李巾 彭艷梅 陳娟 龔年春 肖德華

（湖南省中醫(yī)藥研究院 長沙410013）

中藥精制飲片是指選取道地、優(yōu)質(zhì)的藥材，按照傳統(tǒng)手工切制和傳統(tǒng)炮制方法，根據(jù)藥材自身特點(diǎn)利用藥材原有特征、花紋等，精心加工而成質(zhì)量上乘、療效確切的中藥飲片。其特點(diǎn)是飲片規(guī)格大小均勻，片形特色明顯，色香味俱全，外形美觀漂亮。原藥材質(zhì)量好壞以及炮制加工技術(shù)都對精制飲片的質(zhì)量有重要影響。白芍為毛茛科植物芍藥的干燥根；具有養(yǎng)血調(diào)經(jīng)、斂陰止汗、柔肝止痛、平抑肝陽的功能；常用于治療血虛萎黃、月經(jīng)不調(diào)、自汗、盜汗、脅痛、腹痛、四肢攣痛、頭痛眩暈等。2015年版《中國藥典》收載有白芍、炒白芍、酒白芍三種飲片。酒炙能降低白芍酸寒之性，酒白芍更擅于和中緩急、止痛[1]。2015年版《中國藥典》以及各省市的“藥材炮制規(guī)范”對白芍酒炙工藝的描述較簡單[2]。《湖南省中藥材炮制規(guī)范》[3]中對酒白芍的炮制描述如下：“取白芍片，照酒炙法加10%～20%的黃酒，悶潤至酒被吸盡，置鍋內(nèi)用文火加熱拌炒至表面微黃色，炒干?！本瓢咨殖善沸誀钊缦拢骸盀榻鼒A形或橢圓形的薄片，微黃色，片面平黃，有明顯的環(huán)紋和放射狀紋理。質(zhì)堅(jiān)脆，略具酒氣，味苦微酸?！币陨弦?guī)范缺少詳盡可控的工藝參數(shù)，因此有必要利用現(xiàn)代科技手段來規(guī)范酒白芍的炮制工藝，推動其向規(guī)范化、現(xiàn)代化方向邁進(jìn)。這對于白芍資源的開發(fā)利用具有十分重要的意義?，F(xiàn)報(bào)道如下：

1 材料

1260Ⅱ型高效液相色譜儀（安捷倫科技有限公司），MS-5型炒藥機(jī)（常州市金壇邁斯機(jī)械有限公司），AL204型電子天平 [梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]，電熱恒溫干燥箱（北京蘭貝石恒溫技術(shù)有限公司），打粉機(jī)（中南制藥機(jī)械廠），恒溫水浴鍋（江蘇金壇市中大儀器廠）。白芍藥材購自湖南省自然堂中藥飲片有限公司：黃酒（紹興女兒紅釀酒有限公司，酒精含量為14%，生產(chǎn)日期20180503），芍藥苷對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號110736-201741）。甲醇、乙腈為色譜純，水為自制超純水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 凈白芍的炮制 酒白芍的炮制以凈白芍片為原料，在本研究中首先以水分、芍藥苷為指標(biāo)，對凈白芍片炮制過程中的干燥條件進(jìn)行單因素考察。凈白芍炮制工藝如下：凈選，取白芍藥材，揀選除去非藥用部分，將雜質(zhì)、變質(zhì)品進(jìn)行大小粗細(xì)分檔。本研究中所用的白芍藥材直徑為1.0～1.5 cm。水洗，把藥材置于瀝水容器內(nèi)，攪拌白芍藥材，用大量清水洗滌附在藥材表面的泥沙和其他雜質(zhì)，洗凈后取出瀝干。悶潤，瀝干后的白芍藥材放入密閉容器內(nèi)，中途淋少量水1～2次。悶潤24 h，至白芍藥材中心有潮濕痕跡、易彎曲但不易折斷。切片，取悶潤后的白芍藥材切制成薄片（1～2 mm）。干燥，將切制后的白芍片平鋪于托盤中，厚度為2 cm，分批置于烘箱內(nèi)，干燥后取出，即得凈白芍。

