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        血管緊張素Ⅱ1型受體在口腔鱗癌中的表達(dá)及臨床意義

        2019-12-11 03:49:22楊金敏王露露陳盛吳萌萌朱翠平
        安徽醫(yī)藥 2019年12期
        關(guān)鍵詞:鱗癌癌癥口腔

        楊金敏,王露露,陳盛,吳萌萌,朱翠平

        口腔鱗癌起源于口腔上皮,其代表了大多數(shù)口腔癌癥。口腔癌發(fā)生通過兩個(gè)主要途徑發(fā)生:(1)正常上皮轉(zhuǎn)化為發(fā)育不良病變和(2)這些發(fā)育異常病變進(jìn)展為侵襲性鱗狀細(xì)胞癌。罹患口腔鱗癌的病人存活率較差,5年生存率只有50%左右[1],遺憾的是,治療策略在過去幾十年里進(jìn)展甚微。腎素-血管緊張素系統(tǒng)(Renin-Angiotensin-System,RAS)在血壓的控制中起關(guān)鍵作用,血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)通過血管緊張素Ⅱ1型受體(AT1受體)和血管緊張素Ⅱ2型受體(AT2受體)在RAS系統(tǒng)的調(diào)控中起著核心作用。近年多項(xiàng)研究表明AT1受體在多種癌癥組織中高表達(dá),并參與了癌癥的轉(zhuǎn)移、侵襲過程[2-3]。然而AT1受體在口腔鱗癌中是否表達(dá)以及對口腔鱗癌的進(jìn)展是否有影響還未見報(bào)道,本研究旨在分析口腔鱗癌組織中AT1受體的表達(dá)與口腔鱗癌的TNM分期和臨床分級之間的聯(lián)系,明確AT1受體對口腔鱗癌發(fā)生發(fā)展的影響。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料收集2012年1—12月期間在南京市口腔醫(yī)院46例住院接受手術(shù)治療并由兩位病理醫(yī)生通過術(shù)后常規(guī)病理確診為口腔鱗癌的病人的石蠟組織切片,其中20例切片中包含了正常的癌旁組織。其中男性27例,女性19例,年齡范圍為29~82歲,所有病人的臨床病例資料完整,術(shù)前均未接受過放化療,所有病人或其近親屬術(shù)前已簽署手術(shù)知情同意書,本研究符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會赫爾辛基宣言》相關(guān)要求。

        1.2 免疫組織化學(xué)和試劑口腔鱗癌石蠟切片利用梯度乙醇脫蠟至水,高壓蒸汽鍋行抗原修復(fù),血清封閉。滴加AT1受體多克隆抗體(購于美國Abcam公司,貨號ab124505),稀釋比例1∶400,4℃恒溫過夜,磷酸緩沖鹽溶液(PBS)沖洗3次;滴加生物標(biāo)記的二抗工作液,37℃孵育30 min;PBS沖洗3次;DAB試劑盒顯色,蒸餾水沖洗終止顯色反應(yīng)。蘇木精復(fù)染,脫水后二甲苯封片。

        1.3 結(jié)果判斷切片使用數(shù)字病理切片掃描儀(NanoZoomer-XR C12000,Japan)進(jìn)行掃描,隨機(jī)選取5個(gè)不重復(fù)等面積的視野計(jì)算口腔鱗癌的平均陽性細(xì)胞率。評估免疫反應(yīng)評分(IRS),通過染色比例評分(PS)乘以染色強(qiáng)度評分(IS)計(jì)算得出。PS分為0分(0%~<1%),1分(1%~<26%),2分(26%~<51%),3分(51%~<76%),4分(76%~100%)。IS分為0分(負(fù)),1分(弱),2分(中等)和3分(強(qiáng))。根據(jù)獲得的IRS評分,0分為陰性表達(dá),1~3分為弱表達(dá),4~12分為高表達(dá)[4]。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法運(yùn)用SPSS 23.0軟件,采用χ2檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)AT1受體的表達(dá)率及AT1受體表達(dá)與病人不同臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。P<0.05被認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 AT1受體在正常癌旁組織和口腔鱗癌中的表達(dá)免疫組化結(jié)果顯示AT1受體在正常的癌旁組織中有3例表達(dá),陽性表達(dá)率為15.0%;而口腔鱗癌組織中AT1受體表達(dá)41例,陽性表達(dá)率為89.1%,兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=109.696,P<0.01)。AT1受體在口腔鱗癌組織中弱陽性表達(dá)14例,強(qiáng)陽性表達(dá)27例(圖1)。

        2.2 AT1受體在口腔鱗癌中的表達(dá)與臨床參數(shù)的關(guān)聯(lián)調(diào)取病人的臨床資料,結(jié)合免疫組化的評分結(jié)果,對口腔鱗癌中AT1受體的表達(dá)與臨床參數(shù)之間的關(guān)系進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果顯示:AT1受體在口腔鱗癌中的表達(dá)與病人年齡、性別無關(guān),而在腫瘤大小、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期方面差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),見表1。

