郭軍鵬 李予煊 周慶瑩 葛斌 蘇穎 劉宏巖

(長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林 長(zhǎng)春 130117)

胃腸動(dòng)力不足是調(diào)節(jié)胃腸運(yùn)動(dòng)的神經(jīng)-內(nèi)分泌系統(tǒng)紊亂所致的功能障礙性疾病〔1～3〕。傳統(tǒng)中醫(yī)理論認(rèn)為本病是脾胃升降失常所致。脾升胃降是脾胃運(yùn)化之道，脾胃失和則胃腸運(yùn)納障礙〔4～6〕。許多中藥能夠調(diào)節(jié)脾胃繼而緩解胃腸動(dòng)力不足。附子理中湯源自理中湯方，追加附子與方中干姜共同振奮中陽(yáng)為君，臣以人參、白術(shù)益氣健脾，佐以甘草調(diào)和，取其溫中回陽(yáng)、健脾益氣之功效〔7，8〕。本研究應(yīng)用附子理中湯治療脾虛小鼠，觀察其對(duì)胃內(nèi)色素相對(duì)殘留率、小腸推進(jìn)率和相關(guān)胃腸激素水平的影響。

1 材料和方法

1.1動(dòng)物分組及給藥 按體重隨機(jī)取30只雄性昆明小鼠，灌胃給予大黃水煎劑〔40 g/(kg·d)〕連續(xù)7 d造成脾虛模型，另取10只作為空白對(duì)照組?？瞻讓?duì)照組和模型組各10只灌胃生理鹽水0.2 ml/d，另20只造模成功小鼠中10只給予西沙必利0.5 mg/(kg·d)為西沙必利組，余10只給予附子理中湯12.5 g/(kg·d)為附子理中湯組，連續(xù)給藥6 d。

1.2藥物及試劑 大黃水煎液的制備，將大黃以8倍體積的水煮沸15 min，倒出藥汁，再以6倍體積水重復(fù)一次，合并濾液，濃縮至100%，即每ml藥汁含生藥1 g。附子理中湯制備以人參∶白術(shù)∶干姜∶甘草∶附子=1∶1∶1∶1∶1比例組方，按動(dòng)物與人體的體重?fù)Q算大鼠用藥劑量，8倍體積的純凈水浸泡1 h，水煎30 min。倒出藥汁，再以6倍體積水重復(fù)一次，將濾液合并，濃縮至含1.25 g/ml生藥。西沙必利購(gòu)自浙江京新藥業(yè)(批號(hào)：B1412081)。胃動(dòng)素(MTL)、P物質(zhì)(SP)和Ghrelin試劑盒購(gòu)自北京華英生物技術(shù)研究所。

1.3胃腸動(dòng)力檢測(cè) 末次給藥1 h后，灌胃2%葡聚糖藍(lán)(BD)0.2 ml，12 min后解剖分離全胃腸，剪開(kāi)胃壁將胃內(nèi)殘留物溶于4 ml去離子水中，應(yīng)用分光光度計(jì)測(cè)上清液和2%BD(標(biāo)準(zhǔn)品)的吸光度(620 nm)。各組上清液與標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度比值計(jì)為胃內(nèi)色素殘留率〔6〕。在平板上展開(kāi)并平鋪小腸，測(cè)量幽門(mén)至BD最前沿的距離計(jì)為推進(jìn)距離，以此與幽門(mén)至回盲部小腸全長(zhǎng)之比計(jì)為小腸推進(jìn)率。

1.4血清MTL、SP和Ghrelin水平測(cè)定 取小鼠血于離心管中，室溫下靜置30 min，離心3 000 r/min，取上清，按試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析及t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1各組胃腸動(dòng)力比較 與空白對(duì)照組比較，模型組胃腸動(dòng)力顯著下降(P<0.01)；與模型組比較，西沙必利和附子理中湯組胃內(nèi)色素相對(duì)殘留率均顯著減少(P<0.01)，兩組小腸推進(jìn)率均顯著增加(P<0.01)。見(jiàn)表1。

表1 各組胃腸動(dòng)力比較

與空白對(duì)照組比較：1)P<0.01；與模型組比較：2)P<0.01

2.2各組血清MTL、SP和Ghrelin水平比較 與空白對(duì)照組比較，模型組血清MTL、SP和Ghrelin水平均顯著下降(P<0.01)；與模型組比較，西沙必利和附子理中湯組三者水平均顯著增加(P<0.05，P<0.01)。見(jiàn)表2。

表2 各組血清MTL、SP和Ghrelin水平比較

與空白對(duì)照組比較：1)P<0.01;與模型組比較：2)P<0.01,3)P<0.05

3 討 論

胃腸壁神經(jīng)系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)相互聯(lián)系構(gòu)成的腦-腸軸，與胃泌素(GAS)、MTL、SP、血管活性腸肽(VIP)、一氧化氮(NO)等物質(zhì)共同調(diào)節(jié)胃腸運(yùn)動(dòng)〔9～12〕。移行性復(fù)合運(yùn)動(dòng)(MMCs)是胃腸道消化間期經(jīng)典的運(yùn)動(dòng)方式，具有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ 4個(gè)時(shí)相，其中Ⅲ相是連續(xù)的、有節(jié)律的、強(qiáng)烈的收縮期，而且與MTL釋放正相關(guān)。Ghrelin與MTL發(fā)揮作用方式相似，均是與相應(yīng)受體結(jié)合，而且兩者的受體序列高度相似。Ghrelin通過(guò)膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)縮短MMC時(shí)長(zhǎng)，增加胃腸動(dòng)力〔13，14〕。SP在胃腸道內(nèi)分布廣泛，作用靶點(diǎn)較多，既能以激素形式作用于相應(yīng)受體，又能作為興奮性神經(jīng)遞質(zhì)而促進(jìn)胃腸功能〔15〕。附子理中湯能夠改善脾虛小鼠胃腸動(dòng)力不足，其作用機(jī)制可能與增加MTL、SP和Ghrelin等胃腸道興奮性激素水平有關(guān)。