2.1.1 干燥溫度的選擇 取3份切制的白芍片，每份100 g，平鋪于托盤中，厚度為2 cm，分別置于60℃、70℃、80℃烘箱內(nèi)，干燥4 h后取出，自然冷卻。按照《中國藥典》2015年版（四部）通則0832第二法進(jìn)行水分測定，按照《中國藥典》2015年版（一部）白芍[含量測定]項(xiàng)要求進(jìn)行芍藥苷含量分析，比較不同溫度干燥后凈白芍片的水分與芍藥苷含量，其中芍藥苷的含量以干燥品計(jì)。根據(jù)表1可見，干燥4 h，隨著干燥溫度由60℃升高到80℃，白芍片的水分含量降低，且三組實(shí)驗(yàn)的水分含量都符合《中國藥典》中要求的“不得高于14%”。芍藥苷的含量以干燥品計(jì)，與炮制前（5.24%）相比，凈白芍片中芍藥苷的含量降低。隨干燥溫度的升高芍藥苷含量由4.94%降低到4.86%，變化幅度小可以忽略不計(jì)。研究證明干燥溫度對白芍中芍藥苷的含量沒有明顯影響。凈白芍飲片干燥所需時(shí)間短，芍藥苷含量穩(wěn)定，為確保高溫不破壞白芍中其他成分，最終確定干燥溫度為60℃。

表1 干燥溫度的影響（%）

2.1.2 干燥時(shí)間的研究 取切制的白芍片，平鋪于托盤中，厚度為2 cm，置于60℃烘箱內(nèi)，0～5 h內(nèi)，每隔30 min取樣一次。按照《中國藥典》2015年版（四部）通則0832第二法進(jìn)行水分含量測定，按照《中國藥典》2015年版（一部）白芍[含量測定]項(xiàng)要求進(jìn)行芍藥苷含量分析。比較60℃干燥不同時(shí)間的凈白芍片的水分與芍藥苷含量，其中芍藥苷的含量以干燥品計(jì)。根據(jù)表2可見，隨著干燥時(shí)間延長，白芍片的水分含量逐漸降低。當(dāng)干燥時(shí)間為120 min時(shí)，水分含量為13.37%，達(dá)到了《中國藥典》要求的“不得高于14%”。芍藥苷的含量沒有明顯的變化趨勢，11組芍藥苷含量數(shù)據(jù)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為2.55%，可認(rèn)為11組數(shù)據(jù)沒有差異，說明干燥時(shí)間對白芍中芍藥苷的含量沒有明顯影響。水分含量低利于飲片的保存，因此確定凈白芍的干燥時(shí)間為180 min。

表2 干燥時(shí)間的影響（%）

2.1.3 凈白芍最佳干燥條件 經(jīng)過對干燥溫度和干燥時(shí)間的研究，表明白芍中芍藥苷受熱后性質(zhì)穩(wěn)定，在干燥過程中沒有明顯變化。按照《中國藥典》要求，凈白芍片的水分含量不得超過14.0%，芍藥苷含量以干燥品計(jì)不得少于1.2%，結(jié)合實(shí)際生產(chǎn)情況，確定凈白芍炮制中干燥條件為60℃干燥3 h。

2.2 酒白芍炮制

2.2.1 酒白芍正交試驗(yàn)設(shè)計(jì) 根據(jù)《中國藥典》及相關(guān)規(guī)定可知，酒白芍炮制工藝中，黃酒用量占10%～20%，使用文火酒炙（80～120℃），但炮制時(shí)間沒有相關(guān)規(guī)定，通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定炮制的時(shí)間在1～2 h為宜。在預(yù)實(shí)驗(yàn)及參考有關(guān)文獻(xiàn)[4～7]的基礎(chǔ)上，對酒白芍炮制過程中黃酒用量、酒炙溫度及酒炙時(shí)間三個(gè)因素各選擇三個(gè)水平進(jìn)行正交試驗(yàn)，采用L9（34）正交試驗(yàn)優(yōu)選酒白芍的炮制工藝。因素水平見表3～表4。以酒白芍外觀性狀、芍藥苷含量、水分含量為綜合評價(jià)指標(biāo)。稱取凈白芍，每份1 kg，按上述因素水平，進(jìn)行炮制試驗(yàn)。悶潤：按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)取相應(yīng)量的黃酒，凈白芍片拌勻之后裝入密封容器內(nèi)進(jìn)行悶潤，以黃酒全部被藥材吸盡為止，時(shí)間約為2 h。酒炙：按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的溫度先預(yù)熱炒藥機(jī)30 min，然后放入已悶潤的白芍片進(jìn)行加熱炮制，到規(guī)定時(shí)間后立即取出放冷，得到酒白芍。