        表1 血管緊張素Ⅱ1型受體(AT1受體)的表達(dá)與口腔鱗癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系/例(%)

        3 討論

        口腔鱗癌是一種具有快速增殖能力和高侵襲特性的頭頸部癌癥,其5年生存率僅為50%左右。有報(bào)道稱口腔鱗癌病人的生存率與腫瘤大小、淋巴轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[5],眾多學(xué)者尋找能夠早期確診口腔鱗癌并鑒別惡性程度的生物分子標(biāo)志物,已報(bào)道核基質(zhì)蛋白特異AT序列結(jié)合蛋白2(SATB2)[6],轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)[7-8],環(huán)氧合酶-2(COX-2)[9]等參與了口腔鱗癌的發(fā)生發(fā)展,具有一定的診斷和預(yù)后意義。

        眾所周知,RAS系統(tǒng)在維持心血管穩(wěn)態(tài)、體液及電解質(zhì)平衡方面起著關(guān)鍵的作用。此外,局部RAS系統(tǒng)在多種組織中表達(dá)并對細(xì)胞的增殖,生長和代謝起著一定的作用。AngⅡ是主要的效應(yīng)器,通過其不同的受體發(fā)揮維持組織穩(wěn)態(tài)的作用。近年的臨床前研究表明RAS的各成分在多種人類癌癥組織及細(xì)胞中均有表達(dá),并參與了癌癥的發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)移[10]。AngⅡ通過AT1受體可促進(jìn)多種癌細(xì)胞的增殖,遷移及侵襲,而AT1受體的過表達(dá)通常表現(xiàn)為更強(qiáng)的侵襲性(更大的腫瘤,更高的臨床分級和更高的血管密度)和更差的臨床結(jié)果[11-13]。在實(shí)體腫瘤中,AngⅡ通過在腫瘤微環(huán)境中充當(dāng)旁分泌和或自分泌信號而增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞增殖和生長。同時(shí),AngⅡ還可促進(jìn)基質(zhì)細(xì)胞(如成纖維細(xì)胞,內(nèi)皮細(xì)胞,中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞)的生長,從而導(dǎo)致腫瘤生長因子的分泌增加[14]。大量證據(jù)表明AngⅡ/AT1受體信號通路在實(shí)體腫瘤中促進(jìn)血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)介導(dǎo)的血管生成,AT1受體表達(dá)與VEGF和VEGF受體(VEGFR)的表達(dá)及不同人類腫瘤中微血管的密度(MVD)相關(guān)[11]。AngⅡ還可促進(jìn)間質(zhì)細(xì)胞內(nèi)VEGF的表達(dá),VEGF也是誘導(dǎo)腫瘤血管通透性過高的主要原因之一[15-16]。研究表明AngⅡ/AT1受體信號通過多種機(jī)制損害腫瘤供血,如纖維組織介導(dǎo)的血管壓迫,VEGF誘導(dǎo)的血管滲漏和形態(tài)異常,AngⅡ介導(dǎo)的宿主血管收縮等,結(jié)果導(dǎo)致腫瘤缺氧加重及免疫抑制和逃避,而RAS系統(tǒng)抑制劑可以減少VEGF介導(dǎo)的血管生成和纖維增生,使腫瘤血管系統(tǒng)正?;?7]。本次研究結(jié)果顯示AT1受體主要在腫瘤細(xì)胞的胞質(zhì)和胞膜中表達(dá),陽性率較高為89.1%,而在正常的癌旁組織中AT1陽性表達(dá)率為15.0%,兩者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。同時(shí),AT1受體的表達(dá)和年齡、性別無關(guān),而與原發(fā)腫瘤組織的大小,淋巴轉(zhuǎn)移及臨床分期有關(guān),AT1受體的表達(dá)程度越高,腫瘤細(xì)胞的惡性程度越高。本次研究結(jié)果顯示RAS系統(tǒng)可能在口腔鱗癌的發(fā)生發(fā)展中起著一定的作用,AT1受體可作為判斷腫瘤惡性程度的重要指標(biāo);同時(shí),我們預(yù)測AT1受體在腫瘤中的高表達(dá),可能在口腔鱗癌細(xì)胞惡變,增殖、抗凋亡過程中起促進(jìn)作用。下一步的研究中,我們會增加研究樣本量,并增加細(xì)胞實(shí)驗(yàn),進(jìn)一步明確RAS系統(tǒng)在口腔鱗癌中的作用及相關(guān)機(jī)制。

        綜上所述,本次研究結(jié)果表明AT1受體與口腔鱗癌的發(fā)生發(fā)展及淋巴轉(zhuǎn)移密切相關(guān),可作為口腔鱗癌的診斷及惡性程度、預(yù)后的重要評判指標(biāo),為口腔鱗癌的治療提供新的思路。(本文圖1見插圖12-1)

        圖1 血管緊張素Ⅱ1型受體(AT1受體)在癌旁組織和口腔鱗癌組織中的表達(dá)(DAB染色×200):A為癌旁組織;B~D為口腔鱗癌組織,其中B為陰性表達(dá),C為低表達(dá),D為高表達(dá)

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