素方差分析及多重比較檢驗(yàn)出蜂率在各處理間的差異顯著性，采用秩和檢驗(yàn)分析寄生卵數(shù)在各處理間的差異顯著性，采用卡方檢驗(yàn)分析防效在各處理間的差異顯著性。所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS 20.0 軟件對(duì)其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析（P＜0.05）。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同栽培狀態(tài)及釋放模式下蜂卡的出蜂情況差異比較

表1 不同栽培狀態(tài)及釋放模式下蜂卡的出蜂情況

對(duì)不同栽培狀態(tài)及釋放模式下蜂卡的出蜂率情況進(jìn)行方差分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在無(wú)袋和套袋梨園，蜂卡經(jīng)常規(guī)釋放和保護(hù)釋放后的出蜂率無(wú)顯著性差異（P＞0.05），均處于85%以上（表1）。分別將2 種釋放模式下的出蜂率值繪制成箱線(xiàn)圖，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)采用常規(guī)釋放時(shí)，蜂卡出蜂率分位值間的差距較大，數(shù)據(jù)分散程度較高，而保護(hù)釋放時(shí)，分位值間的差距較小且數(shù)據(jù)相對(duì)集中（圖1）。

2.2 不同釋放模式下，梨園赤眼蜂對(duì)米蛾卵卡的寄生及出蜂情況比較

對(duì)不同釋放模式下梨園赤眼蜂對(duì)米蛾卵卡的寄生卵數(shù)進(jìn)行秩和檢驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，常規(guī)釋放和保護(hù)釋放后米蛾卵卡上的寄生卵數(shù)在套袋及無(wú)袋梨園所表現(xiàn)出的差異性一致。其中，7 月第1 次放蜂后，保護(hù)釋放區(qū)已寄生米蛾卵卡上的黑卵數(shù)顯著高于常規(guī)釋放區(qū)（P＜0.05），但7 月第2，3 次放蜂后，不同釋放區(qū)之間的黑卵數(shù)差異并不明顯（P＞0.05）；8 月3 次放蜂后，保護(hù)釋放區(qū)已寄生米蛾卵卡上的黑卵數(shù)均顯著高于常規(guī)釋放區(qū)（P＜0.05）（圖2 和圖3）。此外，結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，常規(guī)釋放及保護(hù)釋放區(qū)回收的米蛾寄生卵卡，其出蜂率與所釋放蜂卡之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05），均保持在80%以上（表2）。

表2 不同類(lèi)型寄生卵卡間的出蜂情況

2.3 不同釋放模式下赤眼蜂對(duì)梨園梨小食心蟲(chóng)的防效情況比較

從圖4 可以看出，對(duì)不同釋放模式下梨園梨小食心蟲(chóng)的寄生率進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，未放蜂區(qū)、常規(guī)釋放區(qū)和保護(hù)釋放區(qū)的梨小食心蟲(chóng)寄生率之間差異顯著（P＜0.05）。具體表現(xiàn)為，梨園放蜂區(qū)梨小食心蟲(chóng)的寄生率均顯著高于未放蜂區(qū)梨小食心蟲(chóng)的寄生率，且保護(hù)釋放區(qū)要優(yōu)于常規(guī)釋放區(qū)。

3 結(jié)論與討論

3.1 不同釋放模式對(duì)蜂卡出蜂率及梨小食心蟲(chóng)寄生率的影響

釋放蜂卡是赤眼蜂在田間應(yīng)用的常見(jiàn)方式，出蜂數(shù)量的多寡[24]和質(zhì)量的好壞直接關(guān)系到后期的防治效果。因此，采取適當(dāng)方法，適時(shí)適量地將蜂散放田間，是赤眼蜂應(yīng)用研究的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[25]。

本研究在探討不同栽培狀態(tài)及釋放模式下蜂卡的出蜂情況時(shí)發(fā)現(xiàn)，在無(wú)袋和套袋梨園中，常規(guī)釋放和保護(hù)釋放下蜂卡的出蜂率基本保持一致。但相較于常規(guī)釋放，保護(hù)釋放下蜂卡的出蜂率波動(dòng)較小，相對(duì)更穩(wěn)定。故筆者認(rèn)為，保護(hù)釋放雖不能顯著提升蜂卡的出蜂率，但對(duì)于維持各放蜂點(diǎn)出蜂的穩(wěn)定性方面具有積極作用。這主要是因?yàn)樗尫懦嘌鄯浯蠖嗵幱诖鸹赱25]，其從卵發(fā)育至蛹態(tài)后期的階段基本在室內(nèi)適宜條件下完成，成蜂羽化階段受外界環(huán)境因子影響時(shí)間較短，故紙杯放蜂器對(duì)蜂卡的保護(hù)作用并未能完全體現(xiàn)。此外，對(duì)不同釋放模式下梨園梨小食心蟲(chóng)的寄生情況進(jìn)行調(diào)查時(shí)發(fā)現(xiàn)，釋放螟黃赤眼蜂能夠有效提升梨小食心蟲(chóng)的田間寄生率，相較于常規(guī)釋放，保護(hù)釋放下梨小食心蟲(chóng)的田間寄生率相對(duì)更高。研究表明，螟黃赤眼蜂可作為防治梨小食心蟲(chóng)的天敵資源之一，且保護(hù)釋放能夠提升其對(duì)梨小食心蟲(chóng)的寄生效果。鑒于每次所釋放赤眼蜂為同一批次同一條件下繁育，其成蜂質(zhì)量應(yīng)大致相同，因此，推測(cè)造成寄生率差異的主要原因是不同釋放模式下成蜂存活情況的不同，這一結(jié)論在釋放后梨園赤眼蜂對(duì)米蛾卵卡的寄生試驗(yàn)中得到證實(shí)。

