李亞輝

（河南醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校檢驗系，河南鄭州451191）

在所有引起疾病感染的病原菌內(nèi)，細(xì)菌L 型主要為細(xì)菌細(xì)胞壁發(fā)生部分性缺損或者全部喪失而生成的細(xì)菌種類。而細(xì)胞壁發(fā)生缺失的過程有些為自發(fā)性，有一些屬于人工誘導(dǎo)，因人工誘導(dǎo)出現(xiàn)缺失的頻率明顯比自發(fā)性高出很多。痰液樣本檢驗過程中通常使用瓊脂培養(yǎng)基，菌落呈現(xiàn)“油煎蛋”狀［1］。對痰液樣本細(xì)菌學(xué)檢驗結(jié)果造成影響的因素諸多，本研究結(jié)合實際情況選擇2015 年6 月至2018 年6 月本校附屬河南省第二人民醫(yī)院收治的1 280 例呼吸道感染者為研究樣本，全面分析抗生素、采集方法兩個獨(dú)立因素對痰液樣本細(xì)菌學(xué)檢驗結(jié)果影響情況，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015 年6 月至2018 年6 月1 280 例呼吸道感染患者為研究樣本。經(jīng)診斷以及相關(guān)檢查，受試者確診，符合衛(wèi)計委頒布的關(guān)于此類疾病的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。本研究經(jīng)倫理委員會審批通過且受試者均知情同意。

將入院日期為單號的640 例患者依照就診順序隨機(jī)平均分為觀察Ⅰ組及對照Ⅰ組，各320 例。觀察Ⅰ組男179 例，女141 例，年齡49～78 歲，平均（63.62±4.85）歲。對照I 組男177 例，女143 例，年齡48～77 歲，平均（62.25±5.14）歲。兩組患者基線資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

將入院日期為雙號的640 例患者依照是否使用抗生素分為觀察Ⅱ組以及對照Ⅱ組。觀察Ⅱ組共324 例，未使用抗生素，男183 例，女141 例，年齡50～80 歲，平均（65.28±5.24）歲。對照Ⅱ組共計316 例，使用抗生素。男162 例，女154 例，年齡50～79 歲，平均（65.25±3.96）歲。除使用抗生素情況外，兩組患者基線資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 樣本收集方式

醫(yī)護(hù)人員在收集患者痰液樣本24 h 前，應(yīng)當(dāng)開展有關(guān)健康知識宣傳教育工作，包括收集痰液樣本的方式、檢驗重要性和檢驗過程中需要注意的事項等。醫(yī)護(hù)人員應(yīng)當(dāng)結(jié)合患者的實際情況，填寫痰液培養(yǎng)檢驗項目，同時注明抗生素使用情況和應(yīng)用時間。所有患者均在入院后第一日開展樣本收集工作，詳細(xì)情況為：①對照Ⅰ組。使用自然咳痰法收集痰液樣本，病患在清晨起床之后用清水漱口，連續(xù)進(jìn)行3 次，此后用力咳出痰液，使用經(jīng)無菌化處理的容器，接收第一口痰液，并于60 min 內(nèi)送至檢驗科等待檢測，工作人員對于痰液樣本開展常規(guī)化細(xì)菌學(xué)檢測［2］。②觀察Ⅰ組。使用改進(jìn)后的痰液樣本收集方式，完成樣本采集工作。病患清晨起床之后先刷牙，醫(yī)護(hù)人員對患者開展樣本采集、健康知識宣教，之后使用清水漱口，連續(xù)進(jìn)行3 次，咳出痰液使用經(jīng)無菌化處理的容器接收后，將痰液樣本送到檢驗科等待檢驗。工作人員首先應(yīng)當(dāng)將痰液放置在無菌試管內(nèi)，并加入劑量為15～20 ml 的無菌等滲鹽水，震蕩處理5～10 s，利用接種環(huán)蘸取試管底痰液樣本到另一試管之中，如此進(jìn)行2 次后開展細(xì)菌學(xué)檢驗工作。③對照Ⅱ組以及觀察Ⅱ組的痰液樣本收集方式與對照Ⅰ組收集方法相同。

1.3 樣本合格標(biāo)準(zhǔn)

①理想樣本：在低倍鏡視野下，樣本的鱗狀上皮細(xì)胞數(shù)目在10 個以下，白細(xì)胞數(shù)目25 個以上；②合格樣本：低倍鏡視野線下，白細(xì)胞數(shù)量在25 個以上，鱗狀上皮細(xì)胞數(shù)目在25 個以下，在此同時細(xì)菌種類在3 種以下；③不合格樣本：鱗狀上皮細(xì)胞數(shù)目在25 個以上。針對不合格樣本，應(yīng)當(dāng)進(jìn)行二次采集工作，直至合格后方可進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。痰液樣本的細(xì)菌學(xué)檢測工作步驟依照我國臨床檢驗操作規(guī)程中的有關(guān)規(guī)定加以執(zhí)行。

病原菌檢測使用API（Analytic Products INC）全自動生物鑒定分析軟件系統(tǒng)和配套的鑒定及藥敏測試板，常規(guī)試驗培養(yǎng)基和鑒定試劑。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

