武文輝 崔立春 黨升強 王劍

肝癌與多種肝炎病毒相關(guān)，如乙型和丙型肝炎病毒等[1]。共刺激分子B7-H3與多種炎癥反應(yīng)之間均存在密切的關(guān)聯(lián)，并且在多種實體腫瘤中也有表達，同時白細胞介素-21(IL-21)與免疫調(diào)節(jié)及抗腫瘤也存在關(guān)聯(lián)[2]。研究選取在我院治療的HBV相關(guān)性肝癌，同時選取慢性乙型肝炎患者、乙型肝炎肝硬化患者以及健康志愿者作為對照，對所有受檢人員血清B7-H3、IL-21進行了檢測，以探究這些指標與患者病情嚴重程度的關(guān)系，現(xiàn)報告如下；

資料與方法

一、一般資料

選取2016年3月至2018年3月在我院治療的HBV相關(guān)性肝癌患者94例，同時選取慢性乙型肝炎患者56例，乙型肝炎肝硬化60例以及健康志愿者70例作為對照，納入標準：(1)肝癌符合《中國肝癌診治指南》中的診斷標準，慢性乙肝或肝硬化符合《慢性乙型肝炎防治指南》中的診斷標準；(2)均經(jīng)病理學(xué)確診；(3)患者及家屬知情同意。排除標準：(1)合并有HCV、HIV、梅毒、肝吸蟲等其他病毒及寄生蟲感染；(2)已行放化療或免疫治療者；(3)有嚴重心、腎、肺等重要臟器疾病。各受試者性別、年齡一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 各受試者一般資料比較

二、實驗方法

HBV相關(guān)性肝癌患者、慢性乙型肝炎患者、乙型肝炎肝硬化患者在治療前后抽取全血3 mL，健康志愿者同期抽取全血3 mL，將得到的血液立即放入含促凝劑的試管中，靜置30 min，離心3 min。取1.0 mL血清保存在-80 ℃冰箱內(nèi)，所有血清學(xué)標本均送至實驗室檢測，通過ELISA方法對B7-H3、IL-21進行定量測定。B7-H3 ELISA試劑盒其生產(chǎn)廠家為上海仁捷生物科技有限公司，IL-21 ELISA試劑盒其生產(chǎn)廠家為上海江萊生物科技有效公司。兩種指標測定步驟一致，首先樣本孔先加入待測樣本12 μL，隨后滴入40 μL樣本稀釋液，在加入樣本的樣本孔中再次加人100 μL酶標抗體，然后將反應(yīng)孔封住，37 ℃孵育1 h，在洗板之后，各加底物A、B 50 μL，37 ℃避光孵育15 min，最后加入終止液 50 μL，15 min內(nèi)測定。

MRI檢查：檢查者取仰臥位，將表面相控振線圈分成兩組，圍繞其上腹部進行掃描。每個序列的掃描均通過兩次深吸氣末閉氣完成。通過測量軟件包直接對ADC值進行測量。

三、統(tǒng)計學(xué)處理

結(jié) 果

一、各組血清B7-H3、IL-21及MRI ADC值比較

肝癌患者B7-H3明顯高于健康者、慢性乙型肝炎和乙型肝炎肝硬化患者(P<0.05)；肝癌患者IL-21明顯高于健康者(P<0.05)，而與慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化患者比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；肝癌ADC值明顯高于健康者、慢性乙型肝炎和乙型肝炎肝硬化患者(P<0.05)。見表2。

二、B7-H3與肝癌患者臨床病理關(guān)系

Ⅲ～Ⅳ期肝癌患者血清B7-H3水平明顯高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.05)，見表3。