3.2 不同釋放模式下， 梨園赤眼蜂對(duì)米蛾卵卡的寄生和出蜂情況比較

赤眼蜂釋放到田間后，易受到外界惡劣氣候條件、田間噴施化學(xué)農(nóng)藥及它種天敵攻擊等生存逆境的影響，因此，赤眼蜂羽化后在田間的存活情況是影響防治效果的一個(gè)重要因素[26]。

本研究通過(guò)在梨園放蜂區(qū)懸掛米蛾卵卡，借助卡紙上被寄生的黑卵數(shù)以反映釋放后園內(nèi)赤眼蜂的存活情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，7 月第1 次放蜂及8 月的3 次放蜂操作中，保護(hù)釋放區(qū)已寄生米蛾卵卡上的黑卵數(shù)均顯著高于常規(guī)釋放區(qū)，但7 月第2，3 次放蜂后，不同釋放區(qū)之間的黑卵數(shù)差異并不明顯。這主要是因?yàn)椋? 月第2 次放蜂后不久便出現(xiàn)短時(shí)大量的降雨，且第2，3 次放蜂間隔時(shí)間較短，卵卡在梨園投放時(shí)間也很短，故回收后統(tǒng)計(jì)的黑卵數(shù)結(jié)果偏低，數(shù)值異常；7 月第3 次放蜂由于受不連續(xù)降雨的影響，時(shí)間相對(duì)靠后，處于7 月下旬，而同時(shí)段的梨小食心蟲(chóng)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，該時(shí)間正是梨小的發(fā)生高峰期，推測(cè)此時(shí)梨園內(nèi)的野生赤眼蜂也正處于種群增長(zhǎng)的時(shí)期。投放的米蛾卵卡位于梨園這樣一個(gè)開(kāi)放的生態(tài)系統(tǒng)中，因此，統(tǒng)計(jì)的黑卵數(shù)除了人工釋放的螟黃赤眼蜂寄生量外，還應(yīng)包括梨園赤眼蜂自然種群的寄生量，這也解釋了為何回收后統(tǒng)計(jì)的黑卵數(shù)偏高，結(jié)果異于其他批次?；诖?，筆者認(rèn)為，保護(hù)釋放能夠提升羽化后成蜂在田間的存活概率。此外，研究還發(fā)現(xiàn)，滅活米蛾卵在田間也可作為赤眼蜂天敵的優(yōu)良中間寄主，能夠被很好的寄生且維持一個(gè)相對(duì)較高的出蜂率。因此，在進(jìn)行放蜂操作時(shí)，可同時(shí)投放一定數(shù)量的未寄生米蛾卵，為梨園卵寄生性天敵提供臨時(shí)的食源和寄生場(chǎng)所，以應(yīng)對(duì)短期突發(fā)性的惡劣天氣及由于害蟲(chóng)種群密度過(guò)低造成的搜尋困難等不良因素的干擾。

現(xiàn)代生物防治主張充分利用生物手段對(duì)有害生物進(jìn)行適度治理，尤其是希望通過(guò)天敵的引進(jìn)、釋放對(duì)主要害蟲(chóng)進(jìn)行持續(xù)控制，最終目的是建立一個(gè)可以自我維持的系統(tǒng)以降低有害生物的種群水平[27]。因此，赤眼蜂在田間應(yīng)用時(shí)，無(wú)論以何種方式進(jìn)行釋放，最終都希望能在釋放區(qū)建立一定的種群數(shù)量。但田間受自然環(huán)境及人為因素的干擾頻繁，影響赤眼蜂成蟲(chóng)存活的因素有很多。董杰等[2]在探討溫度、濕度、食物和葉片等因子對(duì)松毛蟲(chóng)赤眼蜂存活的時(shí)間影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，在田間環(huán)境下，溫度和食物是影響赤眼蜂成蟲(chóng)存活時(shí)間的主要因子，也有其他學(xué)者分別探討了溫度[28-30]和食物[31]對(duì)赤眼蜂壽命、生殖力、子代羽化率等生理指標(biāo)的影響，并認(rèn)為不適宜的溫度和不充足的食源會(huì)不同程度影響赤眼蜂的寄生潛能。本研究選址于運(yùn)城市鹽湖區(qū)，該地區(qū)梨園防治梨小食心蟲(chóng)的最佳時(shí)期為6 月中下旬至8 月中旬，而該時(shí)間段恰逢高溫酷暑，加上一定頻次的化學(xué)農(nóng)藥的施用，使得田間的氣候環(huán)境不太利于赤眼蜂對(duì)梨小食心蟲(chóng)的后續(xù)防治。本研究利用以紙杯放蜂器為核心的保護(hù)釋放技術(shù)，緩解了田間高溫、風(fēng)雨及它種天敵對(duì)蜂卡的傷害，并為羽化后成蜂提供了庇護(hù)所。此外，補(bǔ)充中間寄主米蛾卵的操作，也一定程度解決了田間食物不充足或寄主密度相對(duì)較低時(shí)釋放赤眼蜂難以生存的困境，利于其種群的維系和建立。但試驗(yàn)中也有一些問(wèn)題需要后續(xù)研究來(lái)完善，例如，保護(hù)釋放后田間米蛾卵卡上的黑卵數(shù)相對(duì)常規(guī)釋放后更多，這種寄生量的相對(duì)增多是因?yàn)楸Ｗo(hù)釋放后成蜂數(shù)量的增加還是成蜂壽命的延長(zhǎng)導(dǎo)致。此外，赤眼蜂在田間寄生米蛾卵卡后，雖然能正常羽化出蜂，但其子代蜂的質(zhì)量如何需要進(jìn)一步評(píng)估。