表3 白芍酒炙工藝正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)因素水平表

表4 白芍酒炙工藝正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)因素水平表

2.2.2 酒炙樣品分析 按正交設(shè)計(jì)炮制得到9批酒白芍，對酒白芍樣品的性狀、水分含量、芍藥苷含量進(jìn)行分析。結(jié)果見表5。水分含量：按照《中國藥典》2015年版（四部）通則0832第二法進(jìn)行水分測定。芍藥苷含量：按照《中國藥典》2015年版（一部）白芍[含量測定]項(xiàng)要求進(jìn)行芍藥苷含量分析。性狀評價(jià)：外觀性狀評價(jià)是中藥飲片重要質(zhì)量評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)之一。2015年版《中國藥典》及2010年版《湖南省中藥飲片炮制規(guī)范》中酒白芍的性狀項(xiàng)描述為：酒白芍形如白芍片，表面微黃色，有的可見焦斑，微有酒香氣。本研究中擬定評分標(biāo)準(zhǔn)如下：焦黃色、類白色計(jì)3分，黃色計(jì)6分，微黃色計(jì)10分；無酒香味計(jì)3分，有酒香味計(jì)6分，微有酒香味計(jì)10分。

表5 酒白芍樣品分析結(jié)果（%）

2.2.3 炮制因素對芍藥苷含量的影響 由表6可見，使用酒白芍中芍藥苷的含量分析，黃酒用量、酒炙溫度及酒炙時(shí)間三個(gè)因素的F＜19，P＞0.05，證明以上三個(gè)因素對酒白芍中芍藥苷的含量沒有顯著影響。計(jì)算可知，9組實(shí)驗(yàn)炮制所得酒白芍中芍藥苷的含量為4.29%～5.25%，平均值為4.73%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為8.34%。因此，可認(rèn)為炮制過程中黃酒用量、酒炙溫度及酒炙時(shí)間對酒白芍中芍藥苷的含量沒有顯著影響。

表6 酒白芍中芍藥苷含量方差分析表

2.2.4 酒白芍最佳炮制工藝 本研究發(fā)現(xiàn)溫度及時(shí)間低水平組所制得的酒白芍顏色多較淡，酒香味濃，而溫度及時(shí)間中、高水平組所制得的酒白芍顏色多較深，酒香味淡。見圖1。在酒白芍性狀分析中，黃酒用量、炮制時(shí)間兩個(gè)因素的F＜19，P＞0.05，說明這兩個(gè)因素對酒白芍的性狀沒有顯著影響。見表7～表8。炮制溫度F＝22.75，P＜0.05，表明炮制溫度對酒白芍的性狀有顯著影響。通過比較F值的大小可見，炮制過程中黃酒用量、炮制溫度及炮制時(shí)間對酒白芍性狀影響的程度依次為：炮制溫度＞黃酒用量＞炮制時(shí)間。通過k值比較可知，酒白芍最佳炮制工藝為A2B2C1，即黃酒用量15%，100℃炒制1 h。

圖1 酒白芍樣品及樣品粉末

表7 酒白芍性狀結(jié)果分析

表8 性狀評分方差分析表

2.2.5 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn) 取凈白芍片1.5 kg，按優(yōu)選的炮制工藝制備酒白芍樣品3批，結(jié)果樣品均為微黃色或淡棕黃色，微有酒香氣。芍藥苷含量分別為4.02%、4.04%、4.29%。水分含量分別為 9.96%、9.74%、10.32%。結(jié)果表明該工藝穩(wěn)定、重復(fù)性良好。

3 討論

本研究以水分含量和芍藥苷含量對凈白芍炮制工藝研究。經(jīng)過對干燥溫度和干燥時(shí)間的研究，證明白芍中芍藥苷受熱后性質(zhì)穩(wěn)定，在干燥過程中沒有明顯變化。根據(jù)研究結(jié)果，確定凈白芍炮制中干燥條件為60℃干燥3 h。酒白芍炮制正交試驗(yàn)表明，酒白芍中芍藥苷的含量與炮制中黃酒用量、炮制時(shí)間、炮制溫度三個(gè)因素沒有顯著關(guān)系；炮制溫度對酒白芍的性狀有顯著影響。酒白芍炮制的最佳工藝為：取凈白芍，加入15%黃酒拌勻，悶潤2 h至黃酒被完全吸收，然后將炒藥機(jī)溫度設(shè)置為100℃，預(yù)熱0.5 h后放入悶潤后的白芍片炒制1 h，取出放冷，即得酒白芍飲片。按此最佳工藝炮制所得的白芍，其表面微黃色，微有酒香氣，與酒白芍傳統(tǒng)的外觀性狀表述相一致。