表3 B7-H3與肝癌患者臨床病理關(guān)系

三、IL-21與肝癌患者臨床病理關(guān)系

HBV DNA陽性患者IL-21水平明顯高于HBV DNA陰性患者(P<0.05)。見表4。

四、ADC值與肝癌患者臨床病理關(guān)系

Ⅲ～Ⅳ期性患者ADC值明顯低于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.05)。見表5。

表2 各組血清B7-H3、IL-21及ADC值比較

注：a與健康者比較P<0.05；b與慢性乙型肝炎比較P<0.05；c與乙型肝炎肝硬化比較P<0.05

表4 IL-21與肝癌患者臨床病理關(guān)系

表5 ADC值與肝癌患者臨床病理關(guān)系

五、相關(guān)性分析

將肝癌患者B7-H3、IL-21與HBV DNA進行相關(guān)分析，結(jié)果顯示B7-H3、IL-21與HBV DNA無相關(guān)性(P>0.05)。

討 論

肝癌與HBV持續(xù)感染存在密切關(guān)聯(lián)，HBV會使機體產(chǎn)生過度的細胞免疫反應(yīng)，導(dǎo)致大面積的肝細胞損傷，造成重癥肝炎，但患者此時細胞免疫功能低下不能有效清除病毒，易導(dǎo)致感染慢性化，會有轉(zhuǎn)化為肝癌的危險[7]。

B7-H3是Ⅰ型跨膜蛋白，其是機體免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)因子，與多種自身免疫性疾病有關(guān)[10]。肝癌患者B7-H3明顯高于健康者、慢性乙型肝炎和乙型肝炎肝硬化患者，該結(jié)果的表明B7-H3在原發(fā)性肝癌患者組織中呈現(xiàn)高表達，在臨床中可將其發(fā)展成為診斷及治療的新靶點。HBV通過引起機體的免疫應(yīng)答，使多種細胞因子參與該過程的免疫反應(yīng)，并對免疫反應(yīng)進行調(diào)節(jié)，而IL-21 作為炎癥介質(zhì)，參與并影響著乙型肝炎疾病發(fā)生、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸，在與HBV相關(guān)的各種肝病中表達量均較高[11]。因此肝癌患者IL-21明顯高于健康者，而與慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化患者比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，提示了IL-21與HBV的高相關(guān)性。ADC值作為準確反映病變組織器官的功能狀況的指標 , 是一種較理想的無創(chuàng)性檢查肝臟病變的方法。本研究表明，肝癌ADC值明顯高于健康者、慢性乙型肝炎和乙型肝炎肝硬化患者，該結(jié)果說明了體內(nèi)具有惡性腫瘤細胞的患者的ADC值較高，提示我們可將ADC值作為腫瘤判斷的指標。

Ⅲ～Ⅳ期肝癌患者血清B7-H3水平明顯高于Ⅰ～Ⅱ期患者，由此結(jié)果可知隨著肝癌患者病情加深，其血清B7-H3水平與其呈現(xiàn)正相關(guān)，在臨床中可用其血清B7-H3水平參與臨床分期的預(yù)判，提高其分期判斷的準確度。HBV DNA陽性患者IL-21水平明顯高于HBV DNA陰性患者，該結(jié)果說明經(jīng)HBV感染的患者其體內(nèi)IL-21較高，其含量升高主要因為機體對HBV產(chǎn)生免疫應(yīng)答，并誘導(dǎo)炎癥因子IL-21高表達。將肝癌患者B7-H3、IL-21與HBV DNA進行相關(guān)分析，結(jié)果顯示B7-H3、IL-21與HBV DNA無相關(guān)性。

本研究創(chuàng)新點在于選取了較少有報道的B7-H3、IL-21，來研究其與HBV相關(guān)性肝癌患之間的相關(guān)性，進一步分析了B7-H3表達與IL-21之間的關(guān)系，為肝癌的診斷提供了較為靈敏的新指標。

綜上所述，HBV相關(guān)性肝癌患者B7-H3、IL-21水平明顯升高，B7-H3可能與臨床分期有關(guān)，而IL-21與HBV DNA復(fù)制水平高低無關(guān)，可用于臨床病理分期的判斷。