使用SPSS 20.0 統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計數(shù)資料以百分比（%） 表示，采用χ2檢驗。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對照Ⅰ組以及觀察Ⅰ組痰液樣本合格情況及病原菌檢出情況

與對照Ⅰ組比較，觀察Ⅰ組的樣本合格率明顯更高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。觀察Ⅰ組的痰液樣本陽性檢出率比對照Ⅰ組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 對照I 組以及觀察I 組痰液樣本合格情況及病原菌檢出情況 例（%）

2.2 對照Ⅱ組以及觀察Ⅱ組痰液樣本合格情況及病原菌檢出情況

觀察Ⅱ組與對照組Ⅱ組的樣本合格率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。與對照Ⅱ組比較，觀察Ⅱ組痰液樣本病原菌陽性率更高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 對照Ⅱ組以及觀察Ⅱ組痰液樣本合格情況及病原菌檢出情況 例（%）

3 討論

細(xì)菌的細(xì)胞壁之所以會產(chǎn)生缺陷，主要是由于在特定情況下細(xì)胞壁肽聚糖結(jié)構(gòu)受損或者在細(xì)胞壁合成過程中發(fā)生抑制［3］。革蘭陽性球菌細(xì)胞壁通常表現(xiàn)為全體缺失，在這種狀況下，原生質(zhì)中僅有一層細(xì)胞膜將其包繞，體現(xiàn)為球形，被稱為原生質(zhì)體［4］。

革蘭陰性桿菌通過溶菌酶處理之后，因細(xì)胞壁內(nèi)包含較少量肽聚糖，且留存有部分或者全部外膜加以保護(hù)，使其內(nèi)部滲透壓明顯比革蘭陽性球菌低，其所有滲透環(huán)境相對較小，并且也存在抵抗能力，學(xué)術(shù)界通常稱之為原生質(zhì)圓球體［5］。

患者咳出的痰屬于病理性產(chǎn)物，主要是由于支氣管、肺部以及氣管內(nèi)發(fā)生炎癥而產(chǎn)生的分泌物。臨床對于患者檢查痰液樣本主要開展病原菌檢查，所取得的結(jié)果對患者病情診斷和判定有一定的作用。因此，相關(guān)人員在收集痰液樣本的過程中，應(yīng)全面依照相關(guān)操作規(guī)程完成痰液樣本收集［6］。

在開展痰液樣本采集過程之中，以往臨床通常使用自然咳痰法完成該項工作。但值得說明的是，這種方法所收集的樣本容易混合唾液和鼻涕等異物，進(jìn)而令樣本受到咽喉部細(xì)菌影響，導(dǎo)致結(jié)果失真，對患者臨床診斷和治療造成影響［7］。

本次實驗相關(guān)研究結(jié)果指出，觀察Ⅰ組樣本合格率以及陽性率比對照Ⅰ組高，這也在一定程度上證實經(jīng)過規(guī)范嚴(yán)格化的收集方法，能夠明顯提升痰液樣本的檢出質(zhì)量，進(jìn)而令相關(guān)結(jié)果更符合實驗要求。對患者開展痰液樣本檢查，相關(guān)知識宣教可以提升患者對于檢查的認(rèn)識，并盡可能的配合醫(yī)護(hù)人員完成采集工作，取得高質(zhì)量樣本。另外，使用這種方法還能夠降低患者因不當(dāng)操作引起的疲勞感，醫(yī)護(hù)人員對病患開展口咽部清潔指導(dǎo)，其中包括正確的漱口、刷牙方式，有助于降低口咽部細(xì)菌對痰液樣本影響。對所取得的痰液樣本開展震蕩洗滌可更有效地消除口咽部細(xì)菌所造成的影響，進(jìn)而全面提升樣本合格率［8-9］。

抗生素會抑制相關(guān)細(xì)菌的生成，同樣會對患者痰液樣本檢測結(jié)果造成不良影響。因此，醫(yī)護(hù)人員在對患者開展痰液樣本采集之前，如果患者已經(jīng)使用抗生素，將導(dǎo)致檢驗結(jié)果陽性率下降，從而難以判定患者病情，耽誤治療［10-11］。

本實驗相關(guān)研究結(jié)果指出，觀察Ⅱ組所取得的檢測結(jié)果陽性率明顯比對照Ⅱ組高，證實使用抗生素會對痰液樣本細(xì)菌學(xué)結(jié)果產(chǎn)生不良影響，導(dǎo)致檢驗結(jié)果陽性率降低。由此能夠看出，應(yīng)盡可能在患者使用抗生素之前進(jìn)行痰液樣本細(xì)菌學(xué)檢驗，可有效提升檢驗結(jié)果精準(zhǔn)度。另外，痰液樣本檢驗結(jié)果也會受到送檢時間以及送檢條件等不良因素影響，某些細(xì)菌在離體后會在短時間內(nèi)出現(xiàn)自融情況，從而導(dǎo)致檢驗結(jié)果不甚準(zhǔn)確。所以在完成痰液樣本采集之后，應(yīng)盡可能在短時間內(nèi)送檢，以全面提升結(jié)果精準(zhǔn)度，為臨床診斷和治療提供有效依據(jù)。