邢 蕾,熊忙利,杜 飛

(1.咸陽(yáng)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，陜西 咸陽(yáng) 712000;2.咸陽(yáng)市天使寵物醫(yī)院，陜西 咸陽(yáng) 712000)

紫錐菊又稱“紫松果菊”，為松果菊屬植物，其內(nèi)含多糖、黃酮、菊苣酸、糖蛋白、咖啡酸衍生物、生物堿和烷基酰胺類等多種有效成分。目前，紫錐菊及其各種制劑被廣泛用于預(yù)防和治療呼吸系統(tǒng)、皮膚感染以及由免疫缺陷引起的疾病[1]，臨床效果顯著[2]。

相關(guān)研究顯示，紫錐菊可有效提高和改善動(dòng)物的免疫功能。Kuhn 等研究懷孕和哺乳母豬使用紫錐菊后，其免疫系統(tǒng)相關(guān)功能性指標(biāo)均明顯得以改善，且未影響其后代胴體、生長(zhǎng)性能[3]。王長(zhǎng)彥等研究認(rèn)為，紫錐菊的合理使用可提高仔豬成活率及日增重，降低腹瀉發(fā)生率，同時(shí)有效增強(qiáng)仔豬的免疫機(jī)能[4]。

目前關(guān)于紫錐菊及其制劑在豬、禽、魚類等動(dòng)物中的應(yīng)用報(bào)道較多，但在犬中的應(yīng)用效果罕見報(bào)道。筆者試驗(yàn)旨在研究紫錐菊復(fù)方超微粉在幼犬飼糧中按照不同劑量添加后對(duì)幼犬生長(zhǎng)性能和免疫功能的影響。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

45日齡的中華田園犬幼犬16只，體重1.2～1.6 kg左右，由咸陽(yáng)市長(zhǎng)武縣犬繁育基地提供。試驗(yàn)前常規(guī)驅(qū)蟲與免疫，定時(shí)定量喂食，自由飲水。

紫錐菊、黃芪、甘草、板藍(lán)根、魚腥草，購(gòu)自咸陽(yáng)市禮泉縣中醫(yī)院。

犬免疫球蛋白IgA，IgG，IgM，γ-干擾素(IFN-γ)酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒購(gòu)自菲恩生物科技有限公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 配制紫錐菊復(fù)方超微粉 分別將紫錐菊、黃芪、甘草、板藍(lán)根、魚腥草分別置于 37 ℃溫箱中烘干，經(jīng)過 500 目超微粉碎(WFJ-18型微粉碎機(jī))處理后按照 2∶1∶1∶1∶1比例混合均勻制成紫錐菊復(fù)方超微粉。陰涼處密閉保存，備用[5]。

1.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 16只中華田園犬幼犬隨機(jī)分為4組(即Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組)，每組4只。Ⅰ組為空白對(duì)照組；Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組為添加紫錐菊復(fù)方超微粉組，添加比例分別為0.25%、0.50%和 0.75%。預(yù)試期 7 d，正試期 30 d，試驗(yàn)期間4組試驗(yàn)犬飼喂管理?xiàng)l件一致，每天定點(diǎn)飼喂兩次相應(yīng)日糧，上午8時(shí)下午18時(shí)各飼喂1次，每次150g，自由飲水。

1.2.3 基礎(chǔ)日糧配制及營(yíng)養(yǎng)水平 參照國(guó)標(biāo)GB/T 31216-2014配制基礎(chǔ)日糧，原料選用優(yōu)質(zhì)肉類及其副產(chǎn)品、玉米粉、小麥粉、精煉大豆油、動(dòng)物性脂肪、骨粉、青菜、全脂奶粉、魚肝油、酵母、胡蘿卜?；A(chǔ)日糧成分及配比見表1。

1.2.4 試驗(yàn)指標(biāo)測(cè)定 在試驗(yàn)開始前和結(jié)束后對(duì)所有犬只空腹稱重，計(jì)算各處理組每只犬的平均日增重。分別于試驗(yàn)的第0、15和30 d采集血液，采血前保證試驗(yàn)犬空腹12 h，前肢靜脈采血(每次每只采血2 mL)，3 000 轉(zhuǎn)·min-1離心 10 min，分離血清，分裝于 EP 管內(nèi)，采用ELISA法檢測(cè)血清中IgA、IgM、IgG、IFN-γ水平，嚴(yán)格依照說明書操作。

1.3 數(shù)據(jù)處理

應(yīng)用spss20.0軟件分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)，具體進(jìn)行單因素方差分析和Duncan多重比較，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 紫錐菊復(fù)方超微粉對(duì)幼犬生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，與Ⅰ組比較，Ⅲ組、Ⅳ組平均日增重均顯著提高(P<0. 05); 與Ⅱ組比較，Ⅲ組平均日增重顯著提高(P<0. 05)，試驗(yàn)Ⅲ組平均日增重比對(duì)照Ⅰ組提高了7.04%，說明在幼犬基礎(chǔ)日糧中添加 0.50%、0.75% 的紫錐菊復(fù)方超微粉可顯著改善幼犬的生長(zhǎng)性能，且添加劑量為0.50%時(shí)改善效果更明顯。

2.2 紫錐菊復(fù)方超微粉對(duì)幼犬免疫球蛋白水平的影響

由表3可知，第0天時(shí)，各組IgA、IgM、IgG水平差異均不顯著(P>0.05)；第15 d時(shí)，Ⅲ組IgA水平顯著高于Ⅰ組(P<0.05)。Ⅲ組、Ⅳ組IgM水平顯著高于Ⅰ組(P<0.05)；第30 d時(shí)，Ⅲ組、Ⅳ組IgA、IgG、IgM水平均顯著高于Ⅰ組。Ⅲ組、Ⅳ組IgA水平差異顯著(P<0.05)。Ⅲ組、Ⅳ組IgG、IgM水平差異不顯著?？梢?，堅(jiān)持在幼犬基礎(chǔ)日糧中添加一定比例紫錐菊復(fù)方超微粉可顯著提高幼犬的IgA、IgG、IgM水平，添加比例0.50%時(shí)免疫效果改善最明顯。

表1 基礎(chǔ)日糧成分及配比

表2 幼犬生長(zhǎng)性能測(cè)定結(jié)果

注：同列小寫字母不同表示差異顯著(p<0.05)，相同表示差異不顯著(p>0.05)。

表3 幼犬免疫球蛋白水平測(cè)定結(jié)果

注：同行小寫字母不同表示差異顯著(p<0.05)，相同表示差異不顯著(p>0.05)。

2.3 紫錐菊復(fù)方超微粉對(duì)幼犬血清干擾素水平的影響

由表4可知，第0天時(shí)，各組IFN-γ水平差異不顯著(P>0.05)；第15 d時(shí)，Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組都顯著高于Ⅰ組(P<0.05)；第30 d時(shí)，Ⅲ組顯著高于Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅳ組(P<0.05)。Ⅱ組、Ⅳ組也顯著高于Ⅰ組(P<0.05)。

表4 幼犬血清中IFN-γ水平檢測(cè)結(jié)果

注：同列小寫字母不同表示差異顯著(p<0.05)，相同表示差異不顯著(p>0.05)。

3 討論與結(jié)論

3.1 紫錐菊復(fù)方超微粉對(duì)幼犬生長(zhǎng)性能的影響

劉榮生[5]等研究表明，在仔豬飼糧中使用紫錐菊添加劑可顯著改善斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能，差異顯著(P<0. 05)。筆者試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)Ⅲ組平均日增重最大，比對(duì)照Ⅰ組提高了7.04%(P<0. 05)，與上述研究結(jié)果一致，說明在幼犬基礎(chǔ)飼糧中使用紫錐菊復(fù)方超微粉可有效改善飼糧口味，刺激幼犬食欲，調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)功能，促進(jìn)新陳代謝，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率，進(jìn)而提高飼料轉(zhuǎn)化率，有效提高幼犬平均日增重，從而顯著改善幼犬生長(zhǎng)性能。

3.2 紫錐菊復(fù)方超微粉對(duì)幼犬免疫功能的影響

免疫球蛋白是一類具有抗體活性和重要生物學(xué)功能的動(dòng)物蛋白，在整個(gè)機(jī)體體液免疫中擔(dān)負(fù)著重要使命，血清免疫球蛋白(Ig)的測(cè)定是檢查體液免疫功能最常用的方法，是反映體液免疫功能強(qiáng)弱的重要參考指標(biāo)。血清中的免疫球蛋白主要有三種，即IgA、IgM、IgG，其測(cè)定值可直接反映研究對(duì)象體液免疫功能情況，測(cè)定值越高則研究對(duì)象體液免疫功能越強(qiáng)，反之越弱[6～8]。楊侃侃等[9]研究表明，在仔豬日糧中添加刺五加提取物可有效增強(qiáng)仔豬免疫功能。筆者試驗(yàn)中，添加0.50%復(fù)方超微粉的試驗(yàn)Ⅲ組血清中IgA、IgG、IgM水平均較Ⅰ組顯著提高 (P<0. 05)。

干擾素含量微少但可發(fā)揮多種生物學(xué)功能，是細(xì)胞應(yīng)對(duì)外界刺激自行產(chǎn)生的一種特殊蛋白質(zhì)，其中IFN-γ最重要的功能是激活巨噬細(xì)胞和NK細(xì)胞，輔助抗體和吞噬細(xì)胞抵抗病原微生物的侵害，介導(dǎo)免疫溶菌作用，起到增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體免疫功能的作用。伍參榮等[10]認(rèn)為七味白術(shù)散可有助于增強(qiáng)仔鼠IFN-γ的表達(dá)，提高細(xì)胞活性，有效增強(qiáng)機(jī)體的免疫能力。舒迎霜等[11]試驗(yàn)結(jié)果證明，黃芪多糖可顯著或極顯著提高犬血清中IFN-γ、IgA、IgM、IgG水平，從而增強(qiáng)犬的免疫能力。從表4可見，在犬糧中使用紫錐菊復(fù)方超微粉可增強(qiáng)幼犬血清中IFN-γ水平，其中試驗(yàn)Ⅲ組顯著高于對(duì)照Ⅰ組(P<0. 05)。

綜上所述，本試驗(yàn)原料選用黃芪、甘草、板藍(lán)根、魚腥草與紫錐菊，制成復(fù)方超微粉，其含有豐富的活性物質(zhì)和微量礦物質(zhì)元素，可起到健胃消積、清熱解毒、涼血利咽、疏風(fēng)散熱、增加飼料適口性的作用。該復(fù)方超微粉同時(shí)具有營(yíng)養(yǎng)和藥物作用，試驗(yàn)結(jié)果表明，以0.50%的比例添加到幼犬基礎(chǔ)日糧中可顯著改善幼犬的生長(zhǎng)性能和免疫功能。